স্পোর স্টেনিং: যুক্তি, কৌশল এবং ব্যবহার - জীববিদ্যা - 2025

বীজগুটি পুনরায় প্রতিরোধের কাঠামো যা যখন প্রতিকূল অবস্থার মধ্যে কিছু ব্যাকটেরিয়া গণের গঠন রঙ ব্যবহার করা পদ্ধতি নেই; এই কাঠামো বেঁচে থাকার এক ফর্মের সাথে মিলে যায়।

অনেক জেনেরা রয়েছে যা স্পোরগুলি গঠন করে; তবে প্রধান ব্যাসিলাস এবং ক্লোস্ট্রিডিয়াম। এই জেনারগুলিকে আরও প্রাসঙ্গিক হিসাবে বিবেচনা করা হয় কারণ এগুলি মানুষের জন্য প্যাথোজেনিক প্রজাতি রয়েছে।

শেফার দ্বারা স্পোর স্টেনিং - ফুলটন বা উইার্টজ-কনক্লিন পদ্ধতি। উইকিমিডিয়া কমন্স থেকে এবং তাম্ব (মূল আপলোডার)

প্রতিটি ব্যাসিলাস একটি বীজজাতাকে জন্ম দিতে পারে। প্রস্তুতির দাগ দেওয়ার সময়, বীজগাছটি ব্যাসিলাসের (এন্ডোস্পোর) ভিতরে বা এর বাইরে (এক্সপোসোর) পাওয়া যায়। ব্যাকটেরিয়াগুলির জন্য প্রচলিত স্টেনিং কৌশলগুলির সাথে - যেমন গ্রাম দাগ - বীজগুলি বর্ণহীন থাকে।

বর্তমানে, বেশ কয়েকটি স্টেনিং পদ্ধতি রয়েছে যা এটি রঞ্জনজনিত বীজের ঘন কাঠামোতে প্রবেশ করতে সক্ষম। এই পদ্ধতিগুলি খুব বৈচিত্রময়; এর মধ্যে রয়েছে ডারার কৌশল, মেলারের দাগ এবং শেফার - ফুলটন পদ্ধতি, যা ওয়ার্টজ-কনক্লিন নামেও পরিচিত।

উল্লিখিত সমস্ত কৌশলগুলির মধ্যে শেফার-ফুলটন পদ্ধতিটি রুটিন পরীক্ষাগারগুলিতে সর্বাধিক ব্যবহৃত হয়। এটির নামকরণ করা হয়েছিল দুই মাইক্রোবায়োলজিস্টের নামে যারা 1930 সালে রঙিন তৈরি করেছিলেন: অ্যালিসিয়া শেফার এবং ম্যাকডোনাল্ড ফুলটন। যাইহোক, কৌশলটি কখনও কখনও 1900 এর দশক থেকে দুটি ব্যাকটিরিওলজিস্টের পরে নামকরণ করা হয় উইার্টজ-কনক্লিন।

ভিত্তি

স্পোরগুলি প্রচলিত দাগের সাথে দাগ দেয় না কারণ তাদের ঘন প্রাচীর রয়েছে। স্পোরগুলির জটিল রচনা বেশিরভাগ বর্ণবাদীর প্রবেশকে বাধা দেয়।

যদি স্পোরারটি বাইরে থেকে অধ্যয়ন করা হয় তবে নিম্নলিখিত স্তরগুলি পর্যবেক্ষণ করা হয়: প্রথমে এক্সপোরিয়াম রয়েছে যা গ্লাইকোপ্রোটিন দ্বারা গঠিত পাতলাতম এবং বাহ্যিক স্তর।

এরপরেই কিউটিকাল আসে, যা উচ্চ তাপমাত্রার প্রতিরোধ সরবরাহ করে, তারপরে পেপটিডোগ্লিকেন দ্বারা গঠিত কর্টেক্স থাকে। পরে বেসের প্রাচীর যা প্রোটোপ্লাস্টকে সুরক্ষা দেয়।

বীজঘাটি একটি ডিহাইড্রেটেড কাঠামো যা 15% ক্যালসিয়াম এবং ডাইপিকোলিনিক অ্যাসিড ধারণ করে। অতএব, বেশিরভাগ স্পোর স্টেনিং কৌশলগুলি তাপ প্রয়োগের উপর নির্ভর করে যাতে ছোপানো ঘন কাঠামোটি প্রবেশ করতে পারে।

একবার বীজপাতার দাগ হয়ে যায়, এটি রঞ্জকতা অপসারণ করতে পারে না। শেফার - ফুলটনের কৌশলতে ম্যালাচাইট সবুজ গাছের কোষে প্রবেশ করে এবং যখন তাপ প্রয়োগ করা হয় তখন এন্ডোস্পোর পাশাপাশি এক্সোস্পোরগুলিতে প্রবেশ করে।

জল দিয়ে ধুয়ে, রঞ্জক উদ্ভিদ কোষ থেকে সরানো হয়। এটি ঘটে কারণ ম্যালাচাইট সবুজ রঞ্জক কিছুটা মৌলিক, তাই এটি উদ্ভিজ্জ কোষের সাথে দুর্বলভাবে আবদ্ধ হয়।

পরিবর্তে, এটি বীজ থেকে বেরিয়ে আসতে পারে না এবং অবশেষে ব্যাসিলাসটি সাফ্রানিনের সাথে প্রতিরোধ করা হয়। এই ফাউন্ডেশনটি বাকী কৌশলগুলির জন্য বৈধ, যেখানে একই জাতীয় কিছু ঘটে।

স্পোর স্টেনিং কৌশলগুলি

বীজপাতার দাগ কাটানোর জন্য, অধ্যয়ন করার জন্য সন্দেহজনক স্ট্রেনের একটি খাঁটি সংস্কৃতি অর্জন করতে হবে।

সংশ্লেষকে সংশ্লেষিত করতে অণুজীবকে উত্সাহিত করতে সংস্কৃতিটি 24 ঘন্টা চরম তাপমাত্রার শিকার হয়। এই জন্য, সংস্কৃতিটি 44 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে একটি চুলায় বা 24 বা 48 ঘন্টা জন্য একটি ফ্রিজে (8 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেড) রাখা যেতে পারে।

যদি উল্লিখিত তাপমাত্রায় খুব বেশি সময় রেখে দেওয়া হয় তবে কেবল এক্সপোসপোরগুলি পর্যবেক্ষণ করা হবে, যেহেতু সমস্ত এন্ডোস্পোরগুলি ইতিমধ্যে ব্যাসিলাস থেকে বেরিয়ে গেছে।

সময় শেষে, কয়েক ফোঁটা জীবাণুমুক্ত শারীরবৃত্তীয় দ্রবণ একটি পরিষ্কার স্লাইডে রাখা উচিত। তারপরে সংস্কৃতির একটি ছোট অংশ নেওয়া হয় এবং একটি সূক্ষ্ম ছড়িয়ে দেওয়া হয়।

এরপরে, এটি শুকনো রেখে দেওয়া হয়, উত্তাপে স্থির করা হয় এবং নীচে বর্ণিত একটি কৌশল দিয়ে রঙ্গিন করা হয়:

ডার্নার টেকনিক

1- একটি পরীক্ষার টিউবগুলিতে পাতিত পানিতে ছড়িয়ে ছিটিয়ে থাকা জীবাণুগুলির ঘনীভূত সাসপেনশন প্রস্তুত করুন এবং ফিল্টার কিনিয়ুন কার্বল ফুচিনের সমান পরিমাণে যুক্ত করুন।

2- 5 থেকে 10 মিনিটের মধ্যে ফুটন্ত জল দিয়ে একটি স্নানটিতে নলটি রাখুন।

3- একটি পরিষ্কার স্লাইডে, 10% জলীয় নিগ্রোসিন দ্রবণের একটি ফোটা, সিদ্ধ এবং ফিল্টারযুক্ত পূর্ববর্তী স্থগিতাদেশের একটি ড্রপ মিশ্রিত করুন।

৪- মৃদু আঁচে দ্রুত ছড়িয়ে শুকিয়ে নিন।

5- একটি 100 এক্স উদ্দেশ্য (নিমজ্জন) সঙ্গে পরীক্ষা।

স্পোরগুলি লাল হয়ে যায় এবং ব্যাকটেরিয়া কোষগুলি গা dark় ধূসর পটভূমির তুলনায় প্রায় বর্ণহীন প্রদর্শিত হয়।

পরিবর্তিত ডর্ণার প্রযুক্তি

1- বর্ধিত অণুজীবের একটি স্থগিতাদেশ একটি স্লাইডে ছড়িয়ে পড়ে এবং উত্তাপে স্থির হয়।

2- নমুনাটি একটি ফিল্টার পেপার স্ট্রিপ দিয়ে আচ্ছাদিত যা এতে কার্বল ফুচসিন যুক্ত করা হয়। বাঞ্ছার বিবর্তন উত্পন্ন না হওয়া অবধি বুনসেন বার্নারের শিখার সাথে কলারান্ট 5 থেকে 7 মিনিটের জন্য উত্তপ্ত হয়। তারপরে কাগজটি সরানো হয়।

3- প্রস্তুতিটি জল দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয় এবং তারপরে শোষণকারী কাগজ দিয়ে শুকানো হয়।

4- নিগ্রোজিন বা সুই ছড়িয়ে দেওয়ার জন্য দ্বিতীয় স্লাইড ব্যবহার করে 10% নিগ্রোসিনের পাতলা ফিল্ম দিয়ে স্মিয়ারটি Coverেকে দিন।

স্পোর এবং ব্যাকটেরিয়া দ্বারা নেওয়া রঙিনটি পূর্বের শিল্পে বর্ণিত হিসাবে একই।

শেফার - ফুলটন বা উইার্টজ-কনক্লিন কৌশল

1- একটি স্লাইডে স্পরুলেটেড মাইক্রো অর্গানিজমকে স্থগিত করে একটি সূক্ষ্ম ত্বক তৈরি করুন এবং উত্তাপটি স্থির করুন।

2- 5% ম্যালাচাইট সবুজ জলীয় দ্রবণ সহ স্লাইডটি কভার করুন (আপনি স্লাইডে একটি ফিল্টার পেপার রাখতে পারেন)।

3- বাষ্পের নিঃসরণ এবং শিখা অপসারণের জন্য বুনসেন বার্নারের শিখায় উত্তাপ। অপারেশনটি 6 থেকে 10 মিনিটের জন্য পুনরাবৃত্তি করুন। প্রক্রিয়া চলাকালীন যদি ম্যালাচাইট সবুজ সমাধান খুব বেশি বাষ্পীভূত হয় তবে আরও যুক্ত করা যায় can

4- ফিল্টার পেপার সরান (ইনস্টল করা থাকলে) এবং জলে ধুয়ে ফেলুন।

5- 30 সেকেন্ডের জন্য 0.5% জলীয় সাফরিনিন সহ স্লাইডটি Coverেকে দিন (প্রযুক্তির কিছু রূপগুলি 0.1% জলীয় সাফ্রেনিন ব্যবহার করে 3 মিনিটের জন্য রেখে দিন)।

এই কৌশলটি দিয়ে, স্পোরগুলি সবুজ এবং ব্যাসিলি লাল প্রদর্শিত হয়।

এটির অসুবিধা রয়েছে যে তরুণ সংস্কৃতির এন্ডোস্পোরগুলি ভাল দাগ দেয় না, যেহেতু তারা অত্যন্ত পরিষ্কার বা বর্ণহীন প্রদর্শিত হয়। এটি এড়াতে, 48 ঘন্টা ইনকিউবেশন সংস্কৃতি ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয়।

মেলার কৌশল

1- ক্লোরোফর্ম দিয়ে 2 মিনিটের জন্য স্মিয়ারটি Coverেকে রাখুন।

2- ক্লোরোফর্মটি ত্যাগ করুন।

3- 5 মিনিটের জন্য 5% ক্রোমিক অ্যাসিড দিয়ে Coverেকে দিন।

4- পাতিত জল দিয়ে ধুয়ে নিন

5- শীটটি কার্বল ফুচিন-ফেনিকাডা দিয়ে আচ্ছাদিত এবং বাষ্পের নির্গমন পর্যন্ত বুসন বার্নারের শিখার সংস্পর্শে আসে; তারপরে এটি শিখা থেকে কয়েক মুহুর্তের জন্য সরানো হবে। 10 মিনিট শেষ না হওয়া পর্যন্ত অপারেশনটি পুনরাবৃত্তি হয়।

6- জল দিয়ে ধুয়ে ফেলুন।

7- রঙিন করতে অ্যাসিডযুক্ত ইথানল (হাইড্রোক্লোরিক অ্যালকোহল) ব্যবহার করুন। এটি 20 বা 30 সেকেন্ডের জন্য রেখে দেওয়া হয়েছে।

8- পাতিত জল দিয়ে ধুয়ে নিন।

9- 5 মিনিটের জন্য মেথিলিন নীল দিয়ে শীটটি coveringেকে আলাদা করুন।

10- পাতিত জল দিয়ে ধুয়ে ফেলুন।

11- এটি শুকিয়ে দিন এবং নমুনাকে একটি মাইক্রোস্কোপে নিয়ে যান।

স্পোরগুলি লাল এবং ব্যাসিলি নীল রঙের প্রদর্শিত হয়। বাষ্পে শ্বাস না নেওয়া গুরুত্বপূর্ণ, কারণ এগুলি বিষাক্ত এবং দীর্ঘমেয়াদে কার্সিনোজেনিক হতে পারে।

তাপ ছাড়াই পরিবর্তিত মেলার কৌশল

2007 সালে হায়ামা এবং তার সহযোগীরা মেলার কৌশলটি একটি পরিবর্তন তৈরি করে। তারা ছোপানো গরম করার পদক্ষেপটি মুছে ফেলে এবং প্রতি 10 মিলি কার্বোল ফুচিন-কার্বল দ্রবণের জন্য সার্ফ্যাক্ট্যান্ট টেরজিটল 7 এর 2 ফোঁটা যুক্ত করে এটি প্রতিস্থাপন করে। একই ফলাফল প্রাপ্ত ছিল।

অ্যাপ্লিকেশন

স্পোরগুলির স্টেনিং প্যাথোজেন সনাক্তকরণের জন্য খুব মূল্যবান এবং দরকারী তথ্য সরবরাহ করে, যেহেতু এটির উপস্থিতি, তার আকৃতি, ব্যাসিলাসের মধ্যে অবস্থান এবং উদ্ভিদ কোষকে বিকৃত করার ক্ষমতা বা না, সেই তথ্য যা প্রজাতিগুলিকে গাইড করতে পারে একটি নির্দিষ্ট ঘরানার মধ্যে জড়িত।

এই প্রসঙ্গে, এটি বলাই বাহুল্য যে স্পোরগুলি বৃত্তাকার বা ডিম্বাকৃতি হতে পারে, সেগুলি কেন্দ্রের মধ্যে বা প্যারেন্ট্রাল, সাবমিনাল বা টার্মিনাল অবস্থানেও থাকতে পারে।

এন্ডোস্পোরস এবং এক্সপোসোরগুলির আকার এবং অবস্থানের চিত্র ia

উদাহরণ

- ক্লোস্ট্রিডিয়াম ডিফিসিল একটি টার্মিনাল অবস্থানে একটি ডিম্বাকৃতি বীজ গঠন করে যা ব্যাসিলাসকে বিকৃত করে।

- ক্লোস্ট্রিডিয়াম টেরটিয়ামের বীজঘটিত ডিম্বাকৃতি, ব্যাসিলাসকে বিকৃত করে না এবং এটি টার্মিনাল স্তরে অবস্থিত।

- ক্লোস্ট্রিডিয়াম তেতানির এন্ডোস্পোরটি টার্মিনাল এবং এটি ড্রামস্টিকের উপস্থিতি প্রদান করে ব্যাসিলাসকে বিকৃত করে।

- ক্লোস্ট্রিডিয়াম বটুলিনাম, সি হিস্টোলিটিকাম, সি নভি এবং সি সেপটিকামের স্পোরগুলি গোলাকার বা সাবটার্মিনাল ওভাল এবং ব্যাসিলাসকে বিকৃত করে।

- ক্লোস্ট্রিডিয়াম সর্ডেলি এর এন্ডোস্পোরটি সামান্য বিকৃতি সহ কেন্দ্রীয় অবস্থানে অবস্থিত।

কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। (৫ ম সংস্করণ) আর্জেন্টিনা, সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ

তথ্যসূত্র

1. হায়ামা এম, ওনা কে, কোজাকাই টি, উমেদা এস, ফুজিমোটো জে, ওটা এইচ, কাওয়াকামি ওয়াই তাপ প্রয়োগ না করে ব্যাকটিরিয়া বীজ দাগের জন্য সরলিকৃত কৌশলটির প্রস্তাব - মোলারের পদ্ধতির সফল পরিবর্তন। ইউরো জে মেড মেড রেস 2007; 16 12 (8): 356-9।
2. উইকিপিডিয়া অবদানকারী। মোলার দাগ উইকিপিডিয়া, মুক্ত বিশ্বকোষ থেকে. নভেম্বর 3, 2018, 03:28 ইউটিসি। En.wikedia.org এ উপলব্ধ
3. পেরেজ আর, জুরেজ এম, রদ্রিগেজ (২০১১)। মাইক্রোবায়োলজিক্যাল টেকনিক্স ল্যাবরেটরির ম্যানুয়াল। মাইক্রোবায়োলজির বেসিক সায়েন্সেস একাডেমি বিভাগ। জাতীয় পলিটেকনিক ইনস্টিটিউট।
4. "এন্ডোস্পোর।" উইকিপিডিয়া, মুক্ত বিশ্বকোষ থেকে. 25 ফেব্রুয়ারী 2018, 10:20 ইউটিসি। 10 জানুয়ারী 2019, 02:42: এন.ইউইকিপিডিয়া.রোগ
5. সিলভা এল, সিলভা সি, ফার্নান্দেজ এন, বুয়েনো সি, টরেস জে, রিকো এম, ম্যাকাসাস জে এবং সহযোগীরা। (2006)। এক্সট্রেমাদুরার স্বায়ত্তশাসিত সম্প্রদায়ের শ্রম কর্মী। নির্দিষ্ট এজেন্ডা ভলিউম IV। সম্পাদকীয় এমএডি। সেভিলি-স্পেন, পিপি 211-212।
6. সিলভা এম, গার্সিয়া এম, কোরেলেস জে, পোনস ই। (2006)। ল্যাবরেটরি টেকনিশিয়ান বিশেষজ্ঞ, গ্যালিশিয়ান হেলথ সার্ভিস (সার্জাস)। নির্দিষ্ট বিষয় এজেন্ডা ভলিউম 2. সম্পাদকীয় এমএডি। সেভিলি-স্পেন, পিপি 79-80।
7. কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। (৫ ম সংস্করণ) আর্জেন্টিনা, সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ
8. ফোর্বস বি, সাহম ডি, ওয়েসফেল্ড এ। ২০০৯. বেইলি এবং স্কট মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 12 এড। আর্জেন্টিনা। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ