মাঝারি সিম: ভিত্তি, প্রস্তুতি এবং ব্যবহার - জীববিদ্যা - 2025

সিম মাঝারি একটি semisolid এবং ডিফারেনশিয়াল অ্যাগার, বিশেষভাবে Enterobacteriaceae কিছু ব্যাকটেরিয়া চিহ্নিত, বিশেষ করে সাহায্য করার জন্য ডিজাইন করা হয়। এটি ট্রিপটিন, পেপটোন, আয়রন সালফেট, অ্যামোনিয়াম সালফেট, সোডিয়াম থিওসালফেট এবং আগর দ্বারা গঠিত।

এই মাধ্যমটি তিনটি গুরুত্বপূর্ণ পরীক্ষার সম্পাদনের অনুমতি দেয়: হাইড্রোজেন সালফাইড (এইচ ₂ এস) উত্পাদন, ইন্ডোল এবং গতিশীলতার গঠন, সুতরাং সংক্ষিপ্তসার সিম থেকে আসে। এর দুর্দান্ত উপযোগিতার কারণে এটি কোনও ব্যাকটিরিওলজি পরীক্ষাগারে অনুপস্থিত থাকতে পারে না।

উ: বাণিজ্যিক সিম মাঝারি বি সিম এইচ 2 এস (-), ইন্ডোল (-) এবং গতিশীলতা (+) পরীক্ষা এবং সিম এইচ 2 এস (+), ইন্ডোল (-), গতিশীলতা (+) পরীক্ষা। সূত্র: এ। লেখক এমএসসি তোলা ছবি। মেরিলসা গিল বি এমফ্লোয়েজা

অন্যান্য মিডিয়ার মতো নয়, কিছু ব্যাকটিরিয়াগুলির চলাচল ক্ষমতা সনাক্তকরণের জন্য এটি অবশ্যই অর্ধ-কঠিন হতে হবে। এই অর্থে, এই পরীক্ষাটি এন্টারোব্যাকটেরিয়াসির জন্য খুব ভাল কাজ করে, তবে নন-ফার্মেন্টিং গ্রাম নেতিবাচক রডগুলিতে নয়, যেখানে হ্যাং ড্রপের মতো অন্যান্য পদ্ধতি ব্যবহার করা পছন্দ করা হয়।

সিম মাধ্যমটি নির্দিষ্ট কিছু বৈশিষ্ট্যগুলিকে আলাদা করতে দেয় যা অন্যের সাথে কিছু ব্যাকটেরিয়া বৈশিষ্ট্যযুক্ত। উদাহরণস্বরূপ, Escherichia কলি এইচ ₂ এস (-), ইন্দোল (+) এবং গতিশীলতা (+) হয়ে আলাদা করা হয়েছে, অন্যদিকে প্রোটিয়াস মিরাবিলিস এইচ ₂ এস (+), ইন্ডোল (-), গতিশীলতা (+) হিসাবে রয়েছে।

ভিত্তি

এটি একটি সংস্কৃতি মাধ্যম যা পৃথক হিসাবে বিবেচিত হয়, কারণ এর ব্যবহার অণুজীবের মধ্যে পার্থক্য করে যারা হাইড্রোজেন সালফাইড উত্পাদন করতে সক্ষম নয় তাদের থেকে; এটি সেগুলি হাইলাইট করে যা ট্রাইপ্টোফেন থেকে ইন্ডোল গঠন করে যাগুলি তাদের থেকে নয় এবং অবশেষে স্থিতাবস্থা থেকে গতিশীল ব্যাকটিরিয়াকে পৃথক করে।

শক্তির উৎস

যে কোনও সংস্কৃতি মাধ্যমের মতো, এর মধ্যে এমন উপাদান রয়েছে যা প্রয়োজনীয় পুষ্টি সরবরাহ করে যাতে অ-দাবিতে থাকা অণুজীবগুলি বিকাশ করতে পারে। এই উপাদানগুলি পেপটোন এবং ট্রিপটিন দ্বারা প্রতিনিধিত্ব করা হয়।

এই মাধ্যমটি যে বৈশিষ্ট্যগুলি মূল্যায়ন করে তার উপস্থিতি বা অনুপস্থিতি পর্যবেক্ষণ করতে সক্ষম হওয়ার জন্য মাধ্যমের অণুজীবের বিকাশ অপরিহার্য।

হাইড্রোজেন সালফাইড উত্পাদন

সংক্ষিপ্ত আকার সিম এর এস অক্ষর হাইড্রোজেন সালফাইড (এইচ ₂ এস) উত্পাদন বোঝায় । হাইড্রোজেন সালফাইড গঠনে সক্ষম ব্যাকটিরিয়া সোডিয়াম থায়োসালফেট থেকে সালফার গ্রহণ করবে।

এইচ ₂ এস-কালারলেস গ্যাস তৈরি হয়ে গেলে, এটি মাঝারি উপস্থিত লোহার লবণের সাথে প্রতিক্রিয়া দেখা দেয়, লৌহ সালফাইড তৈরি করে, পরিষ্কারভাবে দৃশ্যমান হয় (কালো বৃষ্টিপাত)। ব্যাকটিরিয়া যা এইচ ₂ এস গঠন করে না, মূল রঙের (বেইজ) মাঝারিটি ছেড়ে যান।

কালো বৃষ্টিপাতের উপস্থিতি গতিশীলতার ব্যাখ্যাকে বাধা দিতে পারে। তবে, বেশিরভাগ এইচ ₂ এস- উত্পাদনকারী এন্টারোব্যাক্টেরিয়াসি স্যালমনেলা, প্রোটিয়াস এবং সিট্রোব্যাক্টারের মতো ইতিবাচক গতিশীল হিসাবে পরিচিত। তদতিরিক্ত, প্রায় পুরো মাঝারি কভার কালো বৃষ্টিপাত ইতিবাচক গতিশীলতার পরামর্শ দেয়।

ইন্দোল গঠন

সংক্ষিপ্ত আকার সিমের দ্বিতীয় অক্ষরটি "I", যা ইন্ডোল গঠনের প্রতিনিধিত্ব করে।

এই অর্থে, ট্রিপটাইন পুষ্টির উত্স হওয়ার পাশাপাশি আরও একটি মৌলিক কার্য সম্পাদন করে। এই পেপটোন ট্রাইপটোফেন নামক একটি অ্যামিনো অ্যাসিড সমৃদ্ধ, তাই, এটি ট্রিপটোফানেস উত্পাদনকারী ব্যাকটিরিয়াকে দেখাতে পারে।

এই এনজাইমটি ইনডোল (বর্ণহীন পদার্থ), পাইরুভিক অ্যাসিড এবং অ্যামোনিয়ামের ফলস্বরূপ গঠনের সাথে অ্যামিনো অ্যাসিড ট্রাইপটোফান ক্লিভ করার জন্য দায়ী।

সে কারণেই, এই প্রতিক্রিয়াটি দেখানোর জন্য, একটি প্রকাশক পদার্থ যুক্ত করতে হবে (এহরলিচের রিজেন্ট বা কোভাকের রিএজেন্ট)। হয় আগর পৃষ্ঠের উপর একটি লাল-ফুচিয়া রিং আকারের পদার্থ গঠন, indole সঙ্গে প্রতিক্রিয়া। যদি ফুচিয়া রিংটি উপস্থিত হয় তবে ইন্ডোল পরীক্ষাটি ইতিবাচক হিসাবে ব্যাখ্যা করা হয়।

এই এনজাইমের অধিকারী না ব্যাকটিরিয়া রিংটি তৈরি করে না এবং এটি নেতিবাচক ইন্ডোল পরীক্ষা হিসাবে ব্যাখ্যা করা হয়।

এটি লক্ষণীয় গুরুত্বপূর্ণ যে ইন্ডোল পরীক্ষাটি ব্যাখ্যার জন্য সর্বশেষ হওয়া উচিত, যেহেতু একবার রিএজেন্ট যুক্ত করা হয়, মাঝারিটি মেঘলা হয়ে যায়, যার ফলে গতিশীলতাটি দৃশ্যমান করা শক্ত হয়ে যায়।

তত্পরতা

অবশেষে সিম শব্দের "এম" বর্ণটির অর্থ গতিশীলতা। গতিশীলতার মূল্যায়ন করার জন্য, এই মাধ্যমটি কৌশলগতভাবে আধা-কঠিন, কারণ ব্যাকটিরিয়া গতি আছে কিনা তা পর্যবেক্ষণ করতে সক্ষম হওয়ার জন্য এই বৈশিষ্ট্যটি অপরিহার্য। ফ্ল্যাজেলা রয়েছে এমন ব্যাকটিরিয়া হ'ল এই ধনাত্মক পরীক্ষা দেয়।

প্রাথমিক ইনোকুলাম এবং তার চারপাশে দুর্বলতা লক্ষ্য করা গেলে একটি ইতিবাচক পরীক্ষাটি স্পষ্ট হবে। অন্যদিকে, ননমোটাইল ব্যাকটিরিয়া কেবল প্রাথমিক ইনোকুলামের পথেই বিকাশ করে।

প্রস্তুতি

মাঝারি সিম

পানিশূন্য মাঝারিমা 30 গ্রাম ওজন এবং পাতিত জলের এক লিটার দ্রবীভূত। মিশ্রণটি 5 মিনিটের জন্য দাঁড়িয়ে থাকে এবং তারপরে ফুটন্ত উত্তপ্ত হয়ে যায়, সম্পূর্ণ দ্রবীভূত হওয়া পর্যন্ত ঘন ঘন নাড়তে।

তুলা ক্যাপ এবং অটোক্লেভ দিয়ে টেস্ট টিউবে মিশ্রণটি 15 মিনিটের জন্য 121 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে বিতরণ করুন। অটোক্লেভ থেকে টিউব র্যাকটি সরান এবং এটি একটি উল্লম্ব অবস্থানে দৃify়তর করার অনুমতি দিন, যাতে মাঝারিটি একটি ব্লকের আকারে থাকে।

এটি সংরক্ষণের জন্য এটি ব্যবহার না করা পর্যন্ত এটি ফ্রিজে রাখা হয়। প্রস্তুত মাধ্যমের অবশ্যই চূড়ান্ত পিএইচ 7.3 ± 0.2 থাকতে হবে।

মাঝারি ইনোকুলেট করার সময় এটি অবশ্যই রুমের তাপমাত্রায় থাকতে হবে। মাঝের রঙ বেইজ হয়।

কোভাকের রিএজেন্ট

150 মিলি এমিল বা আইসোমিল বা বুটাইল অ্যালকোহল পরিমাপ করুন। (উল্লিখিত তিনজনের মধ্যে একটি ব্যবহার করুন)।

পি-ডাইমাইথাইলামিনোবেনজালডিহাইডের 10 গ্রাম দ্রবীভূত করুন। তারপরে ধীরে ধীরে 50 মিলি ঘন হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড যুক্ত করুন।

ব্যবহারে প্রস্তুত রেজিটেন্ট বর্ণহীন বা হালকা হলুদ। এটি একটি অ্যাম্বার বোতলে রাখা উচিত এবং একটি ফ্রিজে রাখতে হবে। যদি এটি গা dark় বাদামী হয়ে যায় তবে ব্যবহার করবেন না; এটি ইঙ্গিত করে যে এটি ক্ষতিগ্রস্থ হয়েছে। এন্টারোব্যাক্টেরিয়াতে এসে এই রিএজেন্টটিকে অগ্রাধিকার দেওয়া হয়।

এরলিচের রিএজেন্ট

পি-ডাইমিথিলিনোমোনবেঞ্জালডিহাইডের 2 গ্রাম ওজন এবং 190 মিলি পরম ইথিল অ্যালকোহলে দ্রবীভূত করুন এবং 40 মিলি ঘন হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিডের সাথে ধীরে ধীরে মিশ্রিত করুন। কোভাকের রিএজেন্ট একইভাবে সঞ্চয় করুন। এহরিলিচের রিএজেন্ট সবচেয়ে বেশি ব্যবহৃত হয় নন-ফার্মেন্টিং এবং অ্যানেরোবিক ব্যাকটেরিয়ার জন্য।

অ্যাপ্লিকেশন

সিমের মাধ্যমটি ব্যাকটিরিওলজি পরীক্ষাগারে অত্যন্ত ব্যবহৃত হয়। এর সুবিধাটি হ'ল একই নলটিতে তিনটি প্রয়োজনীয় বৈশিষ্ট্য এন্টারোব্যাকটেরিয়া সনাক্তকরণে লক্ষ্য করা যায়।

বোনা

এই মাধ্যমটি বপন করার সঠিক উপায়টি সুই ব্যবহার করছে, যার সাহায্যে অধ্যয়নের জন্য খাঁটি উপনিবেশের একটি অংশটি মাঝারি কেন্দ্রে উল্লম্বভাবে andোকানো হয়। একটি একক লুঞ্জ করা উচিত। পাঞ্চারটি টিউবের নীচে পৌঁছানো উচিত নয়, সঠিক জিনিসটি গভীরতার মাত্র দুই তৃতীয়াংশকে coverেকে রাখা উচিত।

ইনোকুলাম পুনরাবৃত্তি করার পরামর্শ দেওয়া হয় না, কারণ এটি ইতিবাচক গতিশীলতার মিথ্যা ব্যাখ্যা করতে পারে। ইনোকুলেটেড মিডিয়ামটি 24 ঘন্টা বায়বীয়ভাবে তাপমাত্রা 37 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেড হয়।

একবার সময় শেষ হয়ে গেলে, এটি H ₂ S এর উত্পাদন ছিল কিনা এবং গতিশীলতাটি পড়া হয় কিনা তা পর্যবেক্ষণ করা হয়। অবশেষে ইন্ডোল প্রকাশিত হয়, এহরিচ বা কোভাকের রিএজেন্টের 3 থেকে 4 ফোঁটা যুক্ত করে আলতোভাবে মিশ্রিত করুন এবং ব্যাখ্যা করুন।

উত্স: কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 5 তম সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।

QA তে

জীবাণুমুক্ত নিয়ন্ত্রণ হিসাবে, একটি বা দুটি টিউব 24 ঘন্টার জন্য 37 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে কোনও চুলায় ইনোকুলেশন ছাড়াই ইনকিউবেটেড হয়। আশা করা যায় যে এই সময়ের পরে কোনও বৃদ্ধি বা রঙ পরিবর্তন হবে না।

কোয়ালিটি কন্ট্রোল হিসাবে, পরিচিত প্রত্যয়িত স্ট্রেনগুলি ব্যবহার করা যেতে পারে, যেমন: ইসেরিচিয়া কোলি এটিসিসি 25922, এন্টারোব্যাক্টর এয়ারোজেনস এটিসিসি 13048, ক্লেবিসিলা নিউমোনিয়া এটিসিসি 13883, সালমোনেলা টাইফিমুরিয়াম এটিসি 14028, শিগেলা সোনিই এটিসিসি 29930, প্রোটিয়াস ভ্যালগারিস এটিসি 13315।

প্রত্যাশিত ফলাফলগুলি হ'ল: ইসেরিচিয়া কোলি এইচ ₂ এস নেতিবাচক, ইন্ডোল এবং ধনাত্মক গতিশীলতা, এন্টারোব্যাক্টর কেবলমাত্র পজিটিভ গতিশীলতা, সালমনেল্লা টাইফিমুরিয়াম এইচ ₂ এস এবং পজিটিভ গতিশীলতা, নেতিবাচক ইন্ডোল সহ। প্রোটিয়াস ওয়ালগারিস সমস্ত ধনাত্মক, অন্যদিকে ক্লিবিসেলা নিউমোনিয়া এবং শিগেলা সমস্ত নেতিবাচক।

সীমাবদ্ধতা

মরগানেলা মরগানির কয়েকটি স্ট্রেন, অন্যান্য স্ট্রেনগুলির মধ্যে, মেলানিন উত্পাদনের কারণে এই মাঝারিতে একটি বাদামী বর্ণের রঙ্গক তৈরি করতে পারে, এটি ফেরস সালফাইডের বৃষ্টিপাতের সাথে বিভ্রান্ত হওয়া উচিত নয়। অনভিজ্ঞ পেশাদারদের মধ্যে এই পরিস্থিতি এইচ ₂ এস পরীক্ষার ব্যাখ্যায় মিথ্যা ইতিবাচকতা তৈরি করতে পারে ।

- কঠোর অ্যারোবিক ব্যাকটিরিয়া কেবল নলের পৃষ্ঠায় বৃদ্ধি পাবে, গতিশীলতার ব্যাখ্যার পক্ষে এটি কঠিন করে তোলে।

তথ্যসূত্র

1. বিডি ল্যাবরেটরিজ। বিবিএল সিম মিডিয়াম। 2008. বিডি.কম এ উপলব্ধ
2. নিওজন ল্যাবরেটরিজ সিম মাঝারি। উপলভ্য: Foodafety
3. ডিফ্কো ফ্রান্সিসকো সোরিয়া মেলগিজো। সিম মাঝারি। ২০০৯.এটি উপলভ্য:
4. ব্রিজুয়েলা-ল্যাব পরীক্ষাগার। মাঝারি সিম।.Brizuela-lab.com এ উপলব্ধ
5. ব্রিটানিয়া ল্যাবরেটরিজ। মাঝারি সিম। 2015.এটি উপলভ্য: অধ্যয়ন.স / ডক
6. কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 5 তম সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।