ভোগস-প্রস্কোয়ার পরীক্ষা: ভিত্তি, প্রস্তুতি এবং ব্যবহার - জীববিদ্যা - 2025

ভোগস-Proskauer পরীক্ষা বায়োকেমিক্যাল Enterobacteriaceae পরিবার একাত্মতার ব্যাকটেরিয়া সনাক্তকরণ সাহায্য করার জন্য ব্যবহার করা পরীক্ষা। এটি অন্যের মধ্যে ক্ল্যাবিসিলা এবং এন্টারোব্যাক্টর থেকে এশেরিচিয়া কোলির স্ট্রেনগুলি পৃথক করার জন্য বিশেষভাবে কার্যকর।

টেস্টটি মিথাইল রেড - ভোগস প্রসকুয়ার নামে একটি তরল সংস্কৃতি মিডিয়ামে সঞ্চালিত হয়, এটি আরএম / ভিপি দ্বারা সংক্ষিপ্ত আকারে বেশি পরিচিত। এই মাধ্যমটি বাফারড পলিপ্পটোন, গ্লুকোজ, ডিপোটাসিয়াম ফসফেট এবং পাতিত জল দিয়ে তৈরি।

যথাক্রমে মিথাইল রেড-ভোগস প্রসকুয়ার (আরএম / ভিপি) বাণিজ্যিক মাধ্যম / ভিপি পরীক্ষা ইতিবাচক এবং নেতিবাচক। সূত্র: লেখক এমএসসি তোলা ছবি। মেরিলিসা গিল / সুদীপ্তা.নভ 15, উইকিমিডিয়া কমন্স থেকে

বর্তমান আরএম / ভিপি মাধ্যমটি ক্লার্ক এবং লুবসের মাধ্যমের একটি পরিবর্তন যা মূলত পেপটোন এবং গ্লুকোজের কম ঘনত্ব ধারণ করে। সুতরাং, ইতিবাচক ভোগস-প্রসকাউয়ার প্রতিক্রিয়ার জন্য প্রয়োজনীয় হাইড্রোজেন আয়ন কম উত্পাদিত হয়েছিল।

পরীক্ষাটি বুটিলিন-গ্লাইকোল রুট দিয়ে গ্লুকোজ ব্যবহারের অণুজীবের ক্ষমতার উপর ভিত্তি করে এবং অক্সিজেনের উপস্থিতিতে এবং একটি ক্ষারীয় পিএইচ-এর উপস্থিতিতে এসিটোইন নামক একটি নিরপেক্ষ চূড়ান্ত পণ্য গঠন করে।

আরএম / ভিপি মিডিয়ামে, ভোগস-প্রসকুয়ার পরীক্ষাটি প্রকাশ করতে সক্ষম হওয়া ছাড়াও মিথাইল রেড টেস্টটিও প্রকাশিত হতে পারে।

ভিত্তি

ভোগস-প্রসকুয়ার পরীক্ষার ভিত্তি

মাঝারি উপস্থিত প্লুরিপেটোনগুলি ব্যাকটিরিয়া বৃদ্ধির জন্য প্রয়োজনীয় পুষ্টির প্রয়োজনীয়তা সরবরাহ করে। এর অংশের জন্য, গ্লুকোজ প্রধান যৌগিক। অনেক ব্যাকটেরিয়া গ্লুকোজ বিপাকীয়করণ এবং পাইরুভিক অ্যাসিড গঠনের ক্ষমতা রাখে।

পাইরুভিক অ্যাসিড গ্লুকোজ বিপাকের একটি মিডপয়েন্ট এবং সেখান থেকে প্রতিটি অণুজীব বিভিন্ন পদক্ষেপ নিতে পারে। কিছু মিশ্র অ্যাসিড যেমন ল্যাকটিক অ্যাসিড, এসিটিক অ্যাসিড, ফর্মিক অ্যাসিড এবং সুসিনিক অ্যাসিড গঠন করবে এবং অন্যরা ২,৩-বুটেনিডিয়লের মতো নিরপেক্ষ পণ্য তৈরি করবে।

ভোগস-প্রসকুয়ার পরীক্ষা অ্যাসিডাইল মিথাইল কার্বিনল (অ্যাসিটন) গঠনের অণুজীবের ক্ষমতাকে প্রকাশ করে, বায়বীয় অবস্থার অধীনে ২,৩-বুটেনিডিয়লের অন্তর্বর্তী পণ্য।

অ্যাসেটিন হ্রাস পেয়েছে এবং ২,৩-বুটেনিডিয়ল গঠন করে, তবে এই প্রতিক্রিয়াটি বিপরীতমুখী হয়, সুতরাং ২,৩-বুটেনিডিয়ল যদি জারণ হয় তবে এসিটোইন তৈরি হয়। অতএব, অক্সিজেন অপরিহার্য।

ডিপোটাসিয়াম ফসফেট এমন বাফার যা পিএইচ 6.9 ± 0.2 এ মিশ্রণটি বাফার করে।

প্রমাণ প্রকাশ এবং ব্যাখ্যার ভিত্তি

প্রতিক্রিয়া প্রদর্শনের জন্য, দুটি রিএজেন্ট (ব্যারিট রিজেন্টস) ব্যবহার করে একটি বিকাশ করা উচিত, যা ভোগস এ এবং ভোগস বি নামে পরিচিত known

ভোজেস এ হ'ল α-নেফথলের 5% দ্রবণ এবং ভোগস বি একটি 40% পটাসিয়াম হাইড্রোক্সাইড প্রস্তুতি। যদি পটাসিয়াম হাইড্রোক্সাইড পাওয়া না যায় তবে এটি 40% সোডিয়াম হাইড্রক্সাইড দ্বারা প্রতিস্থাপিত হতে পারে।

Ap-নেফথল একটি অনুঘটক যা প্রতিক্রিয়ার রঙের তীব্রতা বাড়িয়ে তুলবে, যা পরীক্ষাটিকে আরও সংবেদনশীল করে তুলবে। Tube-নেফথলটি সর্বদা প্রথমে যোগ করতে হবে, টিউবটি কাঁপানো যাতে মাঝারিটি অক্সিজেনের সংস্পর্শে আসে। এইভাবে উপস্থিত এসিটোইন ডায়াসিটিলকে অক্সিজেনযুক্ত করা হয়, এবং ২,৩-বুটেনিডিয়ল অক্সিডাইজড হয়ে এসিটোইন তৈরি করে, এটি ডায়সাইটিলের কাছে চলে যায়।

এভাবেই α-নেফথল ডায়াসিটিলের সাথে আবদ্ধ হবে, যা ঘুরেফিরে অ্যামিনো অ্যাসিড আর্জিনিনে উপস্থিত গ্যানিডিন নিউক্লিয়াসে যোগ দিয়েছে, এটি পরবর্তীকালে প্লুরিপেটোনস থেকে আসে।

এর অংশের জন্য, পটাসিয়াম বা সোডিয়াম হাইড্রোক্সাইড সিও ₂ শোষণ এবং পেপটোনগুলির সাথে প্রতিক্রিয়া জানানোর জন্য দায়ী । এই প্রতিক্রিয়াটি সলমন-গোলাপী রঙের গঠনের কারণ ঘটায়, টিউবটি খুব ভালভাবে কাঁপানোর পরে স্পষ্টতই দৃশ্যমান।

তাত্ক্ষণিকভাবে রঙ আসতে রঙের জন্য ডায়সাইটিল, পেপটোন এবং n-নেফথলকে সঠিক পরিমাণে মিশ্রিত করতে হবে। যদি এটি না ঘটে, টিউবটি ব্যাখ্যা করার আগে 15 মিনিটের জন্য বিশ্রামের অনুমতি দেওয়া হয়।

পরীক্ষাটি 2 থেকে 5 মিনিটের পরে সাধারণত ইতিবাচক হয়, যখন একটি অজ্ঞান গোলাপী রঙ দেখা যায়। যদি 30 মিনিট থেকে 1 ঘন্টা দাঁড়িয়ে থাকে তবে রঙের তীব্রতা সর্বাধিক (তীব্র লাল) হবে।

যখন ঝোলটি হলুদ হয়ে যায় তখন একটি নেতিবাচক পরীক্ষা প্রদর্শিত হবে। 1 ঘন্টা পরে, যদি পরীক্ষাটি নেতিবাচক হয় তবে copper-নেফথল-এ পটাসিয়াম হাইড্রোক্সাইডের প্রতিক্রিয়ার ফলে একটি তামার রঙ তৈরি হতে পারে।

প্রস্তুতি

মাঝারি এমআর / ভিপি

পানিশূন্য সংস্কৃতি মাঝারি 17 গ্রাম ওজন এবং পাতিত জলের এক লিটার দ্রবীভূত। 5 মিনিট দাঁড়ানো। সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত করতে একটি ফোঁড়াতে গরম করুন। টিউবগুলিতে 3 থেকে 4 মিলি পরিবেশন করুন এবং 15 মিনিটের জন্য 121 ডিগ্রি সেলসিয়াসে অটোক্লেভে জীবাণুমুক্ত করুন।

ডিহাইড্রেটেড সংস্কৃতির মাঝারিটি বেইজ রঙের এবং প্রস্তুত মিডিয়াম হালকা অ্যাম্বার রঙের হয়।

মাধ্যমের চূড়ান্ত পিএইচ 6.9 ± 0.2 হয়।

Voges একটি রিএজেন্ট

G-নেফথল এর 5 গ্রাম ওজন এবং 50 মিলি ইথাইল অ্যালকোহল (পরম) মধ্যে দ্রবীভূত করুন। তারপরে এটি 100 মিলিলিটার না হওয়া পর্যন্ত ইথাইল অ্যালকোহল যোগ করা চালিয়ে যান।

ভোগস বি রিএজেন্ট

পটাসিয়াম হাইড্রোক্সাইডের 40 গ্রাম ওজন এবং একটি বিকারে 50 মিলি দ্রবীভূত জলে দ্রবীভূত করুন। তাপমাত্রা নিয়ন্ত্রণ করতে গ্লাসটি একটি ঠান্ডা জলের স্নানের মধ্যে রাখতে হবে, কারণ যখন প্রস্তুতিটি দ্রবীভূত হয় তখন তাপমাত্রা তীব্রভাবে বৃদ্ধি পায়।

সমাধানটি শীতল হওয়ার পরে এটি একটি ভলিউম্যাট্রিক ফ্লাস্কে স্থানান্তরিত হয় এবং পাতিত জল দিয়ে 100 মিলি পর্যন্ত তৈরি করা হয়।

ভোগস-প্রসকুয়ার পরীক্ষা পদ্ধতি

ভোগস-প্রসকোয়ার পরীক্ষাটি সম্পাদনের জন্য, একটি আরএম / ভিপি ব্রোথকে অধ্যয়নরত মাইক্রো অর্গানিজম দিয়ে ইনোকুলেট করা হয়, খাঁটি সংস্কৃতি থেকে 18 থেকে 24 ঘন্টা অবধি।

ইনোকুলাম খুব ঘন হওয়া উচিত নয়। এটি 24 থেকে 48 ঘন্টার জন্য 35-37 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় সঞ্চারিত হয়, যদিও বেশিরভাগ দিনের জন্য জ্বালানী কখনও কখনও প্রয়োজনীয় হয়। কোয়ান ও স্টিলের অভিমত, এন্টারোব্যাকটেরিয়া পরিবারের সমস্ত ধনাত্মক ভোগস-প্রসকুয়ার (ভিপি) প্রজাতি সনাক্ত করতে নূন্যতম ইনকিউবেশন সময় প্রয়োজন 5 দিন।

পরীক্ষার বিকাশ

একটি 1 টি এমএল অ্যালিকোটটি একটি টিউবটিতে পৃথক করুন এবং নিম্নরূপে বিকাশ করুন: ভোজস এ-র রিজেন্টের 12 টি ড্রপ (0.6 এমএল) এবং ভোজেস বি এর 4 টি ড্রপ (0.2 এমএল) রাখুনে মিশ্রিত করুন এবং স্থির হওয়ার অনুমতি দিন ব্যাখ্যার আগে 5 - 10 মিনিটের জন্য। যাইহোক, যদি পরীক্ষাটি এখনও নেতিবাচক হয় তবে এটি 30 মিনিট থেকে 1 ঘন্টা পরে টিউবটি বসাতে এবং পর্যবেক্ষণ করতে দিন।

গোলাপী-লাল বর্ণের উপস্থিতি ইঙ্গিত দেয় যে ভোগস-প্রসকুয়ার প্রতিক্রিয়া ইতিবাচক। মাঝারিটি হলুদ থাকলে প্রতিক্রিয়া নেতিবাচক হয়।

ক্রম এবং নির্দেশিত পরিমাণে বিকাশকারীদের যুক্ত করা মিথ্যা নেতিবাচকতা এড়াতে প্রয়োজনীয়।

ব্যবহার

ভিজেস-প্রসকুয়ার পরীক্ষাটি ভি কলসিবিলা, এন্টারোব্যাক্টর, সেরটিটিয়া, জেনারেল ক্লিবিসিলা, এন্টারোব্যাক্টর, সেরটিটিয়া এবং অন্যদের মধ্যে, ভিপি পজিটিভ হ'ল ইপি কোলির স্ট্রেনগুলির মধ্যে পার্থক্য করতে দরকারী is

উত্স: কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 5 তম সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।

QA তে

নিয়ন্ত্রণ মাধ্যম প্রস্তুত মাধ্যমের মানের পরীক্ষা করতে ব্যবহার করা যেতে পারে, যার মধ্যে রয়েছে ইসেরিচিয়া কোলি এটিসিসি 25922, ক্লিবিসিলা নিউমোনিয়া এটিসিসি 700603, প্রোটিয়াস মিরাবিলিস এটিসিসি 43071, সালমোনেলা টাইফিমুরিয়াম এবং এন্টারোব্যাক্টর ক্লোসকে এটিসিসি 13047।

প্রত্যাশিত ফলাফলগুলি কেবল কে নিউমোনিয়া এবং ই ক্লোসায়ের জন্য ইতিবাচক ভোগস-প্রসকুয়ার প্রতিক্রিয়া। বাকিরা নেতিবাচক প্রতিক্রিয়া দেয়।

তথ্যসূত্র

1. ব্রিটানিয়া ল্যাবরেটরিজ। এমআর-ভিপি মিডিয়াম। 2015. উপলভ্য: www.britanialab.com
2. মাইক্রোকিট ল্যাবরেটরিজ। এম-আইডেন্ট ভোগস প্রোস্কুয়ার। 2014. উপলভ্য:
3. ম্যাক ফাদ্দিন জে। (2003)। ক্লিনিকাল গুরুত্বের ব্যাকটেরিয়া সনাক্তকরণের জন্য জৈব রাসায়নিক পরীক্ষা। তৃতীয় সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা। বুয়েনস আইরেস আর্জেন্টিনা।
4. ফোর্বস বি, সাহম ডি, ওয়েসফেল্ড এ (২০০৯)। বেইলি এবং স্কট মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 12 এড। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
5. কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 5 তম সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।