মেডিও মিও: ভিত্তি, প্রস্তুতি এবং ব্যবহার - জীববিদ্যা - 2025

Mio মাঝারি একটি বায়োকেমিক্যাল Enterobacteriaceae পরিবার একাত্মতার ব্যাকটেরিয়া প্রজাতির সনাক্তকরণ সাহায্য করার জন্য ব্যবহার করা পরীক্ষা। এটি বেশ পুষ্টিকর এবং গ্লুকোজ, ইস্ট এক্সট্রাক্ট, পেপটোন, ট্রিপটিন, এল-অরনিথিন হাইড্রোক্লোরাইড, ব্রোমোক্রেসোল বেগুনি এবং আগর দিয়ে তৈরি।

এর সংক্ষিপ্ত বিবরণটির অর্থ (এমআইও) এই মাধ্যমটিতে লক্ষ্য করা যায় এমন প্রতিটি পরামিতি বর্ণনা করে; গতিশীলতা, indole এবং ornithine ine গতিশীলতা হ'ল ফ্ল্যাজেলার উপস্থিতির কারণে অণুজীবের চলাচল করার ক্ষমতা। এই সম্পত্তিটি পর্যবেক্ষণ করার জন্য, মাঝারিটির ধারাবাহিকতাটি অবশ্যই আধা অংশবিশিষ্ট হওয়া উচিত, তাই প্রস্তুতিতে কম আগর থাকে।

এমআইও মাধ্যমের ফলাফলের ব্যাখ্যার বাহ্যরেখা। সূত্র: লেখক এমএসসি দ্বারা প্রস্তুত। মেরিলসা গিল

ইন্ডোলের উত্পাদনের ফলে এনজাইম ট্রাইপটোফানেজের উপস্থিতি প্রদর্শিত হয় যা অ্যামিনো অ্যাসিড ট্রাইপটোফানে কাজ করে, ইন্ডোলের উত্পাদন দৃশ্যমান করার জন্য একটি প্রকাশক রেএজেন্ট ব্যবহারের প্রয়োজন হয়।

পরিশেষে, অরনিথাইন নির্ধারণ করে যে ব্যাকটিরিয়াম অ্যামিনো অ্যাসিড ডিকারোবক্সলেট করতে সক্ষম কিনা, অর্থাত্ যদি এটিতে এনজাইম অরিনিথাইন ডেকারবক্সিলাস থাকে।

ভিত্তি

পেপটোন, খামিরের নির্যাস এবং ট্রিপটিন in

এই উপাদানগুলি এই মাধ্যমের পুষ্টি শক্তিতে অবদান রাখে। তারা ব্যাকটিরিয়া বিকাশের জন্য পুষ্টি উপাদান এবং প্রয়োজনীয় অ্যামিনো অ্যাসিডের উত্স হিসাবে পরিবেশন করে।

এ ছাড়া, ট্রিপটিন হ'ল ট্রাইপোফেনের একটি উত্স যা ট্রাইপোফোনাস এনজাইম উপস্থিতি দেখায়, যা ট্রাইপটোফানকে হ্রাসকারী ডিমেমনেশন দ্বারা, ইন্ডোল, পাইরুভিক অ্যাসিড, অ্যামোনিয়া এবং শক্তি প্রকাশ করে try

ইন্দোল বর্ণহীন, সুতরাং এর উপস্থিতি প্রকাশিত হয়েছে এরিলিকের পাঁচ ফোঁটা বা কোভাক্সের রিএজেন্ট, উভয়ই পি-ডাইমাইথিলামিনোবেঞ্জালডিহাইডের সাথে যুক্ত করে।

এই যৌগের অ্যালডিহাইড গ্রুপটি ইন্ডোলের সাথে প্রতিক্রিয়া দেখায়, আগরের পৃষ্ঠের উপরে একটি রিং-আকারের ফুচিয়া লাল পণ্য তৈরি করে।

রঙের যে কোনও ট্রেসকে ইতিবাচক পরীক্ষা হিসাবে বিবেচনা করা উচিত। সময়ের সাথে সাথে রঙটি হ্রাসের সাথে সাথে প্রমাণটি অবিলম্বে পড়তে হবে।

তদ্ব্যতীত, অরনিথিনের গতিশীলতা এবং ডিকারোবক্সিলেশন ফলাফলগুলি উল্লেখ করার পরে এই পরীক্ষাটি প্রকাশ করা উচিত।

ব্যাখ্যা

ধনাত্মক পরীক্ষা: কোভাক্স রিএজেন্টের ফোঁটা যুক্ত করার সময় ফুচিয়া লাল আংটি গঠন।

নেতিবাচক পরীক্ষা: কোন রিং গঠন।

তত্পরতা

কোনও মেঘলা মাঝারি পর্যবেক্ষণ করা হয় বা প্রাথমিক ইনোকুলেশনের চারপাশে প্রসারিত ঘন বৃদ্ধির রেখা থাকলে ব্যাকটিরিয়াগুলির সরানোর ক্ষমতা স্পষ্ট হবে।

একটি নেতিবাচক গতিশীলতা পরীক্ষা বৃদ্ধির পাতলা রেখা পর্যালোচনা করে প্রমাণিত হবে এবং এর চারপাশের সমস্ত কিছুই বৃদ্ধি ছাড়াই হবে।

এটি গুরুত্বপূর্ণ যে ইন্ডোল প্রকাশের আগে গতিশীলতাটি পড়া উচিত, রেজিটেন্ট মেঘের যোগ হিসাবে পুরো মাধ্যমটি।

মোবাইল তবে ধীরে ধীরে বৃদ্ধি পাওয়া ব্যাকটিরিয়ায় এই মাধ্যমের সাহায্যে তাদের গতিশীলতা প্রদর্শন করা কঠিন। এই ক্ষেত্রে, অন্যান্য পরীক্ষা বা পদ্ধতি যেমন মাঝারি গতিশীলতা বা ড্রপ মুলতুবি পদ্ধতি ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয়।

গ্লুকোজ

গ্লুকোজ হ'ল উদ্দীপ্ত কার্বোহাইড্রেট যা শক্তি সরবরাহ করার পাশাপাশি পরিবেশকে অ্যাসিড করে তোলে, অ্যামিনো অ্যাসিড অরনিথিনের ডিকারোবক্সিলেশন হওয়ার জন্য একটি প্রয়োজনীয় শর্ত।

এন্টারোব্যাক্টেরিয়াসি পরিবারে যে সমস্ত ব্যাকটিরিয়া ফিমেন্ট গ্লুকোজের অন্তর্গত তা থেকে এই নীতিটি শুরু করে গ্লুকোজের ফেরেন্টেশন অবশ্যই সর্বদা ঘটতে হবে।

এল-Ornithine

ব্যাকটিরিয়া অ্যানিথিম ডার্কবক্সিলাস এনজাইম তৈরির ক্ষেত্রে, গ্লুকোজের উত্তেজক দ্বারা মাঝারিটি অ্যাসিডযুক্ত হয়ে যাওয়ার পরে এটি কাজ করতে পারে।

অ্যানজাইম অরনিথাইন ডেকারবক্সিলাস অ্যামিনো অ্যাসিডের কারবক্সিল গ্রুপে কাজ করে যা পুত্রেসাইন নামক একটি অ্যামাইন তৈরি করে যা মাঝারিটিকে আবার ক্ষার করে দেয়।

ইনকিউবেশন হওয়ার 24 ঘন্টা পরে এই পরীক্ষাটি পড়তে হবে, কারণ আপনি যদি পরীক্ষার আগে কোনও মিথ্যা নেতিবাচক ব্যাখ্যার আগে পড়ার চেষ্টা করেন।

এটি অবশ্যই মনে রাখতে হবে যে প্রথম প্রতিক্রিয়াটি ঘটে গ্লুকোজের fermentation হয়, তাই প্রাথমিক পর্যায়ে মাঝারিটি হলুদ হয়ে যায় (প্রথম 10 থেকে 12 ঘন্টা)। যদি পরবর্তীতে অরনিথাইন ডেকারবক্সিলেশন ঘটে তবে মাঝারিটি বেগুনি হয়ে যাবে।

ইনডোল প্রকাশের আগে অরনিথাইন ডেকারবক্সিলিকেশন পরীক্ষার ব্যাখ্যা করা গুরুত্বপূর্ণ, কারণ কোভাক্সের রিএজেন্ট যোগ করার মাধ্যমের রঙ পরিবর্তন করে।

ব্যাখ্যা

নেতিবাচক পরীক্ষা: হলুদ রঙের বা হলুদ ব্যাকগ্রাউন্ড সহ মাঝারি।

ইতিবাচক পরীক্ষা: মাঝারি পুরো বেগুনি।

পিএইচ সূচক

এই ক্ষেত্রে, ব্রোমোক্রেসোল বেগুনি ব্যবহৃত হয়; যখন মাধ্যমের পিএইচ পরিবর্তন হয় তখন প্রকাশের দায়িত্বে থাকা একজন। অ্যাসিডিফিকেশন হওয়ার পরে সূচকটি হলুদ হয়ে যায় এবং ক্ষারীয়করণের পরে এটি বেগুনি হয়ে যায়।

বীজ এবং বিকাশ কৌশল

এমআইও মাঝারি বপন করার জন্য, একটি সরল লুপ বা সুই ব্যবহার করা হয় এবং এটির সাথে অধ্যয়নের জন্য কলোনির একটি অংশ সংগ্রহ করা হয়।

একটি সরলরেখায় এমআইওর মাঝখানে একটি গভীর পাঞ্চার তৈরি করা হয়। ডাবল পাঞ্চার সম্পাদন করা ভাল নয়, যেহেতু এটি যদি একই জায়গায় পাঙ্কচারগুলি না চালানো হয় তবে এটি গতিশীলতার একটি মিথ্যা চিত্র দিতে পারে।

এয়ারোবায়োসিসে 37 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে 24 থেকে 48 ঘন্টা ধরে জ্বালান। এই ক্রমের ফলাফলগুলি দেখুন: গতিশীলতা, অলঙ্কারটির ডিকারবক্সিয়েশন এবং অবশেষে ইন্ডোলটি প্রকাশ করুন।

এটি সুস্পষ্টভাবে মাঝারিটির 2 মিলি মুছে ফেলার, এটি একটি নির্বীজন টিউবে স্থানান্তরিত এবং সেখানে ইন্ডোল পরীক্ষা করার পরামর্শ দেওয়া হয়, যাতে এটি নেতিবাচক হয়, তবে মূল নলটির বাকী অংশ আরও 24 ঘন্টার জন্য সজ্জিত করা যেতে পারে, আবার ইন্ডোলটি প্রকাশ করতে।

ইন্দোলের বিকাশ নিম্নরূপে করা হয়: কোভাক্সের রিএজেন্টের 3 থেকে 5 ফোঁটা এমআইও মাঝারিতে যুক্ত হয় এবং জোরালোভাবে আলোড়ন তোলে। এটি একটি লাল-ফুচিয়া রিং প্রদর্শিত হবে কিনা তা পর্যবেক্ষণ করা হয়।

প্রস্তুতি

এমআইও মাধ্যম

এমআইও মিডিয়ামের 31 গ্রাম ওজনের এবং এক লিটার পাতিত পানিতে দ্রবীভূত করুন।

মিশ্রণটি এক মিনিটের জন্য সিদ্ধ হওয়া পর্যন্ত উত্তাপ, আগর সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত না হওয়া পর্যন্ত ঘন ঘন কাঁপুন। সুতির ক্যাপগুলি দিয়ে 13/100 টেস্ট টিউবে মাঝারি 4 মিলি বিতরণ করুন।

15 মিনিটের জন্য 121 ডিগ্রি সেলসিয়াসে অটোক্লেভে জীবাণুমুক্ত। অটোক্লেভ থেকে সরান এবং একটি র্যাকের মধ্যে সোজা হয়ে দাঁড়িয়ে থাকুন, এমনভাবে একটি অর্ধ-কঠিন ব্লক তৈরি হয়।

একটি ফ্রিজে 2-8 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে স্টোর করুন ব্যাকটিরিয়া স্ট্রেন বপন করার আগে এটি গরম হতে দিন।

ডিহাইড্রেটেড মিডিয়ামের রঙ বেইজ এবং প্রস্তুত মিডিয়ামের রঙটি খানিকটা অস্বচ্ছভাবে বেগুনি।

প্রস্তুত মাধ্যমের চূড়ান্ত পিএইচ 6.5 ± 0.2 হয়

মাঝারিটি অম্লীয় পিএইচ এ হলুদ হয়ে যায় এবং ক্ষারীয় পিএইচ এ বেগুনি হয়।

কোভাক্স রিজেন্ট (ইন্ডোল টেস্ট বিকাশকারী)

এই রিএজেন্ট নিম্নরূপে প্রস্তুত করা হয়েছে:

150 মিলি এমিল, আইসোমিল বা বুটাইল অ্যালকোহল (তিনটির যে কোনও একটি) পরিমাপ করা হয়। এটিতে 10 গ্রাম পি-ডাইমাইথাইলামিনোবেনজালডিহাইড দ্রবীভূত হয়। পরবর্তীকালে 50 মিলি ঘন হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড ধীরে ধীরে যোগ করা হয়।

প্রস্তুত করা রিজেন্ট বর্ণহীন বা হালকা হলুদ। এটি অ্যাম্বার বোতল এবং একটি ফ্রিজে রাখা উচিত। একটি গা brown় বাদামী রঙ এর ক্ষয় দেখায়।

এছাড়াও কোভাক্স রিজেন্টটি এহরিচ রিএজেন্ট দ্বারা প্রতিস্থাপন করা যেতে পারে। পরেরটি আরও সংবেদনশীল হওয়ার কারণে এটি ব্যাকটিরিয়ায় ইন্ডোল প্রকাশ করতে পছন্দ করা হয় যা এটি মিনিট পরিমাণে উত্পাদন করে, যেমন কিছু অ-ফেরমেন্টিং গ্রাম নেতিবাচক রড এবং কিছু অ্যানোরিবগুলিতে।

ব্যবহার

এই মাধ্যমটি এমন একটি পরীক্ষা যা এন্টারোব্যাকটেরিয়াসি পরিবারভুক্ত ব্যাকটিরিয়া সনাক্তকরণের জন্য জৈব রাসায়নিক পরীক্ষার একটি ব্যাটারি পরিপূরক করে।

অরনিথাইন ডিকারোবক্সিল্যানেশন ডেটা শিগেলা বোনদি, শিগেলা ফ্লেক্সনারি এবং এস ডাইসেন্টেরিয়া থেকে নেগেটিভ পরীক্ষা করে শাইগেলা সোননিকে পৃথক করে, যা ইতিবাচক পরীক্ষা করে।

এটি এন্টারোব্যাক্টর জেনাস থেকে ক্লিবিসিলা জেনাসকেও পৃথক করে, যা নেতিবাচক পরীক্ষা করে, যেখানে এর বেশিরভাগ প্রজাতি ইতিবাচক পরীক্ষা করে।

উত্স: কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 5 তম সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।

QA তে

প্রতিবার এমআইও মাধ্যমের একটি ব্যাচ প্রস্তুত হওয়ার সাথে সাথে একটি নিয়ন্ত্রণ পরীক্ষা করা যায়। এর জন্য, পরিচিত বা প্রত্যয়িত স্ট্রেনগুলি মাধ্যমের আচরণ পর্যবেক্ষণ করতে ব্যবহৃত হয়।

যে স্ট্রেনগুলি ব্যবহার করা যেতে পারে সেগুলি হ'ল এসেরিচিয়া কোলি, মরগেনেলা মোরগনি, ক্লিবিসেলা নিউমোনিয়া, এন্টারোব্যাক্টর এয়ারোজেনস এবং প্রোটিয়াস মিরাবিলিস।

প্রত্যাশিত ফলাফল হ'ল ই কোলি এবং এম মরগানি। ড্যান এম: +, আমি: + এবং ও: +।

ক্লিবিসিলা নিউমোনিয়া সব নেতিবাচক (এম: -, আমি: -, ও:-)। প্রোটিয়াস মিরাবিলিস এবং এন্টারোব্যাক্টর এয়ারোজেনগুলি এম: + আই: - এবং ও: + দেয়।

তথ্যসূত্র

1. ম্যাক ফাদ্দিন জে। (2003)। ক্লিনিকাল গুরুত্বের ব্যাকটেরিয়া সনাক্তকরণের জন্য জৈব রাসায়নিক পরীক্ষা। তৃতীয় সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা। বুয়েনস আইরেস আর্জেন্টিনা।
2. ফোর্বস বি, সাহম ডি, ওয়েসফেল্ড এ (২০০৯)। বেইলি এবং স্কট মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 12 এড। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
3. কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 5 তম সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
4. ব্রিটানিয়া ল্যাবরেটরিজ। MIO Medio 2015. উপলভ্য: ব্রিটানিয়াবল.কম
5. বিডি ল্যাবরেটরিজ। বিবিএল গতিশীলতা ইন্ডোল অরনিথাইন (এমআইও) মিডিয়াম। 2007. বিডি.কম এ উপলব্ধ
6. ভালটেক ল্যাবরেটরিজ। মাঝারি এমআইও গতিশীলতা, ইন্দোল, অরনিথাইন। 2010. উপলভ্য: andinamedica.com এ