ক্যাটালাস পরীক্ষা: যুক্তি, কৌশল এবং ব্যবহার - জীববিদ্যা - 2025

Catalase পরীক্ষা চিকিতসা ল্যাবরেটরিজ ব্যবহৃত ঐ ব্যাকটেরিয়া এটি ভোগদখল মধ্যে এনজাইম catalase উপস্থিতিতে প্রকাশ করার জন্য একটি পদ্ধতি রয়েছে। একসাথে গ্রাম দাগের সাথে, এগুলিই মূল পরীক্ষাগুলি যা সদ্য বিচ্ছিন্ন অণুজীবগুলিতে করা উচিত। এই পরীক্ষাগুলি মাইক্রোবায়োলজিস্টকে প্রশ্নের মধ্যে থাকা অণুজীবের যথাযথ সনাক্তকরণের জন্য অনুসরণীয় পদক্ষেপগুলিতে গাইড করে।

সাধারণভাবে, সাইটোক্রোমযুক্ত ব্যাকটিরিয়াগুলি এনজাইম ক্যাটালাসের অধিকারী, যার অর্থ ফ্যুটুটিটিভ এ্যারোবিক এবং অ্যানেরোবিক ব্যাকটেরিয়াগুলির এটি থাকা উচিত। তবে স্ট্রেপ্টোকোকাসের মতো ব্যতিক্রম রয়েছে, যা ফ্যালুটিভেটিভ অ্যানেরোবিক অণুজীবের পরেও এনজাইম ক্যাটালিজের অধিকারী নয়।

ইতিবাচক প্রতিক্রিয়া দেখিয়ে ক্যাটালাস টেস্ট চালানো। উত্স: কোনও মেশিন-পঠনযোগ্য লেখক সরবরাহ করেন নি। নাস ধরে নেওয়া (কপিরাইট দাবির উপর ভিত্তি করে)।

এ কারণেই স্ট্যাটিলোকোসেসি এবং মাইক্রোকোকাসি পরিবার (উভয় ক্যাটালাস পজিটিভ) স্ট্রেপ্টোকোসেসি পরিবার (ক্যাটালাস নেতিবাচক) থেকে আলাদা করার জন্য ক্যাটালেজ পরীক্ষাটি প্রাথমিকভাবে ব্যবহৃত হয়।

তেমনি, ব্যাসিলাস (ক্যাটালাস পজিটিভ) জেনাস ক্লোস্ট্রিডিয়াম (ক্যাটালাস নেতিবাচক) থেকে অন্যদের মধ্যে আলাদা হয়।

ভিত্তি

ক্যাটালেস হাইড্রোপারক্সাইডাস হিসাবে শ্রেণীবদ্ধ একটি এনজাইম, এর অর্থ তারা হাইড্রোজেন পারক্সাইড (এইচ ₂ ও ₂) একটি স্তর হিসাবে ব্যবহার করে ।

এটি একটি অক্সিডোরোডেজ হিসাবেও বিবেচিত হয়, যেহেতু প্রতিক্রিয়া যেখানে এটি অংশ নেয় সেখানে এমন একটি উপাদান রয়েছে যা ইলেক্ট্রন দাতা (পদার্থ হ্রাস করা) এবং অন্য একটি ইলেক্ট্রন রিসেপ্টর (অক্সিডাইজিং পদার্থ) হিসাবে কাজ করে।

ক্যাটালেস এমন একটি প্রোটিন যা চারটি তুচ্ছ লোহা পরমাণু (ফে ⁺⁺⁺) সহ একটি গদ্যযুক্ত গ্রুপ ধারণ করে, তাই এটি একটি হোমোপ্রোটিন। ফেরিক আয়নটি বিক্রিয়া চলাকালীন অক্সাইডাইজড থাকে।

এটি বলা যেতে পারে যে ক্যাটালেজ হ'ল ডিটক্সাইফাইং এনজাইম, কারণ এর কাজটি ব্যাকটিরিয়া বিপাকের সময় ব্যাকটিরিয়া বিপাকের সময় যে পদার্থগুলি উত্পাদিত হয় তা নির্মূল করা। এই পদার্থগুলির মধ্যে হাইড্রোজেন পারঅক্সাইড রয়েছে।

হাইড্রোজেন পারক্সাইড অ্যারোবিকভাবে শর্করার ভাঙ্গন থেকে তৈরি হয়। এই প্রক্রিয়াটি নিম্নলিখিতভাবে ঘটে:

সুপার অক্সাইড আয়ন (ও ₂ ^-) (ফ্রি র‌্যাডিকাল) এয়ারোবিক রুটে গ্লুকোজের আত্তীকরণের শেষ পণ্য হিসাবে গঠিত। এটি বিষাক্ত এবং এনজাইম সুপার অক্সাইড বরখাস্ত দ্বারা নির্মূল করা হয় যা এটিকে গ্যাসীয় অক্সিজেন এবং হাইড্রোজেন পারক্সাইডে রূপান্তর করে।

হাইড্রোজেন পারক্সাইডও ব্যাকটেরিয়ার জন্য বিষাক্ত এবং অবশ্যই তা অপসারণ করতে হবে। এনজাইম ক্যাটালেস হাইড্রোজেন পারক্সাইডকে জল এবং অক্সিজেনে ভেঙে দেয়।

ক্যাটালাস হাইড্রোজেন পারক্সাইড ছাড়া অন্য স্তরগুলিতে যেমন অ্যালকোহল, অ্যালডিহাইডস, অ্যাসিড, সুগন্ধযুক্ত অ্যামাইনস এবং ফিনোলগুলিতে কাজ করতে পারে। তবে হাইড্রোজেন পারঅক্সাইড অন্যান্য বিষাক্ত যৌগিক মিথিল এবং ইথাইল অ্যালকোহলকে জারণ করতে ক্যাটালাস ব্যবহার করতে পারেন।

তেমনি, ফ্যাটোক্যাসিক কোষগুলিতে ক্যাটালাস উপস্থিত থাকে এবং এটিকে হাইড্রোজেন পারক্সাইডের বিষাক্ত ক্রিয়া থেকে রক্ষা করে।

ক্যাটালাস টেস্টের রুটিন টেকনিক

-স্লাইড পদ্ধতি

উপকরণ

3% হাইড্রোজেন পারক্সাইড (10 খণ্ড)।

মাইক্রোস্কোপ স্লাইড

নিষ্পত্তিযোগ্য প্লাস্টিকের হ্যান্ডেল বা কাঠের টুথপিক।

প্রক্রিয়া

আগরটি যে আগত সেটিকে স্পর্শ না করে অধ্যয়নের জন্য পর্যাপ্ত উপনিবেশ গ্রহণ করুন। উপনিবেশটি অবশ্যই তাজা হতে হবে, যা 18 থেকে 24 ঘন্টা সংস্কৃতি থেকে।

উপনিবেশটি শুকনো স্লাইডে রাখুন এবং এতে 3% হাইড্রোজেন পারক্সাইডের ড্রপ যুক্ত করুন (30% এইচ ₂ ও ₂ এছাড়াও ব্যবহার করা যেতে পারে)। বুদবুদগুলি মুক্তি পেয়েছে কিনা তা অবিলম্বে পর্যবেক্ষণ করুন।

ব্যাখ্যা

ইতিবাচক প্রতিক্রিয়া: গ্যাসের বিবর্তন, বুদবুদ গঠনের দ্বারা প্রমাণিত (শক্ত বুদবুদ)।

নেতিবাচক প্রতিক্রিয়া: বুদবুদ গঠন নয়।

খাঁটি সংস্কৃতিতে প্রত্যক্ষ পদ্ধতি

খাঁটি প্লেট বা ওয়েজ সংস্কৃতিতে 3% এইচ ₂ ও ₂ এর 1 মিলি রাখুন যাতে রক্ত ​​থাকে না (পছন্দসই পুষ্টিকর আগর)। তত্ক্ষণাত বুদবুদ গঠন আছে কি না তা পর্যবেক্ষণ করুন। 30% এইচ ₂ ও ₂ ব্যবহার করা যেতে পারে ।

এটি পোর্টা অবজেক্ট পদ্ধতি হিসাবে একই ব্যাখ্যা করা হয়।

-মাথোদ কৈশিক নল বা ছত্রাক এবং পেট্রিশকো সহ

67 মিমি কৈশিক নলটি 20 মিমি উচ্চতাতে 3% হাইড্রোজেন পারক্সাইড দিয়ে কৈশিকতার দ্বারা পূরণ করুন।

3% এইচ ₂ ও ₂ দিয়ে পূর্ণ কৈশিক দিয়ে অধ্যয়ন করার জন্য বিচ্ছিন্ন কলোনিকে স্পর্শ করুন _। কৈশিকটি বুদবুদগুলি প্রায় 10 সেকেন্ডের মধ্যে পূর্ণ হয় তা পর্যবেক্ষণ করুন। এই পদ্ধতিটি ক্রসগুলিতে প্রতিক্রিয়ার অর্ধ-পরিমাণ নির্ধারণের অনুমতি দেয়:

ক্রস ছাড়া কোনও বুদবুদ নেই (নেতিবাচক প্রতিক্রিয়া)।

+ ---- কয়েকটি বুদবুদ (দুর্বল বা বিলম্বিত প্রতিক্রিয়া)।

++ --– প্রচুর বুদবুদ (মাঝারি বিক্রিয়া)।

+++ - বুদবুদগুলি বিপরীত প্রান্তে পৌঁছায় (তীব্র প্রতিক্রিয়া)।

প্রশ্নোত্তর দেয় যে ক্যাটালাস পরীক্ষার জন্য টেলর এবং আচানজার পদ্ধতি

একটি পরিষ্কার, শুকনো স্লাইডে একটি বিচ্ছিন্ন কলোনী রাখুন, তারপরে 0.5% H ₂ O ₂ এর একটি ড্রপ রাখুন এবং একটি কাভারস্লিপ দিয়ে coverেকে রাখুন। আটকে যাওয়া বুদবুদগুলির গঠন আছে কিনা তা পর্যবেক্ষণ করুন।

ব্যাখ্যা: বুদবুদগুলির উপস্থিতি একটি ইতিবাচক প্রতিক্রিয়া নির্দেশ করে। কোনও বুদবুদ নয়, এটি একটি নেতিবাচক প্রতিক্রিয়া হিসাবে ব্যাখ্যা করা হয়।

মাইকোব্যাকটেরিয়াম প্রজাতির জন্য ক্যাটালেস পরীক্ষা

এই কৌশলটি পিএইচ এবং তাপমাত্রা নিয়ন্ত্রণ করে করা দরকার। এটি অবশ্যই একটি ল্যামিনার ফ্লো হুডের অধীনে বাহিত হতে হবে, যেহেতু বিভিন্ন মাইকোব্যাকটেরিয়াম প্রজাতির হেরফেরটি বিপজ্জনক।

-Materials

হাইড্রোজেন পারক্সাইড 30% বা 110 ভলিউম (সুপারোক্সাল)।

ফসফেট বাফার পিএইচ 7

80% এর মধ্যে 10%

মাইকোব্যাক্টেরিয়াম ওয়েজ সংস্কৃতি 3 থেকে 4 সপ্তাহের জন্য

-Preparation

ফসফেট বাফার পিএইচ 7

ওজন করতে:

1.361 গ্রাম অ্যানহাইড্রস মনোপোটাসিয়াম ফসফেট (কেএইচ ₂ পিও ₄)।

1.420 গ্রাম অ্যানহাইড্রস ডিসোডিয়াম (Na2HPO3) ফসফেট।

উভয় লবণকে অল্প জীবাণুমুক্ত পাত্রে জলে দ্রবীভূত করুন এবং জল দিয়ে 1000 মিলি পর্যন্ত তৈরি করুন।

80% এর মধ্যে 10%

বাণিজ্যিকভাবে কেন্দ্রীভূত 80 এর মধ্যবর্তী স্থানে 1:10 হ্রাস তৈরি করুন, এটি নিম্নলিখিত হিসাবে এগিয়ে যেতে:

80 এর মধ্যে 1 মিলি পান এবং এটি একটি সামান্য পাতিত পানিতে রাখুন, দ্রবীভূত করুন এবং তারপরে 10 মিলি জল দিয়ে ভলিউমটি তৈরি করুন।

ফাইনাল রিএজেন্ট

80% এর সমান পরিমাণ (সমান অংশ) এর সাথে একটি পরিমাণে ফসফেট বাফার মিশ্রিত করুন। আপনি কতটা প্রস্তুত করতে চান তা পরীক্ষাগারে নির্ধারণ করুন।

-প্রসেস

জীবাণুমুক্ত স্ক্রু-ক্যাপড টেস্ট টিউবে (বেকলাইট) 5 মিলি ফসফেট বাফার রাখুন।

একটি ইনোকুলেশন লুপের সাথে, ওয়েজগুলিতে বীজযুক্ত মাইকোব্যাক্টেরিয়ামের পর্যাপ্ত পরিমাণ কলোনী নিন এবং ফসফেট বাফারে দ্রবীভূত করুন।

থ্রেডটিকে অতিরিক্ত শক্ত করে না দিয়ে টিউবটি ক্যাপ করুন। 20 থেকে 30 মিনিটের জন্য 68 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে একটি জলে স্নানের মধ্যে রাখুন। বাইরে বেরোন এবং 22-25 ডিগ্রি সেলসিয়াসে শীতল হতে দিন

চূড়ান্ত রিএজেন্ট (মিশ্রণ) এর 0.5 মিলি পরিমাপ করুন এবং এটি ঠান্ডা দ্রবণ সহ নলটিতে যুক্ত করুন। বুদবুদ গঠন বা না পর্যবেক্ষণ করুন।

এটি আগের কৌশলগুলির মতোই ব্যাখ্যা করা হয়।

ব্যবহার

সমৃদ্ধ মিডিয়ায় যখন কলোনির বৃদ্ধি পাওয়া যায়, তখন প্রাপ্ত কলোনীগুলিতে একটি গ্রাম দাগ এবং একটি ক্যাটালিজ পরীক্ষা করা উচিত। এটি সুনির্দিষ্ট সনাক্তকরণের জন্য অনুসরণের পদ্ধতিগুলির জন্য মাইক্রোবায়োলজিস্টকে গাইড করবে।

সূত্র: লেখক এমএসসি দ্বারা প্রস্তুত। মেরিলসা গিল

QA তে

হাইড্রোজেন পারক্সাইডের রিজেন্টের ভাল পারফরম্যান্সের মূল্যায়ন করার জন্য স্টাফিলোকক্কাস অরিয়াসকে ধনাত্মক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে স্ট্রেফিলোকক্কাস অ্যারিয়াস এবং নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে স্ট্রেপ্টোকোকাস স্প স্ট্রেনের মতো নতুন সংস্কৃতিযুক্ত স্ট্রেন ব্যবহার করুন use

ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে কাজ করে এমন আরেকটি বিকল্প হ'ল রক্তের আগাতে হাইড্রোজেন পারক্সাইডের একটি ফোঁটা রাখা, এরিথ্রোসাইটগুলিতে ক্যাটালাস থাকে, সুতরাং, যদি রিএজেন্ট ভাল অবস্থায় থাকে তবে সেখানে একটি বুদবুদ হবে।

একটি চকোলেট আগরটি নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে, এখানে ইতিমধ্যে এরিথ্রোসাইটগুলি লিজড এবং পরীক্ষা নেতিবাচক।

সীমাবদ্ধতা

- পরীক্ষার জন্য পুরানো সংস্কৃতি ব্যবহার করবেন না, কারণ এটি মিথ্যা নেতিবাচক কারণ হতে পারে।

- রক্ত ​​আগর সংস্কৃতি থেকে কলোনী গ্রহণ করা বন্ধ করুন, যদি আপনি আগরটি স্পর্শ না করার বিষয়ে সতর্ক হন; এই প্রক্রিয়াটি মিথ্যা ইতিবাচক দিকে পরিচালিত করতে পারে, কারণ লাল রক্ত ​​কোষগুলিতে ক্যাটালাস থাকে।

-যদি আপনি প্লাটিনাম হ্যান্ডেল দিয়ে কলোনী গ্রহণ করেন তবে পদ্ধতির ক্রমটিকে বিপরীত করবেন না কারণ এটি মিথ্যা ধনাত্মকতা তৈরি করতে পারে। এটি হ'ল প্লাটিনাম হাইড্রোজেন পারক্সাইডের সাথে প্রতিক্রিয়া জানাতে সক্ষম, যার ফলে বুদবুদ।

-হাইড্রোজেন পারক্সাইড রিএজেন্টটি খুব পুরানো হলে ব্যবহার করবেন না, কারণ রিএজেন্ট খুব অস্থির এবং সময়ের সাথে সাথে ভেঙে পড়ার প্রবণতা রয়েছে।

-হাইড্রোজেন পারক্সাইড রাইজেন্ট হালকা থেকে সুরক্ষিত এবং ক্ষতি প্রতিরোধের জন্য ফ্রিজে রেখে দিন।

-হাইড্রোজেন পেরোক্সাইড রিজেেন্ট প্রতিবার ব্যবহৃত হওয়ার পরে এটির একটি মান নিয়ন্ত্রণ করুন।

- অ্যাকাউন্টে গ্রহণ করুন যে যদি 30% এইচ ₂ ও ₂ ব্যবহার করা হয় তবে 3% এইচ ₂ ও _{2 এর} সাথে চালিত প্রতিক্রিয়াগুলির তুলনায় প্রতিক্রিয়াগুলি শক্তিশালী ।

তথ্যসূত্র

1. কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 5 তম সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
2. ফোর্বস বি, সাহম ডি, ওয়েসফেল্ড এ (২০০৯)। বেইলি এবং স্কট মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 12 এড। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
3. ম্যাক ফাদ্দিন জে। (2003)। ক্লিনিকাল গুরুত্বের ব্যাকটেরিয়া সনাক্তকরণের জন্য জৈব রাসায়নিক পরীক্ষা। তৃতীয় সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা। বুয়েনস আইরেস আর্জেন্টিনা।
4. বিডি ল্যাবরেটরিজ। ক্যাটালাস-গোটারিও রিএজেন্ট। এখানে উপলব্ধ: http://winklerltda.cl l
5. Vadequímica ল্যাবরেটরিজ। পেরোক্সাইড। খণ্ড এবং শতাংশের মধ্যে সমতা। উপলভ্য: vadequimica.com