মেডিও: যুক্তি, প্রস্তুতি, ব্যবহার এবং সীমাবদ্ধতা - জীববিদ্যা - 2025

এর বা গ্লুকোজ গাঁজন মাঝারি একটি আধা-কঠিন Agar বিশেষভাবে অক্সিডেটিভ এবং Enterobacteriaceae ছাড়া অন্য অণুজীবের একটি গুরুত্বপূর্ণ গ্রুপ, অ আন্ত্রিক গ্রাম নেতিবাচক bacilli নামক শর্করা এর fermentative বিপাক অধ্যয়নের জন্য ডিজাইন করা হয়েছে।

এটি হিউ এবং লিফসন তৈরি করেছিলেন; এই গবেষকরা বুঝতে পেরেছিলেন যে কার্বোহাইড্রেট থেকে অ্যাসিড উত্পাদন অধ্যয়নের প্রচলিত উপায়গুলি এই নির্দিষ্ট গ্রুপের ব্যাকটেরিয়ার জন্য উপযুক্ত নয়।

উ: মাধ্যমের বাণিজ্যিক বেসল। বি মাঝারি বীজযুক্ত টিউব। সূত্র: লেখক এমএসসি তোলা A এবং B ফটো। মেরিলিসা গিল।

এটি কারণ নন-এন্টারিক গ্রাম নেতিবাচক রডগুলি এন্টারোব্যাকটেরিয়া থেকে পৃথকভাবে কম পরিমাণে অ্যাসিড তৈরি করে।

এই অর্থে, অফ মিডিয়ামের এমন বিশেষ বৈশিষ্ট্য রয়েছে যা জারণ এবং গাঁজনকারী উভয় পথেই অল্প পরিমাণে গঠিত অ্যাসিডকে সনাক্ত করতে পারে। এই পার্থক্যগুলি পেপটোন, কার্বোহাইড্রেট এবং আগরের পরিমাণের সাথে সম্পর্কিত।

এই মাধ্যমটিতে কম পেপটোন রয়েছে এবং কার্বোহাইড্রেটের উচ্চ ঘনত্ব রয়েছে, এইভাবে প্রোটিন বিপাকের ফলে মাঝারিটি ক্ষারকৃত পণ্যগুলি হ্রাস করে এবং কার্বোহাইড্রেট ব্যবহারের কারণে অ্যাসিডের উত্পাদন বৃদ্ধি করে।

অন্যদিকে, আগরের পরিমাণ হ্রাস আমাদের গতিশীলতা পর্যবেক্ষণ করার অনুমতি ছাড়াও, মাঝারি জুড়ে উত্পাদিত অ্যাসিডের বিস্তারকে সমর্থন করে।

অফ মিডিয়ামে পেপটোন, সোডিয়াম ক্লোরাইড, ব্রোমোথিয়ামল ব্লু, ডিপোটাসিয়াম ফসফেট, আগর এবং একটি কার্বোহাইড্রেট থাকে। সর্বাধিক প্রচলিত কার্বোহাইড্রেট হ'ল গ্লুকোজ তবে অন্যদের মধ্যে ল্যাকটোজ, মাল্টোজ, জাইলোজ প্রভৃতি যেমন পড়াশোনা করতে চান সে অনুযায়ী ব্যবহার করা যেতে পারে।

ভিত্তি

যে কোনও সংস্কৃতি মাধ্যমের মতো, অফ মিডিয়ামে অবশ্যই পুষ্টিকর উপাদান থাকতে হবে যা ব্যাকটিরিয়া বৃদ্ধির গ্যারান্টি দেয়; এই পদার্থগুলি পেপটোন হয়।

এর অংশ হিসাবে, কার্বোহাইড্রেট শক্তি সরবরাহ করে এবং একই সময়ে এর বিরুদ্ধে অণুজীবের আচরণ অধ্যয়ন করার জন্য পরিবেশন করে, এটি ব্যাকটিরিয়াকে একটি জারণ, গাঁজনকারী বা নন-স্যাকারোলিটিক জীব হিসাবে শ্রেণিবদ্ধ করার অনুমতি দেয়।

অফ মিডিয়ামটিতে 1: 5 পেপটোন / কার্বোহাইড্রেট অনুপাত 2: 1 প্রচলিত মিডিয়াগুলির বিপরীতে থাকে। এটি নিশ্চিত করে যে পেপটোনগুলির ক্ষয় থেকে গঠিত ক্ষারীয় অ্যামাইনগুলির পরিমাণ দুর্বল অ্যাসিডগুলির গঠনকে নিরপেক্ষ করে না।

অন্যদিকে, মিডিয়ামে সোডিয়াম ক্লোরাইড এবং ডিপোটাসিয়াম ফসফেট থাকে। এই যৌগগুলি মাধ্যম স্থিতিশীল করে এবং যথাক্রমে পিএইচ নিয়ন্ত্রণ করে। ব্রোমোথিয়ামল নীল হল পিএইচ সূচক, যা অ্যাসিডের উত্পাদনের সাথে মাঝারিটির রঙ সবুজ থেকে হলুদে পরিণত হয়।

কিছু অণুজীবগুলি অক্সিডেটিভ বা ফেরেন্টেশন রুটগুলির মাধ্যমে শর্করা ব্যবহার করতে পারে, অন্যরা কোনওটি পথ নেয় না।

এটি প্রতিটি অণুজীবের বৈশিষ্ট্যের উপর নির্ভর করে। উদাহরণস্বরূপ, কিছু কঠোর বায়বীয় অণুজীবগুলি নির্দিষ্ট কার্বোহাইড্রেটগুলিকে জারণ করতে পারে, এবং ফ্যালুটিভেটিভ এনারোবগুলি চারপাশের পরিবেশের উপর নির্ভর করে জারণ এবং গাঁজন করতে পারে, অন্যরা কার্বোহাইড্রেট (অ্যাসেকারোলিটিক) জারণ বা জঞ্জাল করে না।

অবশেষে, সিডিসি দ্বারা প্রস্তাবিত অফ মিডিয়ামের একটি পরিবর্তন রয়েছে যা একটি সূচক হিসাবে ফেনোল লাল সহ একটি বিশেষ অফ বেস রয়েছে।

জারণ প্রক্রিয়া

গ্লুকোজ জারণ প্রক্রিয়া গ্লুকোজ এর ফসফরিলেশন প্রয়োজন হয় না, যেমন fermentation প্রক্রিয়া হিসাবে। এই ক্ষেত্রে অ্যালডিহাইড গ্রুপটি একটি কার্বক্সাইল গ্রুপে জারণ করা হয়, যার ফলে গ্লুকোনিক অ্যাসিড হয়। এর পরিবর্তে এটি 2-কেটোগ্লুকোনিককে জারণযুক্ত করা হয়।

পরেরটি হয় পাইরুভিক অ্যাসিডের দুটি অণুতে জমা হয় বা ভেঙে যায়। এই সিস্টেমে চূড়ান্ত বৈদ্যুতিন গ্রহণকারী হিসাবে অক্সিজেন বা কিছু অজৈব যৌগ উপস্থিতি প্রয়োজন।

এই রুট দ্বারা অ্যাসিড উত্পাদন ফার্মেন্টেশন রুট দ্বারা প্রাপ্ত তুলনায় দুর্বল।

গাঁজন প্রক্রিয়া

যে কোনও যে কোনও রুটে গ্লুকোজ গাঁজন হয়ে যাওয়ার জন্য এটি প্রথমে ফসফোরিয়েটেড হতে হবে, গ্লুকোজ -6-ফসফেট হয়ে উঠতে হবে।

গ্লুকোজ ফেরেন্টেশনটি বেশ কয়েকটি রুট নিতে পারে, যার মধ্যে অন্যতম প্রধান হল এম্বেডেন-মায়ারহফ-পার্নাস রুট, তবে তারা এন্টনার-ডৌডোরফ রুট বা ওয়ারবার্গ-ডিকেন্স হেক্সোজ মনোফসফেট রুটও নিতে পারে, এটি পরিচিত হিসাবে পরিচিত পেন্টোজ এর অবক্ষয়ের।

নির্বাচিত রুটটি অণুজীবজীবের হাতে থাকা এনজাইমেটিক সিস্টেমের উপর নির্ভর করবে।

এম্বেডেন-মায়ারহফ- পার্নাসের মাধ্যমে

এম্বেডেন-মায়ারহফ-পার্নাস রুট দিয়ে গ্লুকোজ বের করার ক্ষেত্রে, এটি গ্লিসারালডিহাইড -3-ফসফেট গঠনের আগ পর্যন্ত বিভিন্ন কার্বন যৌগগুলিতে অবনতি করে দুটি ট্রাইজ অণুতে বিভক্ত করা হয়। সেখান থেকে একটি মধ্যবর্তী পদার্থের উত্স হয় যা পাইরুভিক অ্যাসিড।

সেখান থেকে বিভিন্ন ধরণের মিশ্র অ্যাসিড তৈরি হবে যা এক প্রজাতির থেকে অন্য প্রজাতিতে পরিবর্তিত হতে পারে।

এই সিস্টেমটি অক্সিজেনের অভাবে ঘটে এবং চূড়ান্ত বৈদ্যুতিন গ্রহণকারী হিসাবে একটি জৈব যৌগ প্রয়োজন।

প্রবেশদ্বার-ডডোরফ পথ

এন্টনার-ডডোরফ পথের মাধ্যমে গ্লুকোজ বের করার ক্ষেত্রে গ্লুকোজ 6-ফসফেট গ্লুকোনো-ল্যাকটোন-6-ফসফেট হয়ে যায় এবং সেখান থেকে এটি 6-ফসফোগলুকোনেট এবং 2-কেটো -3-ডওক্সি -6-তে অক্সাইড হয় ফসফোগলুকোনেট, অবশেষে পাইরুভিক অ্যাসিড গঠন করতে। এই পথটি গ্লাইকোলাইসিস হওয়ার জন্য অক্সিজেনের প্রয়োজন নেই।

পেন্টোসিজ অবক্ষয়ের পথ বা ওয়ারবার্গ-ডিকেন্স হেক্সোক্সার মনোফসফেট পথ

এই রুটটি উপরের 2 টির একটি সংকর। এটি এন্টনার-ডডোরফ পথের মতোই শুরু হয় তবে পরে এম্বডেন-মায়ারহফ-পার্নাস পথের ধীরে ধীরে পাইরিভিক অ্যাসিডের পূর্বসূরি হিসাবে গ্লিসারালডিহাইড -3-ফসফেট গঠিত হয়।

প্রস্তুতি

ওজন করতে:

পেপটোন 2 গ্রাম

সোডিয়াম ক্লোরাইড 5 গ্রাম

ডি-গ্লুকোজ 10 গ্রাম (বা প্রস্তুত কার্বোহাইড্রেট)

ব্রোমোথিয়ামল নীল 0.03 গ্রাম

আগর 3 জিআর

0.30 গ্রাম ডিপোটাসিয়াম ফসফেট

পাতিত জল 1 লিটার।

কার্বোহাইড্রেট ব্যতীত সমস্ত যৌগিক মিশ্রিত করুন এবং 1 লিটার পাতিত পানিতে দ্রবীভূত করুন। পুরোপুরি দ্রবীভূত হওয়া পর্যন্ত তাপ এবং কাঁপুন।

50 ডিগ্রি সেলসিয়াসে ঠান্ডা করার সময়, 10% গ্লুকোজ (ফিল্টারড) এর 100 মিলি যুক্ত করা হয়।

সুস্পষ্টভাবে 5 মিলি অফ অফ মিডিয়াম বিতরণ করুন তুলো-ক্যাপড টেস্ট টিউবগুলিতে এবং অটোক্লেভ 121 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে, 15 মিনিটের জন্য 15 পাউন্ডের চাপে।

উল্লম্ব অবস্থানে শক্ত করার মঞ্জুরি দিন।

মাধ্যমের পিএইচ 7.1 হওয়া উচিত। প্রস্তুতকৃত মাধ্যমের রঙ সবুজ।

একটি ফ্রিজে রাখুন।

অ্যাপ্লিকেশন

অফ মিডিয়াম একটি শর্করা বিপাকের বিপাক আচরণ নির্ধারণের জন্য একটি বিশেষ মাধ্যম। বিশেষত যারা অল্প অল্প, দুর্বল বা কোনও অ্যাসিড তৈরি করে তাদের জন্য।

বোনা

প্রতিটি অণুজীবের জন্য, 2 টি টিউব প্রয়োজন হয়, উভয়ই অণুজীবের সাথে অণুজীব অধ্যয়ন করতে হবে। উপনিবেশটি একটি সরাসরি হ্যান্ডেল দিয়ে নেওয়া হয় এবং নীচে পৌঁছনো না করে টিউবের মাঝখানে একটি খোঁচা তৈরি করা হয়; গতিশীলতা পর্যবেক্ষণে আগ্রহ নেই ততক্ষণ বেশ কয়েকটি পাঙ্কচার করা যেতে পারে।

জীবাণুমুক্ত তরল পেট্রোলেটাম বা জীবাণুমুক্ত গলিত প্যারাফিনের এক স্তর (প্রায় 1 থেকে 2 মিলি) টিউবগুলির একটিতে যুক্ত করা হয় এবং "এফ" অক্ষর দিয়ে লেবেলযুক্ত হয়। অন্যান্য টিউবটি আসল এবং "ও" লেবেলযুক্ত রয়েছে। উভয় টিউব 35 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় উত্সাহিত হয় এবং 3 থেকে 4 দিন পর্যন্ত প্রতিদিন পর্যবেক্ষণ করা হয়।

ব্যাখ্যা

বিপাক এবং গ্যাস উত্পাদন

সারণী: টিউবগুলির উন্মুক্ত (অক্সিডেটিভ) এবং বদ্ধ (গাঁজনকারী) এর আচরণ অনুসারে অণুজীবগুলির শ্রেণিবিন্যাস

সূত্র: লেখক এমএসসি তৈরি করেছেন। মেরিলসা গিল

বুদবুদ গঠন বা আগরের স্থানচ্যুতিতে গ্যাসটি পর্যবেক্ষণ করা হয়।

এটি লক্ষ করা উচিত যে একটি জীব যা কেবল গ্লুকোজকে জারণ করে তবে এটি উত্তেজিত করে না, অন্য কার্বোহাইড্রেটগুলি গাঁজন করতে সক্ষম হবে না, যে কোনও ক্ষেত্রে এটি কেবলমাত্র তাকে জারণ করে। অতএব, এই পরিস্থিতিতে অন্যান্য কার্বোহাইড্রেটগুলির অধ্যয়নের জন্য সিল করা নল বাদ দেওয়া হবে।

তত্পরতা

অতিরিক্তভাবে, গতিশীলতা অফ মিডিয়ামে দেখা যায়।

ইতিবাচক গতিশীলতা: বৃদ্ধি যা ইনোকুলেশনের ক্ষেত্রের মধ্যে সীমাবদ্ধ নয়। নলের পাশের দিকে বৃদ্ধি আছে।

নেতিবাচক গতিশীলতা: কেবলমাত্র প্রাথমিক ইনোকুলামে বৃদ্ধি।

QA তে

নিম্নোক্ত স্ট্রেনগুলি মান নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে: এসচেরিচিয়া কোলি, সিউডোমোনাস আরুগিনোসা এবং মোরাকেসেলা এসপি। প্রত্যাশিত ফলাফলগুলি হ'ল:

1. কলি: গ্লুকোজ ফেরেন্টার (উভয় হলুদ এবং ঝলকানি টিউব)।
2. অ্যারুগিনোসা: গ্লুকোজ অক্সিডাইজার (খোলা হলুদ নল এবং সবুজ বা নীল সীল)।
3. মোরাক্সেলা এসপি: স্যাকারোলোলেটিক নয় (সবুজ বা নীল ওপেন টিউব, সবুজ সিলযুক্ত নল)।

সীমাবদ্ধতা

- কিছু অণুজীবগুলি মাঝারি মাধ্যমে বাড়তে পারে না। এই ক্ষেত্রে, পরীক্ষার পুনরাবৃত্তি হয় তবে 2% সিরাম বা 0.1% খামিরের নির্যাস মাঝারিটিতে যুক্ত হয়।

-অ্যাক্সিডেশন প্রতিক্রিয়াগুলি প্রায়শই কেবল পৃষ্ঠের কাছাকাছি অবস্থায় পর্যবেক্ষণ করা হয় এবং বাকি মাঝারিটি সবুজ থাকতে পারে, একইভাবে এটি ইতিবাচক হিসাবে নেওয়া হয়।

তথ্যসূত্র

1. কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 5 তম সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
2. ফোর্বস বি, সাহম ডি, ওয়েসফেল্ড এ (২০০৯)। বেইলি এবং স্কট মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 12 এড। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
3. ম্যাক ফাদ্দিন জে। (2003)। ক্লিনিকাল গুরুত্বের ব্যাকটেরিয়া সনাক্তকরণের জন্য জৈব রাসায়নিক পরীক্ষা। তৃতীয় সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা। বুয়েনস আইরেস আর্জেন্টিনা।
4. ফ্রান্সিসকো সোরিয়া মেলগিজো পরীক্ষাগার। 2009. গ্লুকোজ মাঝারি। উপলভ্য:
5. কনডা প্রোনাডিস ল্যাবরেটরিজ। গ্লুকোজ মাধ্যমের। উপলব্ধ: condalab.com
6. বিডি ল্যাবরেটরিজ। 2007. বেসাল মিডিয়ামের। বিডি ডট কম এ উপলব্ধ