গ্রাউনওয়াল্ড-জিমসা দাগ: যুক্তি, কৌশল এবং ব্যবহার - জীববিদ্যা - 2025

মে Grünwald-Giemsa বা Pappenheim দাগ একটি ডিফারেনশিয়াল পুনরায় পন্থা যা দ্রবণ Giemsa ও মে Grünwald বিকারকের হয়। এটি পেরিফেরিয়াল রক্ত ​​এবং অস্থি মজ্জার স্মিয়ারগুলিতে স্বাভাবিক এবং অস্বাভাবিক রক্তকণিকার পার্থক্যের জন্য এবং সেইসাথে হিস্টোলজিকাল বিভাগ এবং সাইটোলজিকাল নমুনার দাগ জন্য ব্যবহৃত হয়।

উভয়ই রিজেন্টস-জিমসা এবং মে গ্রাওয়াল্ড- রোমানোস্কি টাইপ স্টেইনিং থেকে উদ্ভূত, এমন একটি কৌশল যা অম্লীয় এবং মৌলিক বর্ণের সংমিশ্রণের উপর ভিত্তি করে তৈরি।

মায় গ্রাওয়াল্ড জিমসার দাগের সাথে দাগযুক্ত ক্রনিক মাইলয়েড লিউকেমিয়ার ক্ষেত্রে সিমিয়ার একটি সেগমেন্টযুক্ত নিউট্রোফিল এবং মিলোসাইটের চিত্র দেখায়। ডঃ রমন সাইমন-লোপেজ (https://es.m.wikedia.org/wiki/Archivo:LMC-1.JPG) উইকিপিডিয়া.org এর মাধ্যমে।

গিমেসার ইওসিন, মিথিলিন নীল এবং তাদের ডেরাইভেটিভগুলির মিশ্রণ গ্লিসারল দিয়ে স্থিতিশীল করে কৌশলটি উন্নত করেছিলেন। পরিবর্তে মে গ্রানওয়াল্ড ইওসিন এবং মিথিলিন নীল ব্যবহার করে দ্রাবক হিসাবে মিথেনল ব্যবহার করেন। এই কৌশলগত সমন্বয়টি দুর্দান্ত ফলাফল পেয়েছে yield

যদিও সেল মরফোলজির পর্যবেক্ষণের ক্ষেত্রে এটি জিমসা এবং রাইটের দাগের অনুরূপভাবে কাজ করে, এই কৌশলটি ম্যালেরিয়া, ছাগাস ডিজিজ, লেশম্যানিয়াসিস এবং ট্রাইকোমোনিয়াসিসের জন্য পরজীবী দাগগুলিকে পরিমার্জন করে পূর্বেরগুলিকে উন্নত করে।

তদ্ব্যতীত, এটি শুক্রাণুগত তরলটির সাইটোলজিকাল অধ্যয়নের জন্য খুব দরকারী কৌশল হিসাবে প্রমাণিত হয়েছে। এটি কেবল শুক্রাণুর রূপচর্চা বৈশিষ্ট্যগুলি প্রদর্শন করেই নয়, দুর্দান্ত দক্ষতার সাথে লিউকোসাইটস, এপিথেলিয়াল কোষ এবং স্পার্মটোজেনসিস কোষের পার্থক্যকে মঞ্জুরি দিয়েও দাঁড়িয়েছে।

ভিত্তি

কৌশলটি রোমানোস্কি দাগের ভিত্তি অনুসরণ করে, যার মধ্যে অ্যাসিডিক রঞ্জকগুলি মৌলিক সেলুলার উপাদানগুলির জন্য নির্বাচনী স্নেহযুক্ত থাকে এবং অ্যাসিডিক উপাদানগুলি মৌলিক দাগগুলিকে আকর্ষণ করে।

অন্যভাবে ব্যাখ্যা করা হয়েছে, কোষের কাঠামো এবং রঞ্জক উভয়েরই ইতিবাচক বা নেতিবাচক বৈদ্যুতিক চার্জ রয়েছে; চার্জগুলি পিছনে ফেলে দেওয়া এবং বিভিন্ন চার্জ আকর্ষণ করে।

উদাহরণস্বরূপ, মিথিলিন নীল রঙের মতো মৌলিক বর্ণগুলি ইতিবাচকভাবে চার্জ করা হয় এবং নেতিবাচক চার্জের কাঠামোর প্রতি আকৃষ্ট হয়। এই কারণেই এই রঞ্জকটি ডিএনএ এবং আরএনএ সমৃদ্ধ নিউক্লিয়িকে দাগ দেয় যা ফসফেট গ্রুপকে নেতিবাচকভাবে চার্জ করেছে।

আরগমেন্টযুক্ত বেসোফিলের গ্রানুলস এবং আরএনএযুক্ত মনোোনিউক্লিয়ার শ্বেত রক্ত ​​কণিকার সাইটোপ্লাজমও দাগযুক্ত are

তেমনি, অ্যাসিড রঞ্জক একটি নেতিবাচক চার্জ বহন করে, তাই এটি ইতিবাচক চার্জ কাঠামোর যেমন বাঁধা যেমন এরিথ্রোসাইট এবং বিভাগিত ইওসিনোফিলের গ্রানুলগুলি আবদ্ধ করে। খণ্ডিত নিউট্রোফিলের গ্রানুলগুলি হিসাবে, এগুলি উভয় বর্ণকে ঠিক করে।

কলারেন্ট বিভিন্ন

এই কৌশলটিতে অর্থোক্রোমেটিক এবং মেটাক্রোমেটিক ডাইয়ের মধ্যে প্রতিক্রিয়াগুলির সংমিশ্রণ ঘটে। অর্থোক্রোমেটিক্স (ইওসিন এবং মিথিলিন নীল) কোষের কাঠামোর সাথে আবদ্ধ হয় যার সাথে তারা সম্পর্কিত এবং একটি স্থিতিশীল রঙ সরবরাহ করে যা ভিন্ন হয় না।

অন্যদিকে, মেটাক্রোমেটগুলি (মিথাইলিন নীল অ্যাজুরি এ এবং অ্যাজুরি বি এর ডেরিভেটিভস) নির্দিষ্ট কাঠামোর সাথে সংযুক্ত হয়ে গেলে তাদের মূল রঙটি পরিবর্তিত হয় এবং বিভিন্ন ধরণের শেডও হতে পারে।

পরিশেষে, মে গ্রানওয়াল্ড দ্রবণটি যে পদক্ষেপ নেয় তাতে পানির উপস্থিতি প্রয়োজন, কারণ এটি ছাড়া ডাইগুলি কাঠামোগুলি প্রবেশ করবে তবে ঠিক হবে না। এটি হওয়ার জন্য, ছোপানো পোলার বা আয়নাইজ হতে হবে, এবং এইভাবে বৃষ্টিপাত করতে এবং সম্পর্কিত কাঠামোর সাথে আবদ্ধ হতে সক্ষম হতে হবে।

প্রযুক্তি

উপকরণ

- স্লাইড স্লাইড।

- রঙিন ব্রিজ।

- মে-গ্রানওয়াল্ড সমাধান।

- জিমসার দাগ

- বিশুদ্ধ পানি.

গ্রাউনওয়াল্ড ডাই ঘনীভূত সমাধান করতে পারে

ইওসিন-মিথিলিন নীল 0.25 গ্রাম (মে গ্রানওয়াল্ড অনুযায়ী দাগ) অবশ্যই ওজন করতে হবে এবং 100 মিলি মিথেনল দ্রবীভূত করতে হবে। তারপরে প্রস্তুতিটি 1 ঘন্টা মিশ্রিত করা হয় এবং 24 ঘন্টা বিশ্রামে রেখে দেওয়া হয়। সময় শেষে, এটি ফিল্টার হয়।

কৌশলটি প্রয়োগ করতে মে মে গ্রাণওয়াল্ড ডাই অবশ্যই নীচে মিশ্রিত করতে হবে: 200 মিলি মিশ্রিত রঞ্জনের জন্য, ঘন দ্রবণটির 30 মিলি পরিমাপ করুন, 20 মিলি বাফার দ্রবণ এবং 150 মিলি পাতিত জল পিএইচ 7.2-7.3 এ সামঞ্জস্য করুন । পরে এটি মিশ্রিত এবং ফিল্টার হয়।

জিমসা দাগ ঘন

0.5 গ্রাম অ্যাজুর-ইওসিন-মিথিলিন নীল (জিমসার অনুযায়ী দাগ) অবশ্যই ওজন করতে হবে, 50 মিলি মিথেনল এবং গ্লিসারিনের 50 মিলি মিশ্রণে যুক্ত করতে হবে।

কৌশলটি সম্পাদন করতে, বাফার দ্রবণ দিয়ে 1:10 পাতলা করুন এবং এটি 10 ​​মিনিটের জন্য বিশ্রাম দিন। প্রয়োজনে ফিল্টার করা যায়।

পিএফ 7.2 এ বাফার দ্রবণ প্রস্তুতকরণ

তাদের ওজন করা উচিত:

- 40 মিলিগ্রাম পটাসিয়াম ডি-হাইড্রোজেন ফসফেট (কেএইচ 2 পিও 4)।

- 151 মিলিগ্রাম-ডি-সোডিয়াম হাইড্রোজেন ফসফেট 12-হাইড্রেট (Na2HPO4)।

উভয় যৌগই 100 মিলি জলে দ্রবীভূত হয়।

রক্ত বা অস্থি মজ্জার স্মিয়ার স্টেনিং পদ্ধতি

দুটি মোড রয়েছে: একটি ক্লাসিক এবং একটি দ্রুত।

ক্লাসিক মোড

1. মিশ্রিত মে-গ্রাওয়াল্ড দ্রবণ দিয়ে 2 থেকে 3 মিনিটের জন্য স্মিয়ারগুলি Coverেকে রাখুন।
2. পূর্ববর্তী দ্রবণটি অপসারণ করতে বাফার্ড ডিস্টিলড জল দিয়ে ধুয়ে ফেলুন।
3. একই বাফার ওয়াশ সলিউশন দিয়ে Coverেকে রাখুন এবং 1 মিনিটের জন্য ছেড়ে দিন। ধারণাটি হ'ল পূর্ববর্তী রঙ্গগুলি কাঠামোর সাথে সংশোধন করা হয় এবং একই সময়ে, কোষগুলি হাইড্রেটেড হয়।
4. বারফার্ড জলে 12 টি ফোঁটা পাতলা জিমসা টিংচার যুক্ত করুন এবং মিশ্রিত করুন এবং একজাত করুন blow এটি 15 থেকে 20 মিনিটের জন্য বিশ্রাম দিন।
5. বাফার ডিস্টিলড জলের সাথে স্মিয়ারগুলি ধুয়ে শুকিয়ে বাতাসে রাখুন।
6. 40X উদ্দেশ্য ব্যবহার করে হালকা মাইক্রোস্কোপের নীচে দাগযুক্ত রক্তকণিকাগুলিকে ফোকাস করুন এবং দেখুন। প্রয়োজনে 100X ব্যবহার করা যেতে পারে।

দ্রুত মোড

1. 1 মিনিটের জন্য পাতলা মে গ্রাণওয়াল্ড দাগ দিয়ে স্মিয়ারটি Coverেকে রাখুন।
2. বাফার্ড ডিস্টিল্ড জল দিয়ে ধুয়ে ফেলুন।
3. বাফার্ড জল দিয়ে Coverেকে রাখুন এবং এটি 1 মিনিটের জন্য বিশ্রাম দিন।
4. পাতলা জিমসা দাগ যুক্ত করুন এবং 5 মিনিটের জন্য ছেড়ে দিন।
5. বাফার্ড ডিস্টিল্ড জল দিয়ে ধুয়ে শুকিয়ে বাতাসের অনুমতি দিন।

এখানে বর্ণিত কৌশলগুলি একটি গাইডলাইন, তবে এটি বিবেচনায় নেওয়া উচিত যে পদ্ধতিগুলি এবং স্টেনিংয়ের সময়গুলি বাণিজ্যিক সংস্থা অনুসারে রিএজেন্টগুলি বিতরণ করে vary প্রতিটি বাণিজ্যিক বাড়ির দ্বারা কঠোরভাবে নির্দেশিত পদক্ষেপগুলি অনুসরণ করা বাঞ্ছনীয়।

শুক্রাণুগত তরলের রঙিন স্মিয়ারের কৌশল

1- মে গ্রাওয়াল্ড দ্রবণটির পাতলা স্তর দিয়ে 4 মিনিটের জন্য স্মিয়ারটি Coverেকে দিন।

2- কলারেন্ট সরান এবং পাতিত জল দিয়ে ধুয়ে ফেলুন।

3- পাতলা পানিতে পাতলা জিমাসা (1:10) এর একটি স্তর 15 মিনিটের জন্য রাখুন।

4- রঞ্জক সরান এবং পাতিত জল দিয়ে ধুয়ে ফেলুন।

5- শুকনো এবং মাইক্রোস্কোপের নীচে পর্যবেক্ষণ করতে দিন।

মে গ্রাওয়াল্ড জিমসা দাগের সাথে প্রত্যাশিত রঙ

গুরুত্বপূর্ণ বিশেষ উল্লেখ

কৌশলটির প্রয়োজন হয় যে রিএজেন্টস এবং ওয়াশিং সলিউশনগুলির একটি পিএইচ 7.2 -7.3 এডজাস্ট করা উচিত, যাতে সেলুলার স্ট্রাকচারগুলির জন্য রঞ্জকের সংযুক্তিগুলি বিকৃত না হয় এবং প্রত্যাশিত চূড়ান্ত রঙটি পৃথক হয় না।

অ্যাপ্লিকেশন

পেরিফেরিয়াল রক্ত ​​এবং অস্থি মজ্জার স্মিয়ার, টিস্যু বিভাগ এবং সাইটোলজির দাগ কাটাতে এই কৌশলটি ক্লিনিকাল ল্যাবরেটরিগুলি ব্যবহার করে।

হেমোটোলজিকাল ক্ষেত্রে, আকৃতি, আকার এবং সংখ্যার ক্ষেত্রে কোষগুলির অস্বাভাবিকতা অধ্যয়নের ক্ষেত্রে এই কৌশলটি অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। লিউকিমিয়াস এবং অ্যানিমিয়া জাতীয় কিছু রোগ নির্ণয়ের জন্য এটি একটি অত্যন্ত মূল্যবান সরঞ্জাম।

এছাড়াও হিমেটোলজিকাল (প্লাজমোডিয়াম এসপি এবং ট্রাইপানোসোমা ক্রুজি) বা হিস্টোলজিকাল (লেশমানিয়াস এসপি) অঞ্চলে পরজীবী সন্ধান করার ক্ষেত্রে এটি অসামান্য দরকারী।

যোনি সাইটোলজি

যোনি সাইটোলজির বিষয়ে, এই কৌশলটি ট্রাইকোমোনাস যোনিলিস পর্যবেক্ষণের জন্য বিশেষ উপকারী। এটি একটি গুরুত্বপূর্ণ সন্ধান, যেহেতু এটির উপস্থিতি সিটিকো ছবিতে কার্সিনোমা অনুকরণ করে যা পরবর্তীতে পরজীবীটি নির্মূল করার পরে অদৃশ্য হয়ে যায়।

শুক্রাণুর নমুনা

এটি শুক্রাণুর নমুনাগুলি অধ্যয়নের জন্য একটি আদর্শ হাতিয়ার, কারণ এটি শুক্রাণুর গুণমান সম্পর্কে মূল্যবান তথ্য সরবরাহ করে।

এটি যে ডেটা সরবরাহ করে তা প্রধানত সংখ্যা এবং রূপচর্চা, সেই সাথে সহজাত কোষগুলি উপস্থিত থাকতে পারে যা জীবাণু কোষ, লিউকোসাইট এবং এপিথেলিয়াল কোষগুলির মতো অতীব গুরুত্বপূর্ণ।

এই বিশ্লেষণের সাথে মাথা, ঘাড়, মিডপিস এবং মূল টুকরা শুক্রাণুতে পর্যবেক্ষণ করা অস্বাভাবিকতার বর্ণনা দেওয়া সম্ভব।

এছাড়াও, তারা হেমোস্ফর্মিয়া (বীর্যে লাল রক্ত ​​কোষের উপস্থিতি) এবং লিউকোস্পার্মিয়া বা পাইসোস্পার্মিয়া (বীর্যতে লিউকোসাইটের সংখ্যা বৃদ্ধি) এর ক্ষেত্রেও দেখাতে সহায়তা করতে পারে।

তথ্যসূত্র

1. কোস্টামাগনা এস, প্রডো এম। তাজা পরীক্ষার বৈধতা, মে গ্রাওয়াল্ড-জিমসা এবং ট্রাইকোমোনাস যোনিলিস নির্ণয়ের জন্য গ্রাম দাগ এবং সংস্কৃতি মিডিয়া। প্যারাসিটল। 2001; 25 (1-2): 60-64। উপলভ্য: সাইয়েলো।
2. Merk KGaA পরীক্ষাগার। মাইক্রোস্কোপির জন্য গ্রাউনওয়াল্ড ইওসিন মিথিলিন নীল হতে পারে।
3. "মে-গ্রেনওয়াল্ড-জিমসার দাগ।" উইকিপিডিয়া, মুক্ত বিশ্বকোষ থেকে. 15 নভেম্বর 2018, 14:37 ইউটিসি। 8 জানুয়ারী 2019, 04:29: en.wikedia.org
4. গ্লাস কেমিক্যালস প্যানারি্যাক ল্যাবরেটরি। হিস্টোলজিকাল কৌশল, হেম্যাটোলজি এবং মাইক্রোবায়োলজির রিএজেন্টস। উপলভ্য: glasschemicals.com
5. হিগ্রামটি পড়ার জন্য রক্তের দাগের দাগের জন্য রেটামেলস ই, মানজো ভি। জাতীয় ও রেফারেন্স বায়োমেডিকাল ল্যাবরেটরি। চিলির জনস্বাস্থ্য ইনস্টিটিউট।
6. সার্বিয়া এল। স্পারমিওগ্রাম ডাব্লুএইচও মানদণ্ড অনুযায়ী। বিকাশমূলক অ্যানাটমি এবং বায়োলজি প্রোগ্রাম। মেডিসিন স্কুল। চিলি বিশ্ববিদ্যালয়। উপলব্ধ: pp.centramerica.com