ফসফেট বাফার (পিবিএস): যুক্তি, প্রস্তুতি এবং ব্যবহার - জীববিদ্যা - 2025

ফসফেট বাফার, ফসফেট বাফার লবণাক্ত বা BPS একটি বাফার isotonic, যার ফাংশন হয় করতে pH এর এবং প্রাকৃতিক জৈবিক পরিবেশ (শারীরবৃত্তীয়) পাসে যেমন আস্রবণসঙক্রান্ত চাপ বজায় রাখা। সংক্ষিপ্ত পিবিএস ফসফেট বাফার স্যালাইনের জন্য দাঁড়িয়েছে।

পিএইচ এবং অসমোলিটি দুটি খুব গুরুত্বপূর্ণ বিষয় যা নির্দিষ্ট পরীক্ষাগার প্রোটোকলগুলিতে নিয়ন্ত্রিত হতে হবে। পিএইচ-র ক্ষেত্রে এটি নিয়ন্ত্রণ করা জরুরি, বিশেষত জৈব-রাসায়নিক বিক্রিয়ায়, যেহেতু প্রতিক্রিয়াশীলরা কোনও অনুপযুক্ত পিএইচ থাকলে এগুলি পরিবর্তিত হতে পারে বা পরিচালিত হতে পারে না।

পিবিএস ফসফেট দুটি আলাদা পিএইচ এর স্যালাইন বাফার করেছে। সূত্র: পিক্সিনিও ডট কম

এদিকে, জীবন্ত কোষগুলির সাথে কাজ করার সময় অস্টিলেটারি নিয়ন্ত্রণ জরুরি, যেহেতু কোষগুলির প্লাজমা ঝিল্লিগুলি দ্রাবকগুলির ঘনত্ব অনুসারে প্রতিক্রিয়া দেখায় যেখানে তারা পাওয়া যায়।

যদি কোষগুলি হাইপারটোনিক মিডিয়ামে স্থানান্তরিত হয় তবে তারা ডিহাইড্রেটেড হয়ে যাবে, যেহেতু পানির গ্রেডিয়েন্টটি সেই দিকে স্থানান্তরিত হবে যেখানে দ্রবণগুলির উচ্চতর ঘনত্ব রয়েছে। অন্যদিকে, কোষগুলিকে একটি হাইপোটোনিক মিডিয়ামে স্থাপন করা হয়, কোষগুলি লিজ না হওয়া পর্যন্ত তরল শোষণ করবে।

এই কারণেই পিবিএস বাফার ল্যাবরেটরি প্রোটোকলের জন্য ব্যবহৃত হয় যা ভিট্রোর কোষগুলির রক্ষণাবেক্ষণের প্রয়োজন হয়, এইভাবে কোষগুলি ক্ষতিগ্রস্থ হবে না।

পিবিএস সোডিয়াম ক্লোরাইড, সোডিয়াম ফসফেট, পটাসিয়াম ক্লোরাইড এবং পটাসিয়াম ফসফেটের মতো লবণের সংমিশ্রণে গঠিত। পিবিএসের রচনা প্রোটোকলের উপর নির্ভর করে পরিবর্তিত হতে পারে।

ভিত্তি

মূলত ফসফেট বাফারের কাজটি হ'ল শরীরের অভ্যন্তরে পাওয়া ইলেক্ট্রোলাইট ঘনত্বের সাথে একসাথে একটি ধ্রুবক শারীরবৃত্তীয় পিএইচ বজায় রাখা।

এই পরিবেশে, কোষগুলি স্থিতিশীল থাকতে সক্ষম হয়, কারণ শারীরবৃত্তীয় পরিস্থিতি যতটা সম্ভব সিমুলেটেড হয়।

প্রয়োজনে অন্যান্য যৌগগুলি মূল পিবিএস গঠনে যুক্ত করা যেতে পারে, উদাহরণস্বরূপ বাফারে ইডিটিএ যুক্ত করা ক্রস-অসম্পূর্ণতা পরীক্ষায় লাল রক্তকণিকা ধোয়ার জন্য দরকারী।

ইডিটিএ সিরামের উপস্থিত পরিপূরক সি 1 এর ভগ্নাংশকে লোহিত রক্ত ​​কণিকাতে ক্লিভেড ও লিজড হওয়া থেকে বিরত করে, অর্থাৎ এটি মিথ্যা অসম্পূর্ণতার ফলাফল এড়িয়ে চলে। এছাড়াও, ইডিটিএ কোষগুলি পৃথকীকরণে সহায়তা করে।

প্রস্তুতি

পিবিএস ফসফেট বাফারযুক্ত স্যালাইনের প্রস্তুতির জন্য যে পরিমাণে লবণের পরিমাণ ওজন করতে হবে তা নির্ভর করবে যে পরিমাণ পরিমাণে প্রস্তুত করা দরকার:

-ফসফেট স্যালাইন স্টক সমাধানের জন্য বাফার করেছে (10 এক্স পিবিএস)

এক লিটার দ্রবণের জন্য:

ওজন করতে:

80C গ্রাম NaCl,

কেসিএলের ২.২ গ্রাম, না ₂ এইচপিও _{4 এর} 11.5 গ্রাম, 2.0 গ্রাম কেএইচ ₂ এইচপিও ₄

প্রস্তুতি কৌশল

একটি বেকারে ভারী লবণগুলি রাখুন, পর্যাপ্ত পরিমাণে জল (80%) যোগ করুন এবং লবণগুলি দ্রবীভূত না হওয়া পর্যন্ত চৌম্বক বারের সাথে আলোড়নকারী প্লেটে মিশ্রণ করুন।

চৌম্বকীয় বার দিয়ে একটি আলোড়নকারী প্লেট ব্যবহার করে পিবিএসের প্রস্তুতি। সূত্র: ব্যবহারকারী: রুহরিফিশ, উইকিপিডিয়া। কম

অমীমাংসিত কণা অপসারণ করতে ফিল্টার। 0.45 মিমি ছিদ্র সহ ফিল্টার ব্যবহার করুন। Ocাকনা সহ কাঁচের জারে ল্যামিনার ফ্লো হুডে অটোক্লেভ এবং বিতরণ করুন।

10 এক্স দ্রবণ (ঘনীভূত) পিএইচ সামঞ্জস্য করে না। সামঞ্জস্যতা একবার 1 এক্স পিবিএস বাফার ঘনত্বের (1:10 দুর্বলতা) মিশ্রিত করা হয়।

-বাফার ফসফেট স্যালাইন (1 এক্স পিবিএস)

1 এক্স পিবিএস সরাসরি প্রস্তুত করা যায়, প্রতিটি লবণের সাথে সংশ্লিষ্ট পরিমাণের ওজন নির্ধারণ করে, বা জীবাণুমুক্ত পানির সাথে স্টক সলিউশন (1:10) মিশিয়ে এটি প্রস্তুত করা যায়।

-১ এক্স পিবিএস ফসফেট বারফার স্যালাইনের সরাসরি এক লিটার প্রস্তুত করতে ওজন করুন:

নাসিএল এর 8.06 গ্রাম, কেসিএল এর 0.22 গ্রাম, না ₂ এইচপিও _{4 এর} 1.15 গ্রাম, কেএইচ ₂ এইচপিও _{4 এর} 0.20 গ্রাম

প্রস্তুতি কৌশল

ঘন দ্রবণ হিসাবে বর্ণিত হিসাবে এগিয়ে যান। পরবর্তীকালে, পিএইচ অবশ্যই সমন্বয় করতে হবে। এটি করার জন্য, পিএইচ পরিমাপ করুন এবং ফলাফলের উপর নির্ভর করে অ্যাসিড (এইচসিএল) বা বেস (নাওএইচ) ব্যবহার করুন যথাক্রমে পিএইচ কমিয়ে আনুন বা বাড়ান, এটি 7.4 না হওয়া পর্যন্ত is

পিএইচ মিটার ব্যবহার করে দ্রবণের পিএইচ মান পর্যবেক্ষণ করার সময় অ্যাসিড বা বেস ড্রপ দ্বারা ড্রপ যুক্ত করা হয়। ফিল্টার, অটোক্লেভ এবং প্রয়োজনীয়ভাবে শঙ্কু টিউব বা জারে বিতরণ করুন।

-10 এক্স স্টক সমাধান থেকে 1 এক্স পিবিএস প্রস্তুত করতে:

একটি 1:10 দুর্বলতা করুন। উদাহরণস্বরূপ, 1 লিটার 1 এক্স পিবিএস প্রস্তুত করতে, স্টক দ্রবণটির 100 মিলি পরিমাপ করুন এবং 700 মিলি জীবাণুমুক্ত পাত্রে জল যোগ করুন। পিএইচ সামঞ্জস্য করুন এবং 1000 মিলি পর্যন্ত জল পরিমাণ পূরণ করুন।

প্রস্তুত পিবিএস বাফার বর্ণহীন এবং স্পষ্ট।

দৈনিক পিবিএস ঘরের তাপমাত্রায় এবং বাকী ফ্রিজের মধ্যে সংরক্ষণ করা যেতে পারে।

পিএইচ সমন্বয় জন্য সমাধান

HCl

1 মোলার এইচসিএল (হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড) এর 100 মিলি জন্য।

91 মিলিলিটার পাতিত জল পরিমাপ করুন এবং এটি 250-এমএল বিকারে রাখুন।

ঘনকৃত এইচসিএল এর 8.62 মিলি পরিমাপ করুন এবং ধীরে ধীরে এটি জলযুক্ত বেকারে যুক্ত করুন (এটি অন্যভাবে কখনও করবেন না)। শক্তিশালী অ্যাসিডগুলি (অত্যন্ত ক্ষয়কারী পদার্থ) পরিচালনা করার সময় যথাযথ বায়োসফটি ব্যবস্থা গ্রহণ করুন।

কাঁচের অভ্যন্তরে চৌম্বকীয় বার দিয়ে একটি উত্তেজক প্লেট ব্যবহার করে 5 মিনিটের জন্য মিশ্রণ করুন। একটি 100 মিলি ফ্লাস্কে স্থানান্তর করুন এবং পাতিত H ₂ O দিয়ে 100 মিলি পর্যন্ত তৈরি করুন

NaOH

100 মিলি নওএইচ (সোডিয়াম হাইড্রোক্সাইড) 10 গুড়ের জন্য।

40 মিলি ডিস্টিলেট জল পরিমাপ করুন এবং এটি 250-এমএল বিকারে রাখুন। 40 গ্রাম নাওএইচ পরিমাপ করুন এবং জলে যুক্ত করুন। কাচের অভ্যন্তরে চৌম্বক বারের সাথে একটি আলোড়নকারী প্লেট ব্যবহার করে মিশ্রিত করুন।

একটি 100 মিলি ভলিউম্যাট্রিক ফ্লাস্কে স্থানান্তর করুন এবং পাতিত জল দিয়ে চিহ্নটি তৈরি করুন। বায়োসফটি নিয়ম মেনে চলুন, কারণ এই প্রতিক্রিয়া বহির্মুখী (এটি তাপের আকারে শক্তি প্রকাশ করে)।

আপনি যদি অন্য পরিমাণে ফসফেট স্যালাইনের দ্রবণ প্রস্তুত করতে চান তবে নীচের সারণিতে পরামর্শ করতে পারেন:

উত্স: Vi ভাইরাল এবং মানব জিনোমিক্সের পরীক্ষাগার, ইউএএসএলপি স্কুল অফ মেডিসিন »

অ্যাপ্লিকেশন

এটি প্রাথমিকভাবে সেল জীববিজ্ঞান, ইমিউনোলজি, ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি, ব্যাকটিরিওলজি, ভাইরাসোলজি এবং গবেষণা পরীক্ষাগারে ব্যবহৃত হয়।

অপ্রত্যক্ষ প্রতিরোধক প্রযুক্তিতে ওয়াশিং সলিউশন হিসাবে সেন্ট্রিফিউগেশন (লোহিত রক্তকণিকা), কোষ মনোলোয়ার ওয়াশস, স্পেকট্রোস্কোপিক উপবৃত্তাকার কৌশলগুলিতে, ভাইরাসগুলির জন্য কোষের সংস্কৃতি রক্ষণাবেক্ষণে, কোষের এককোষী উপবৃত্তাকার পদ্ধতিতে কোষ ধোয়ার জন্য এটি আদর্শ এবং একরঙা অ্যান্টিবডিগুলির বৈশিষ্ট্য নির্ধারণের কৌশলগুলি।

এটি কোষ বা টিস্যু পরিবহনে, কোষ গণনা করার জন্য হ্রাসকারী হিসাবে, সেলুলার এনজাইমগুলি (ট্রাইপসিন) প্রস্তুত করার জন্য, বায়োমোলিকুল বিশোধন পদ্ধতির এক মিশ্রণ হিসাবে এবং অন্যান্য রিএজেন্টস প্রস্তুত করতে ব্যবহৃত হয়।

অন্যদিকে, মার্টিন এট আল 2006 সালে প্রমাণ করেছেন যে পিবিএস ফরেনসিক বিজ্ঞান গবেষণাগারে বিশেষত যোনি ঘূর্ণন থেকে শুক্রাণু পুনরুদ্ধারে, বা পেনাইল স্মিয়ার থেকে যোনি কোষগুলির পুনরুদ্ধারে কার্যকর। কোনও যৌন সম্পর্ক থাকলে এইভাবে এটি প্রতিষ্ঠিত হতে পারে।

সীমাবদ্ধতা

- কিছু পিবিএস বাফারগুলিতে প্রিজারভেটিভ হিসাবে সোডিয়াম অ্যাজাইড নামে একটি পদার্থ থাকে। এই যৌগটি সীসা বা তামার সংস্পর্শে এলে বিস্ফোরক পদার্থ তৈরি করতে পারে। এই কারণে, ড্রেনের নীচে এই রিজেন্টটি নিষ্পত্তি করার সময় অবশ্যই বিশেষ যত্ন নেওয়া উচিত। যদি এটি এভাবে ফেলে দেওয়া হয় তবে এটি যথাসম্ভব পাতলা করার জন্য প্রচুর পরিমাণে জল যোগ করতে হবে।

-ফসফেট বাফারে জিংক যুক্ত করা উচিত নয়, যেহেতু এটি কিছু লবণের কারণ হয় ip

-বাংজেন এবং সহযোগীরা 2018 সালে নির্ধারণ করেছেন যে পিবিএসের ব্যবহার পেরিফেরিয়াল রক্ত ​​থেকে নিষ্কাশিত তীব্র মাইলয়েড লিউকেমিয়া (এএমএল) এর প্রাথমিক কোষগুলি ধুয়ে ফেলার পক্ষে উপযুক্ত নয়, কারণ অনেকগুলি কোষ লিসিসের দ্বারা হারিয়ে যায়, ফলে উপাদানগুলিতে দুর্দান্ত হ্রাস ঘটে due প্রোটিন।

অতএব, তারা নির্ধারণ করেছেন যে তরল নাইট্রোজেন সংরক্ষণের পরে প্রাথমিক এএমএল কোষগুলি পিবিএস দিয়ে ধুয়ে নেওয়া উচিত নয়।

তথ্যসূত্র

1. কোল জে (1993)। ভাইরোলজিতে ডায়াগনস্টিক কৌশল। এড ডাজ ডি সান্টোস। 360 পিজি
2. রদ্রিগেজ এম, অর্টিজ টি। সেল সংস্কৃতি। মাঝারি পরিবর্তন। সিভিলের সাধারণ ও প্যাথলজিকাল সাইটোলজি এবং হিস্টোলজি বিভাগ বিভাগ। ব্যক্তিগত.us.es এ উপলব্ধ
3. ফসফেট বাফার্ড স্যালাইন (পিবিএস) প্রস্তুত করা হচ্ছে। (2008)। স্ট্যান্ডার্ড অপারেটিং পদ্ধতি (এসওপি) মানব ও ভাইরাল জিনোমিক্স ল্যাবরেটরি ইউএএসএলপি স্কুল অফ মেডিসিন। উপলভ্য: জেনোমিকা.ইয়াসলপ.এমএক্স
4. "ফসফেট বাফার স্যালাইন।" উইকিপিডিয়া, মুক্ত বিশ্বকোষ থেকে. 3 এপ্রিল 2019, 19:36 ইউটিসি। 13 এপ্রিল 2019, 02:57 এন.ইউইকিপিডিয়া.রোগ।
5. পিত্রাসন্ত এল, ভন-বিল্ডারলিং সি। আণবিক বায়োফিজিকের বিষয়গুলি। এখানে উপলব্ধ: users.df.uba.ar
6. Rediar। ম্যানুয়াল। পিবিএস + ইডিটিএ। Felsan.com.ar এ উপলব্ধ
7. মার্টিন এনসি, পিরি এএ, ফোর্ড এলভি, কলাহান সিএল, ম্যাকটর্ক কে, লুসি ডি, স্ক্রিমগার ডিজি। ফসফেটের সাহায্যে সোয়াব থেকে কোষ এবং স্পার্মটোজোয়া পুনরুদ্ধারের জন্য স্যালাইন বাফার স্যালাইন দেওয়া হয়। বিজ্ঞানী বিচারপতি। 2006; 46 (3): 179-84। উপলভ্য: ncbi.nlm.nih.gov
8. ওয়াংগেন আর, আ্যাসেবি ই, ট্রেন্টানী এ, ইত্যাদি। সংরক্ষণের পদ্ধতি এবং ফসফেট বাফারযুক্ত স্যালাইন ওয়াশিং তীব্র মাইলয়েড লিউকেমিয়া প্রোটোমকে প্রভাবিত করে। ইন্ট জে মল সায়। 2018; 19 (1): 296। উপলভ্য: ncbi.nlm.nih.gov
9. মার্টিনিজ আর, গ্রেজেরা আর। (২০০৮) হিস্টোকেমিস্ট্রি তাত্ত্বিক এবং ব্যবহারিক ভিত্তি। সুপেরিয়র কাউন্সিল অফ সায়েন্টিফিক ইনভেস্টিগেশন। মাদ্রিদ। গ্রাহকরা.কম