হেমাটোক্সিলিন-ইওসিন দাগ: বৈশিষ্ট্য, ব্যবহার, কৌশল - রসায়ন - 2025

Hematoxylin - লাল রঞ্জক পদার্থ বিশেষ ডাই hematoxylin এবং লাল রঞ্জক পদার্থ বিশেষ সমন্বয় ব্যবহার করে একটি পুনরায় কৌশল। এই জোড়া রঙগুলি একটি নিখুঁত জুটি তৈরি করে, কারণ হেম্যাটোক্সেলিন একটি মৌলিক রঞ্জক হিসাবে কাজ করে এবং ইওসিন একটি অ্যাসিড রঞ্জক হিসাবে কাজ করে।

বেসিক বা অ্যাসিড রঞ্জকগুলির পদবী তাদের সমাধানে প্রাপ্ত পিএইচ নির্দেশ করে না, বরং তাদের কাছে থাকা অ্যানিয়োনিক বা ক্যাটিনিক চার্জের ক্ষেত্রে বা ক্রোমোফোর গোষ্ঠীর অবস্থান অনুসারে প্রচলিত অনুপাতের কথা বলে।

হেমাটোক্সিলিন - ইওসিন (তিনি) দাগযুক্ত কলামের এপিথেলিয়াম উত্স: টড স্ট্রাস এবং ভ্লাদিমির ওসিপভ

এই অর্থে, হেমোটোক্সিলিনকে একটি বেসিক (ক্যাটিনিক) রঙ্গ হিসাবে বিবেচনা করা হয় এবং তাই অ্যাসিডের কাঠামোর যেমন একটি কোষের নিউক্লিয়াসের সাথে একটি সখ্যতা রয়েছে। ইওসিন যখন অ্যাসিড (অ্যানিয়োনিক) রঙ্গক হয়ে থাকে তখন কোষ সাইটোপ্লাজমের মতো ক্ষারীয় বা মৌলিক কাঠামোর সাথে একটি সখ্যতা রয়েছে।

এই কারণে, রঞ্জকগুলির এই সংমিশ্রণটি টিস্যু দাগের জন্য ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়, কারণ এটি নিউক্লিয়াস এবং সাইটোপ্লাজমগুলিকে স্পষ্টভাবে আলাদা করতে দেয়। নিউক্লিয়াইট দাগ গা dark় নীল বা বেগুনি এবং সাইটোপ্লাজম গোলাপী।

হিমেটক্সিলিন-ইওসিন স্টেইনিং হিস্টোলজি এবং সাইটোলজির ক্ষেত্রে সর্বাধিক ব্যবহৃত স্টেনিং কৌশলগুলির মধ্যে একটি, এর সহজ পরিচালনা ও স্বল্প ব্যয়ের কারণে। এটি কোষ, ঘন স্নায়ু তন্তু এবং টিস্যুগুলিতে কিছু নির্দিষ্ট অণুজীবের উপস্থিতি যেমন: পরজীবী, ছত্রাক এবং ব্যাকটিরিয়া, অন্যদের মধ্যে দৃশ্যমান করতে ব্যবহৃত হয়।

বৈশিষ্ট্য

হেমোটোক্সিলিন

হেমোটোক্সেলিন একটি নিরপেক্ষ রঞ্জক। তবে যে উপাদানটি রঙ সরবরাহ করে (ক্রোমোফোর) তা অণুর ক্যাশনিক বা বেসিক সেন্টারে থাকে। অতএব অ্যাসিড স্ট্রাকচারের জন্য এটির সখ্যতা। এর রাসায়নিক সূত্রটি সি ₁₆ এইচ ₁₄ হে ₆ এবং এর বৈজ্ঞানিক নাম 7,11b-dihydroindeno ক্রোমেন -3, 4,6a, 9,10 (6 এইচ) -পেনটোল।

এটি মূলত কোষগুলির নিউক্লিয়াকে দাগ দেয়, যেহেতু তারা নিউক্লিক অ্যাসিডে খুব সমৃদ্ধ। এটি ভাইরাল উত্সের সাইটোপ্লাজমিক অন্তর্ভুক্তিকেও দাগ দিতে পারে।

হেমাটক্সিলিনের দাগ পড়ার জন্য, এটি অবশ্যই একটি জারিত অবস্থায় থাকতে হবে এবং একটি ধাতুর সাথে আবদ্ধ। পরেরটি টিস্যুগুলিকে স্থির করতে পরিবেশন করবে, এটি একটি মরড্যান্ট হিসাবে কাজ করবে।

যখন হেমোটোক্সিলিনকে জারণ করা হয় তখন তাকে হেমেটেইন বলে। পুনঃসংশ্লিষ্ট অক্সিজেনের (বার্ধক্য) সংস্পর্শে বা এর জারণ (রাসায়নিক জারণ) সাহায্যকারী পদার্থের মাধ্যমে জারণ অর্জন করা হয়।

ইওসিন

ইওসিন একটি রঞ্জক যা লাল বা গোলাপী দাগ দেয় s পানির দ্রবণীয় সংস্করণ থাকলেও এটি পানিতে দ্রবণীয়। সাধারণত, ইওসিন অ্যালকোহল (95 ° ইথানল) এ দ্রবীভূত হয়ে প্রস্তুত হয়।

এটি সাইটোপ্লাজম, পেশী তন্তু, সাইটোপ্লাজমিক অর্গানেলস এবং কোলাজেনকে দাগ দেয় তবে কোষ নিউক্লিয়ায় দাগ পড়ে না। এটি কারণ এটি নেতিবাচক চার্জ করা হয়, তাই এটি ইতিবাচক চার্জযুক্ত কাঠামোর সাথে একটি সখ্যতা রাখে।

"Y" এবং "বি" দুই ধরণের ইওসিন রয়েছে। ইওসিন "ওয়াই" হলুদ ইওসিন নামে পরিচিত। এর বৈজ্ঞানিক নাম টেট্রব্রোমো ইউরেসিন এবং এর রাসায়নিক সূত্রটি সি ₂₀ এইচ ₈ বিআর ₄ ও ₅ ।

অন্যদিকে, ইওসিন "বি" কে কখনও কখনও নীলাভ এরিথ্রোসিন বি বলা হয় B. এর বৈজ্ঞানিক নাম dibromodynitro n uorescein এবং সূত্রটি C ₂₀ H ₈ Br ₂ N ₂ O ₉ । উভয়ই একইরকম এবং এক বা অন্য ব্যবহারের মধ্যে পার্থক্যটি সত্যই লক্ষণীয় নয়। তবে সবচেয়ে জনপ্রিয় হ'ল ইওসিন "ওয়াই"।

ইওসিনের একটি জীবন্ত কোষ এবং একটি মৃত ব্যক্তির মধ্যে পার্থক্য করার সম্পত্তি রয়েছে, কারণ কোষগুলি মারা যাওয়ার সময় এটি কেবল ঝিল্লিটি পার হয়ে তার সাইটোপ্লাজমকে দাগ দিতে পারে, কোষের সাইটোপ্লাজম জীবিত থাকলেই বর্ণহীন রেখে দেয়।

অ্যাপ্লিকেশন

নার্ভ ফাইবার স্টেইনিং

ঘন নার্ভ ফাইবারগুলি দাগযুক্ত এবং হেমোটোক্সিলিন-ইওসিন দিয়ে সনাক্ত করা যায়। তবে, এটি পাতলা স্নায়ু ফাইবারের দাগের জন্য কার্যকর নয়, যেহেতু পরবর্তী রূপটি দেখার জন্য একটি রূপোর দাগ প্রয়োজন।

Histতিহাসিক ত্বকের বিভাগের দাগ

ত্বকের শৃঙ্গাকার স্তরটির দাগের মধ্যে যে রঞ্জকটি কাজ করে তা ইওসিন হয়, যেহেতু এই স্তরে কোষগুলির নিউক্লিয়াস থাকে না।

ত্বকের দানাদার স্তরে, হেমোটোক্সেলিন গ্রানুলের কোষের অভ্যন্তরে কেরাটোহ্যালিন গ্রানুলগুলিকে দৃ.়ভাবে দাগ দেয়। বিপরীতে, ত্বকের স্পিনাস স্তর হিম্যাটোক্সিলিন দিয়ে দুর্বলভাবে দাগযুক্ত হয়, তবে বেসাল বা জীবাণু স্তরটি বেশ দাগযুক্ত।

ইওসিন সমস্ত কোষের সাইটোপ্লাজমকে দাগ দেয় এবং রঙের তীব্রতা স্তর থেকে স্তর পর্যন্ত পরিবর্তিত হতে পারে।

মল স্যাম্পলগুলির হেমেটক্সিলিন-ইওসিন দাগ

গেমেজ এট আল।, ২০০ 2005 সালে প্রমাণিত হয়েছিল যে তীব্র ডায়রিয়াস রোগের রোগীদের মধ্যে নতুন করে দৃশ্যায়ন পদ্ধতির (স্যালাইন এবং লুগল) তুলনায় এন্টামোবা হিস্টোলিটিকা এবং এন্টামোইবা ডিসারের কারণে অ্যামোবায়াসিসের ক্ষেত্রে সনাক্তকরণে হেম্যাটোক্সিলিন-ইওসিন স্টেইনিং বেশি কার্যকর ছিল।

এটি এরিথ্রোফাগোসাইটোসিস (অ্যামিবে যা অ্যানিথ্রোসাইটগুলিতে জড়িত রয়েছে) সনাক্তকরণে অত্যন্ত সংবেদনশীল হিসাবে দেখানো হয়েছে।

সংক্রমণ নির্ণয়ের জন্য হিস্টোলজিকাল বিভাগগুলি স্টেইন করা

ওয়ালউইন এট আল।, ২০০৪ সালে সংক্রমণজনিত অণুজীবকে সনাক্ত করতে হিস্টোলজিক্যাল দাগের ব্যবহারের প্রস্তাব দেয়।

হেমাটোক্সিলিন-ইওসিন স্টেনিং ব্যবহার করে তারা ক্লোস্ট্রিডিয়াম, অ্যাক্টিনোমাইসেস, স্পিরিলি বা ক্যান্ডিডা দ্বারা সৃষ্ট সংক্রমণের কল্পনা করতে সক্ষম হয়েছিল। তারা ত্বকের বিভাগগুলিতে পরজীবী সারকোপেটস এসকিবিয়ের উপস্থিতি এবং বিভিন্ন টিস্যুগুলির বিভাগে সাইটোমেগালভাইরাস এবং হার্পিস দ্বারা ভাইরাল অন্তর্ভুক্তি পর্যবেক্ষণ করতে সক্ষম হন।

প্রযুক্তি

হিস্টোলজিকাল নমুনার জন্য

Histতিহাসিক বিভাগের স্টেইনিং বিভিন্ন ধাপের মধ্য দিয়ে যায়। প্রথম জিনিসটি হিস্টোলজিকাল বিভাগটি অর্জন করা। এটি অবশ্যই একটি মাইক্রোটোম দিয়ে কাটগুলি (অতি-জরিমানা) পাওয়ার জন্য মোম করতে হবে। কৌশলটি নিম্নলিখিত পদক্ষেপগুলি নিয়ে গঠিত:

1-অতিরিক্ত প্যারাফিন নির্মূল: এর জন্য আপনি 3-5 মিনিটের জন্য জাইলল বা হেম-ডি ব্যবহার করতে পারেন, নিমজ্জন করতে পারেন।

নমুনার 2-রিহাইড্রেশন: অ্যালকোহল (ইথানল) এর উত্থিত ক্রমে (100 °, 90 °, 70 °) বিভিন্ন ঘনত্বের মধ্যে নমুনাকে নিমগ্ন করে এটি অর্জন করা হয়। 7 মিনিটের জন্য সব ক্ষেত্রে।

3-অতিরিক্ত অ্যালকোহল নির্মূল: এটির জন্য এটি 7 মিনিটের জন্য পানিতে ডুবে থাকে।

4-হেমাটোক্সিলিন দিয়ে দাগ দেওয়া: নমুনাটি হেমেটোক্সিলিনযুক্ত একটি ট্রেতে 6-10 মিনিটের জন্য নিমজ্জিত করা হয়। এক্সপোজার সময়টি নমুনার আকার এবং বেধের উপর নির্ভর করে।

5-অতিরিক্ত হেমাটোক্সিলিন নির্মূল: এটি 5 মিনিটের জন্য জলে ধৌত করা হয় এবং তারপরে অ্যাসিড অ্যালকোহলের মাধ্যমে একটি দ্রুত উত্তরণ (10-20 সেকেন্ড) বাহিত হয়। পরে এটি আবার 5 মিনিটের জন্য জলে ধুয়ে ফেলা হয়। তারপরে এটি 1 মিনিটের জন্য 96 ° এ ইথানলে ডুবে থাকে।

6-ইওসিন সহ দাগ করা: এর জন্য, নমুনাটি ইওসিন ট্রেতে 5 মিনিটের জন্য নিমজ্জিত করা হয়।

7-নমুনার ডিহাইড্রেশন: এটির জন্য, এটি আবার অ্যালকোহল ট্রে (ইথানল) দিয়ে আবার পাস করা হয়, তবে এবার আরোহী ক্রমে। (70 °, 90 °, 100 °) (যথাক্রমে 5 সেকেন্ড, 5 সেকেন্ড, 1 মিনিটের জন্য)।

নমুনার 8-স্পষ্টকরণ: এর জন্য, এটি 5-10 মিনিটের জন্য জাইললের সংস্পর্শে আসে এবং কানাডা বালসম বা অন্যান্য অনুরূপ উপাদানের সাথে স্থায়ীভাবে সিল করার জন্য শুকানো হয়।

মল স্যাম্পল খুঁজছেন জন্য

রোগীর স্টুল সহ একটি স্লাইডে একটি স্মিয়ার তৈরি করা হয় এবং 5 মিনিটের জন্য 80% অ্যালকোহল দিয়ে স্থির করা হয়। শীটটি 5 মিনিটের জন্য হেমোটোক্সিলিনে নিমজ্জিত করা হয় এবং ততক্ষণে জল দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়।

পরবর্তীকালে, এটি দ্রুত অ্যাসিড অ্যালকোহল এবং তারপরে অ্যামোনিয়া জলে নিমজ্জিত হয়। এটি জলে ধুয়ে নেওয়া হয়। ইওসিনে এটি 5 মিনিটের জন্য রঙিন হয়। পূর্বের শিল্পে বর্ণিত হিসাবে নমুনাটি ডিহাইড্রেটেড হয় এবং অবশেষে জাইলিন দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়।

রিজেন্টস প্রস্তুতকরণ

- হেমোটোক্সিলিন

এক লিটার পাতিত পানিতে 50 গ্রাম পটাসিয়াম বা অ্যামোনিয়াম অ্যালুমিনিয়াম সালফেট দ্রবীভূত করুন। সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত হয়ে গেলে, 1 গ্রাম স্ফটিকযুক্ত হেমাটোক্সিলিন যুক্ত করুন। সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত হওয়ার পরে, 1 গ্রাম সাইট্রিক অ্যাসিড 50 গ্রাম ক্লোরাল হাইড্রেট এবং 0.2 গ্রাম সোডিয়াম আয়োডেটের সাথে একত্রে যুক্ত হয়।

মিশ্রণটি 5 মিনিটের জন্য সিদ্ধ করা হয়, তারপরে ঠাণ্ডা এবং ফিল্টার করে রেখে দেওয়া হয়েছে যে কোনও শক্ত কণা রয়ে গেছে remove এইভাবে প্রস্তুত করা রিএজেন্ট তাত্ক্ষণিকভাবে ব্যবহার করা যেতে পারে।

- ইওসিন

এটি একটি অ্যালকোহলযুক্ত বেস বা জলের বেস দিয়ে প্রস্তুত করা যেতে পারে।

অ্যালকোহলযুক্ত ইওসিন

95 মিলিয়ন ইথানল 100 মিলি ইওসিন "ওয়াই" এর 0.5 গ্রাম দ্রবীভূত করে। তারপরে কয়েক ফোঁটা হিমবাহী এসিটিক অ্যাসিড যুক্ত করুন।

2% জলীয় ইওসিন

1250 মিলি পাত্রে জলে দ্রবণীয় ইওসিন "ওয়াই" 25 গ্রাম দ্রবীভূত হয়। তারপরে কয়েক ফোঁটা হিমবাহী এসিটিক অ্যাসিড যুক্ত করুন।

অ্যাসিড অ্যালকোহল

ঘন হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিডের 0.5 মিলি পরিমাপ করুন এবং পরম অ্যালকোহল দিয়ে 100 মিলি পর্যন্ত তৈরি করুন।

অ্যামোনিয়া জল

ঘন অ্যামোনিয়া 0.5 মিলি পরিমাপ করুন এবং পাতিত জল দিয়ে 100 মিলি পর্যন্ত তৈরি করুন।

তথ্যসূত্র

1. নাভারতেট, জি ত্বকের ইতিহাস Hist রেভ ফ্যাক মেড মেড ইউএনএএম 2003; 46 (4): 130-133। মেডিগ্রাফিক ডট কম এ উপলব্ধ
2. গমেজ-রিভেরা এন, মোলিনা এ, গার্সিয়া এম, কাস্টিলো জে, কাস্টিলো জে, গার্সিয়া আর, ফোনসেকা আই, ভ্যালেনজুয়েলা ও।
3. এন্টামোবা হিস্টোলিটিকা / ই সনাক্তকরণ তীব্র ডায়রিয়ায় হেম্যাটোক্সেলিন-ইওসিনের সাথে এটির স্টেনিংয়ের তুলনায় তাজা অ্যামিবা কৌশলটি আবিষ্কার করুন। রেভ মেক্স পেডিয়াটর 2005; 72 (3); 109-112। মেডিগ্রাফিক ডট কম এ উপলব্ধ
4. ওয়ালউইন ভি, ইগলেসিয়াস এম, আলামারেলস এম, অ্যাকোস্টা এন, মেরা এ, ক্যাব্রেজাস এম। শারীরবৃত্তীয় নমুনায় সংক্রমণ সনাক্তকরণের জন্য হিস্টোলজিকাল কৌশলগুলির কার্যকারিতা। রেভ কিউব মেড মিল, 2004; 33 (2)। উপলভ্য: scielo.sld
5. PanReac অ্যাপলিচেম ITW রিএজেন্টস। হেমোটোক্সিলিন-ইওসিনের দাগ। 2017, স্পেন। Itwreagents.com এ উপলব্ধ
6. ইওসিন। উইকিপিডিয়া, মুক্ত বিশ্বকোষ থেকে. 7 নভেম্বর 2018, 08:18 ইউটিসি। 4 আগস্ট 2019, 22:13 এন.উইকিপিডিয়া.রোগ
7. "হেমোটোক্সিলিন।" উইকিপিডিয়া, মুক্ত বিশ্বকোষ থেকে. 3 মে 2019, 11:23 ইউটিসি। 4 আগস্ট 2019, 22:48 উইকিপিডিয়া.org.org