হিস্টোকেমিস্ট্রি: যুক্তি, প্রক্রিয়াজাতকরণ, দাগ দেওয়া - জীববিদ্যা - 2025

Histochemical যেমন শর্করা, লিপিড এবং প্রোটিনের অন্যান্যের মধ্যে রাসায়নিক রং যেমন টিস্যু উপাদান তার প্রতিক্রিয়া নীতি কারণে বিভিন্ন জৈবিক টিস্যু (উদ্ভিদ এবং প্রাণীর) এর অঙ্গসংস্থানবিদ্যা গবেষণা একটি দরকারী টুল।

এই মূল্যবান সরঞ্জামটি কেবলমাত্র টিস্যু এবং কোষের সংশ্লেষ এবং কাঠামো সনাক্ত করতে দেয় না, তবে তাদের মধ্যে বিভিন্ন প্রতিক্রিয়াও দেখা দেয়। তেমনি, অণুজীব বা অন্যান্য প্যাথলজিসমূহের উপস্থিতির ফলে সম্ভাব্য টিস্যুগুলির ক্ষতি প্রমাণিত হতে পারে।

হিস্টোকেমিক্যাল দাগ। নীল ভাইরাস, গ্রাম পজিটিভ এবং গ্রাম নেগেটিভ ব্যাকটিরিয়া (গ্রাম), হিস্টোপ্লাজমা ক্যাপসুল্যাটাম (গ্রোকট), মাইকোব্যাকটেরিয়াম যক্ষ্মা (জিহেল নীলসেন)। সূত্র: পিক্সিনিও / উইকিপিডিয়া.org / নেফ্রন / সিডিসি / ড। জর্জ পি। কুবিকা

হিস্টোকেমিস্ট্রি, বিগত শতাব্দী থেকে পল এহরলিচের রক্ত-মস্তিষ্কের বাধার অস্তিত্বের প্রদর্শন হিসাবে গুরুত্বপূর্ণ অবদান রাখে। এটি সম্ভব হয়েছিল কারণ এহরলিচের ব্যবহৃত পরীক্ষামূলক প্রাণীর মস্তিষ্ক অ্যানিলিন দিয়ে দাগযুক্ত ছিল না, এটি একটি মৌলিক ছোপানো।

এটি বিভিন্ন ধরণের কোষকে দাগ দেওয়ার জন্য বিভিন্ন রঙের যেমন মেথিলিন নীল এবং ইন্দোফেনল ব্যবহার করে। এই সন্ধানের ফলে অ্যাসিডোফিলিক, বেসোফিলিক এবং নিউট্রোফিলিকগুলিতে তাদের নির্দিষ্ট স্টেনিং অনুযায়ী কোষগুলির শ্রেণিবিন্যাস ঘটে led

সাম্প্রতিক গবেষণাগুলি লিটসি গ্লুসেসেন্স প্রজাতির টিস্যুগুলিতে ফিনোলস, পাশাপাশি কার্বোহাইড্রেট এবং অ-স্ট্রাকচারাল লিপিড সহ বিভিন্ন যৌগের উপস্থিতি প্রদর্শন করতে এই কৌশলটি প্রয়োগ করেছেন। এগুলি পাতায় এবং কাঠে উভয়ই সন্ধান করা।

তেমনি, কলারস এট অ্যাল, ২০১,, হিস্টোকেমিক্যাল কৌশল ব্যবহার করে medicষধি আগ্রহের তারেন্যা ঝামেলার গাছটি সনাক্ত করেছে। এই প্রজাতিতে স্টার্চ, মাইরোসিন পাশাপাশি ফেনলিক এবং লাইপোফিলিক যৌগগুলির উপস্থিতি প্রমাণিত হয়েছিল।

ভিত্তি

হিস্টোকেমিস্ট্রি নির্দিষ্ট রঞ্জকগুলির সাথে তাদের সখ্যতার জন্য ধন্যবাদ টিস্যুতে উপস্থিত সেলুলার কাঠামো বা অণুগুলির দাগের উপর ভিত্তি করে is এই কাঠামোগুলি বা অণুগুলির তাদের মূল বিন্যাসে রঙ করার প্রতিক্রিয়া পরবর্তী সময়ে অপটিকাল মাইক্রোস্কোপ বা ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপে দৃশ্যমান হয়।

স্টেইনিংয়ের বৈশিষ্ট্যটি কোষ বা টিস্যু অণুতে উপস্থিত আয়ন-গ্রহণযোগ্য গ্রুপগুলির উপস্থিতির কারণে হয়।

অবশেষে, হিস্টোকেমিক্যাল প্রতিক্রিয়াগুলির উদ্দেশ্য হ'ল এটি স্টেইনিংয়ের মাধ্যমে দেখাতে সক্ষম হয়। বৃহত্তম জৈবিক কাঠামো থেকে টিস্যু এবং কোষের ক্ষুদ্রতম পর্যন্ত। এটি টিস্যু, কোষ বা অর্গানেলগুলির অণুগুলির সাথে রঞ্জকগুলি রাসায়নিকভাবে প্রতিক্রিয়া দেখায় এর জন্য এটি অর্জন করা যায়।

প্রসিকিউশন

হিস্টোকেমিক্যাল বিক্রিয়ায় কৌশলটি সম্পাদন করার পূর্বে পদক্ষেপগুলি জড়িত থাকতে পারে, যেমন টিস্যু নির্ধারণ, এমবেডিং এবং কাটা। অতএব, এটি অবশ্যই বিবেচনায় নেওয়া উচিত যে এই পদক্ষেপগুলিতে শনাক্তকরণের কাঠামো ক্ষতিগ্রস্থ হতে পারে, এটি উপস্থিত থাকলেও মিথ্যা নেতিবাচক ফলাফল প্রদান করে।

এটি সত্ত্বেও, টিস্যুগুলির যথাযথভাবে বাহিত হওয়ার পূর্ব নির্ধারণ গুরুত্বপূর্ণ, কারণ এটি অটোলিসিস বা কোষ ধ্বংসকে বাধা দেয়। এর জন্য রাসায়নিক বিক্রিয়াগুলি জৈব দ্রাবক যেমন: ফর্মালডিহাইড বা গ্লুটারালডিহাইড সহ অন্যদের মধ্যে ব্যবহার করা হয়।

ফ্যাব্রিক অন্তর্ভুক্তি করা হয় যাতে এটি কাটা যখন তার দৃ its়তা বজায় রাখে এবং এইভাবে এটি বিকৃত থেকে প্রতিরোধ করে। অবশেষে, কাটাটি অপটিকাল মাইক্রোস্কোপি দ্বারা নমুনাগুলির অধ্যয়নের জন্য একটি মাইক্রোটোম দিয়ে তৈরি করা হয়।

অধিকন্তু, হিস্টোকেমিক্যাল স্টেইনিংয়ের সাথে এগিয়ে যাওয়ার আগে, পরীক্ষার প্রতিটি ব্যাচে বাহ্যিক বা অভ্যন্তরীণ ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণগুলি অন্তর্ভুক্ত করার পরামর্শ দেওয়া হয়। পাশাপাশি স্ট্রাকচারগুলি অধ্যয়ন করার জন্য নির্দিষ্ট রঙের ব্যবহার।

হিস্টোকেমিক্যাল দাগ

হিস্টোকেমিক্যাল প্রযুক্তির উত্থান থেকে এখন অবধি, বেশিরভাগ ঘন ঘন ব্যবহৃত যেমন: পর্যায়ক্রমিক অ্যাসিড শিফ (পিএএস), গ্রোকাট, জিহেল-নেলসেন এবং গ্রাম সহ বিভিন্ন ধরণের দাগ ব্যবহার করা হয়েছে।

তেমনি, অন্যান্য বর্ণগুলি অন্যদের মধ্যে যেমন ইন্ডিয়া কালি, অরসিন বা ম্যাসনের ট্রাইক্রোম দাগ হিসাবে কম ঘন ঘন ব্যবহার করা হয়েছে।

পর্যায়ক্রমিক অ্যাসিড শিফ (পিএএস)

এই রঙিনকরণের সাথে উচ্চতর কার্বোহাইড্রেট উপাদানযুক্ত অণুগুলি লক্ষ্য করা যায়, যেমন: গ্লাইকোজেন এবং মিউকিন। তবে এটি ছত্রাক এবং পরজীবী হিসাবে জীবাণু সনাক্তকরণের জন্যও দরকারী। ত্বক এবং অন্যান্য টিস্যুতে নির্দিষ্ট কাঠামো (বেসমেন্ট মেমব্রেন) ছাড়াও।

এই স্টেনিংয়ের ভিত্তি হ'ল ডাই কাছাকাছি দুটি হাইড্রোক্সিল গ্রুপের মধ্যে কার্বন বন্ধনকে জারণ করে। এটি অ্যালডিহাইড গোষ্ঠীর মুক্তি প্রকাশ করে এবং এটি শিফের রিএজেন্ট দ্বারা বেগুনি রঙ ছাড়াই সনাক্ত করা হয়।

শিফ রিএজেন্টটি মৌলিক ফুসিন, সোডিয়াম বিপাকীয় ও হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড সমন্বয়ে গঠিত, যখন এলডিহাইড গ্রুপ উপস্থিত থাকে তখন এই উপাদানগুলি বেগুনি বর্ণের জন্য দায়ী। অন্যথায় বর্ণহীন অ্যাসিড তৈরি হয়।

রঙের তীব্রতা মনোস্যাকচারাইডগুলিতে উপস্থিত হাইড্রোক্সিল গ্রুপগুলির পরিমাণের উপর নির্ভর করবে। উদাহরণস্বরূপ, ছত্রাক, বেসমেন্ট মেমব্রেনস, মিউকিনস এবং গ্লাইকোজেনে রঙ লাল থেকে বেগুনি পর্যন্ত হতে পারে, নিউক্লিয়াসে দাগ নীল থাকে।

Grocott

প্যারাফিন-এমবেডেড টিস্যুগুলিতে ছত্রাক সনাক্তকরণে এটি সর্বোচ্চ সংবেদনশীলতা সহ একটি দাগ। এটি বিভিন্ন ছত্রাকের কাঠামোর সনাক্তকরণের অনুমতি দেয়: হাইফাই, স্পোরস, এন্ডোস্পোরস, অন্যদের মধ্যে। সুতরাং, এটি মাইকোসিস নির্ণয়ের জন্য একটি নিয়মিত দাগ হিসাবে বিবেচিত হয়।

এটি বিশেষত নিউমোসাইটোসিস এবং অ্যাস্পারগিলোসিস জাতীয় জেনেরা নিউমোসাইটিসিস এবং এস্পারগিলাসের কিছু ছত্রাকের কারণে সৃষ্ট পালমোনারি মাইকোজিস নির্ণয়ের ক্ষেত্রে ব্যবহৃত হয়।

এই দ্রবণটিতে সিলভার নাইট্রেট এবং ক্রোমিক অ্যাসিড রয়েছে, এটি পরেরটি স্থিরকারী এবং রঙিন। যুক্তিটি হ'ল এই অ্যাসিডটি ছত্রাকের কাঠামোতে উপস্থিত মিউকোপলিয়াচারাইড দ্বারা অ্যালডিহাইডগুলিতে হাইড্রোক্সিল গ্রুপগুলির জারণ উত্পাদন করে, উদাহরণস্বরূপ ছত্রাকের কোষের দেয়ালে।

অবশেষে, দ্রবণে উপস্থিত রৌপ্যটি অ্যালডিহাইডগুলি দ্বারা জারণ করা হয়, যার ফলে একটি কালো রঙিন হয়, যাকে আর্জেন্টাফিন প্রতিক্রিয়া বলা হয়। কনট্রাস্ট রঞ্জক যেমন হালকা সবুজ এছাড়াও ব্যবহার করা যেতে পারে এবং এইভাবে ছত্রাকের কাঠামোগুলি হালকা সবুজ পটভূমিতে কালো রঙে লক্ষ্য করা যায়।

Ziehl-Neelsen

এই স্টেইনিং অ্যাসিড-অ্যালকোহল প্রতিরোধের উপস্থিতির উপর ভিত্তি করে আংশিক বা সম্পূর্ণভাবে কিছু নিকার্ডিয়া, লেজিওনেলা এবং মাইকোব্যাক্টেরিয়াম জেনারার মতো অণুজীবগুলিতে।

এই দাগের ব্যবহারটি সুপারিশ করা হয়, কারণ পূর্বে উল্লিখিত অণুজীবের কোষ প্রাচীরের মধ্যে জটিল লিপিড রয়েছে যা রঞ্জকগুলির প্রবেশকে বাধা দেয়। বিশেষত শ্বাস নালীর থেকে নমুনাগুলিতে।

এতে কার্বল ফুচিন (বেসিক কালারেন্ট) এর মতো শক্তিশালী কলারেন্ট ব্যবহার করা হয় এবং তাপ প্রয়োগ করা হয় যাতে অণুজীবগুলি কলারেন্ট ধরে রাখতে পারে এবং অ্যাসিড এবং অ্যালকোহলগুলির সাথে বর্ণহীন না হয়। অবশেষে, বর্ণ বিহীন কাঠামোগুলি রঙ করার জন্য একটি মিথিলিন নীল সমাধান প্রয়োগ করা হয়।

অ্যাসিড-অ্যালকোহল প্রতিরোধের উপস্থিতিগুলি স্ট্রাকচারগুলিতে লাল দাগযুক্ত অবস্থায় দেখা যায়, অন্যদিকে কাঠামো যে বিবর্ণ হয় না তা নীল রঙের হয়।

গ্রাম ও চাইনিজ কালি

ব্যাকটিরিয়া এবং ছত্রাকের সংক্রমণ নির্ণয়ের ক্ষেত্রে ছত্রাকটি খুব কার্যকর দাগ। এই স্টেইনিং কোষের প্রাচীরের গঠনে বিদ্যমান পার্থক্যগুলি পরিষ্কারভাবে গ্রাম-পজিটিভ এবং গ্রাম-নেতিবাচক অণুজীবগুলির মধ্যে পার্থক্য করতে দেয়।

যদিও ভারতের কালি এমন একটি দাগ যা পলিস্যাকারাইডস (ক্যাপসুল) ধারণ করে এমন কাঠামোর বিপরীতে ব্যবহৃত হয়। এটি কারণ পরিবেশে একটি রিং গঠিত হয় যা ক্রিপ্টোকোকাস নিউফর্ম্যানসে সম্ভব possible

Orcein

এই স্টেনিংয়ের সাথে, বিভিন্ন কোষের স্থিতিস্থাপক তন্তু এবং ক্রোমোজোমগুলি রঙিন হয়, যার ফলে পরবর্তীকালের পরিপক্কতা প্রক্রিয়াটি মূল্যায়নের অনুমতি দেয়। এই কারণে, সাইটোজেনেটিক স্টাডিতে এটি খুব দরকারী।

এটি বিভিন্ন ধরণের কোষের নিউক্লিয়ায় উপস্থিত ডিএনএর মতো অণুগুলির নেতিবাচক চার্জ দ্বারা রঞ্জক উত্থাপনের ভিত্তিতে তৈরি। সুতরাং এগুলি নীল থেকে গা dark় বেগুনি দাগযুক্ত।

ম্যাসনের ট্রাইক্রোম

এই দাগটি এমন কিছু অণুজীব বা উপাদানগুলিকে সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয় যা মেলানিক রঙ্গকগুলি ধারণ করে। এটি মাইকেসগুলির ক্ষেত্রে, ডিমেটিসাস ছত্রাক, ফিওফাইমোসিসিস এবং কালো দানা ইউমিসটোমাতে ঘটে।

সর্বশেষ ভাবনা

সাম্প্রতিক বছরগুলিতে নতুন ডায়াগনস্টিক কৌশল তৈরিতে অনেক অগ্রগতি হয়েছে, যেখানে হিস্টোকেমিস্ট্রি জড়িত তবে অন্যান্য মৌলিক বা নীতিগুলির সাথে যুক্ত। এই কৌশলগুলির একটি পৃথক উদ্দেশ্য রয়েছে, যেমন ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি বা এনজাইমোহিস্টোকেস্ট্রি ক্ষেত্রে।

তথ্যসূত্র

1. আকুয়া ইউ, এলগেরো জে হিস্টোকোমিকা। আন। 2012; 108 (2): 114-118। Are.iqm.csic.es এ উপলব্ধ
2. 2015 সালে ইউজিনিও এস্পেজো স্পেশালিটি হাসপাতালের প্যাথোলজিকাল অ্যানাটমি সার্ভিসে সঞ্চালিত অণুজীবের সনাক্তকরণের জন্য ব্যবহৃত পাস, গ্রোক এবং জিহেল-নীলসেন হিস্টোকেমিক্যাল দাগের মেসস্তঞ্জা আর ফ্রিকোয়েন্সি.. ইকুয়েডর কেন্দ্রীয় বিশ্ববিদ্যালয়, কুইটো; 2016. উপলভ্য এখানে: dspace.uce.edu
3. তাপিয়া-টরেস এন, ডি লা পাজ-পেরেজ-ওলভেরা সি, রোমন-গেরেরো এ, কুইন্টানার-íিশাস এ, গার্সিয়া-মেরিকেজ ই, ক্রুজ-সোসা এফ, হিস্টোকেমিস্ট্রি, মোট ফিনোল সামগ্রী এবং লিডিয়া পাতা এবং কাঠের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্রিয়াকলাপ গ্লুসেসেনস কুন্থ (লরসি)। কাঠ এবং বন। 2014; 20 (3): 125-137। Redalyc.org এ উপলব্ধ
4. কলারস, এমএন, মার্টিনিজ-অ্যালোনসো, এস, আরামবাড়ি, এএম। তারনায়েয়া হ্যাসলেরিয়ানা (ক্লিওম্যাসি) এর অ্যানাটমি এবং হিস্টোকেমিস্ট্রি, এক প্রজাতির medicষধি আগ্রহ। ল্যাটিন আমেরিকান এবং ক্যারিবিয়ান বুলেটিন অফ মেডিসিনাল এবং অ্যারোমেটিক প্ল্যান্টস 2016; 15 (3): 182-191। Redalyc.org এ উপলব্ধ
5. বুনিফাজ এ বেসিক মেডিকেল মাইকোলজি। চতুর্থ সংস্করণ। মেক্সিকো: ম্যাকগ্রা-হিল ইন্টেরামেরিকানা সম্পাদক, এসএ ডি সিভি 2012।
6. সিলভা ডিয়েগো ফিলিপ বেজারেরা, সান্তোস হেলেন বন্দিরা দে পন্টেস, লেন জর্জি এসকিচ, গোমেস ডালিয়ানা কুইরোগা ডি কাস্ত্রো, আলভেস পলিয়ানা মুনিজ, নোনাকা ক্যাসিয়ানো ফ্রান্সিসকো ওয়েজ। ক্লিনিকো প্যাথোলজিকাল এবং ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল বিশ্লেষণ জিহ্বার স্পিন্ডাল সেল স্কোয়ামাস সেল কার্সিনোমা: একটি বিরল ক্ষেত্রে। আইনস্টাইন (সাও পাওলো) 2019; 17 (1): eRC4610। উপলব্ধ থেকে: scielo.br