ইস BROTH: ভিত্তি, প্রস্তুতি এবং ব্যবহার - জীববিদ্যা - 2025

ইসি ঝোল বা ঝোল Escherichia কোলাই নির্বাচনী তরল সংস্কৃতি মাধ্যম। জল এবং খাবারের নমুনাগুলিতে সর্বাধিক সম্ভাব্য সংখ্যা কৌশল (এমপিএন) দ্বারা গণনা করার জন্য মোট এবং মলদ্বার কলিফর্মগুলি গণনা করার জন্য এই মাধ্যমটি সুপারিশ করা হয়, যেখানে জড়িত প্রধান এজেন্ট ইসেরিচিয়া কোলি।

ইসি ব্রোথ ট্রিপটিন, ল্যাকটোজ, পিত্ত সল্ট, ডিপোটাসিয়াম ফসফেট, মনোপোটাসিয়াম ফসফেট, সোডিয়াম ক্লোরাইড এবং জল দিয়ে তৈরি। এর সূত্রটি কৌশলগতভাবে মোট এবং মল কলিফর্মগুলির বর্ধনের পক্ষে এবং সাথে সংযুক্ত অন্যান্য অণুজীবের বিকাশের জন্য ডিজাইন করা হয়েছে।

ইসি ঝোল প্রস্তুতির রূপক উপস্থাপনা। সূত্র: পিক্সাবে ডটকম

জল এবং খাদ্যের উত্সগুলিতে দূষক হিসাবে উপস্থিত প্রধান ফেচাল কোলিফর্ম হ'ল এসেরচিয়া কোলি ব্যাকটিরিয়াম, গুরুত্বপূর্ণ গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল ব্যাধিগুলির কারণ।

এটি লক্ষ করা উচিত যে Escherchia কলির অনেকগুলি সেরোটাইপ রয়েছে; এর মধ্যে আমরা এন্টারোহেমোরহ্যাগিক (ইএইইসিইসি), এন্টারইনোভ্যাসিভ (ইআইইসি), এন্টিওপ্যাথোজেনিক (ইপিইসি), এন্টারোটোক্সিজেনিক (ইটিইসি) এবং এন্টারোএগ্রগ্রিটিভ (ইএইসি) উল্লেখ করতে পারি।

এই মাধ্যমের তাদের সকলের বিকাশের অনুমতি দেওয়ার ক্ষমতা রয়েছে তবে তাদের মধ্যে পার্থক্য করতে সক্ষম না হয়ে। এটির জন্য অতিরিক্ত পরীক্ষার প্রয়োজন।

মোট এবং মল কলিফর্মগুলি অনুসন্ধান করার জন্য সর্বাধিক সম্ভাব্য সংখ্যার (এমপিএন) দ্বারা জল এবং খাদ্য সম্পর্কিত অণুজীববিজ্ঞান অধ্যয়ন হ'ল একটি প্রোটোকল যা বিভিন্ন পর্যায় নিয়ে গঠিত; অনুমানমূলক পর্যায়, নিশ্চিতকরণের পর্ব এবং সমাপ্তির পর্ব। ইসি ব্রোথ নিশ্চিতকরণ পর্যায়ে ব্যবহৃত হয়।

ভিত্তি

ইসি ঝোল

ইসি মাধ্যমটি মোট এবং ফেচাল কলিফর্মগুলির অনুকূল বিকাশের জন্য প্রয়োজনীয় পুষ্টিকর উপাদান সরবরাহের উপর ভিত্তি করে, যেখানে এসচেরিচিয়া কোলি ব্যাকটিরিয়া অন্তর্ভুক্ত।

এই পুষ্টির উপাদানগুলি ট্রিপটিন দ্বারা সরবরাহ করা হয়, যা পেপটাইড এবং অ্যামিনো অ্যাসিডের উত্স source এছাড়াও, এতে ল্যাকটোজও রয়েছে, একটি ফার্মেন্টেবল কার্বোহাইড্রেট যা শক্তি সরবরাহ করে এবং ব্যাকটেরিয়াগুলি গ্যাস উত্পাদন করে কিনা তা দেখাতে দেয়।

অন্যদিকে, মাঝারিটিতে পিত্ত সল্ট রয়েছে যা নির্বাচক চরিত্র সরবরাহ করে, যেহেতু এটি গ্রাম পজিটিভ অণুজীবের বর্ধনকে বাধা দেয় যা নমুনায় উপস্থিত থাকতে পারে।

তেমনি, ডিপোটাসিয়াম ফসফেট এবং মনোপোটাসিয়াম ফসফেট পিএইচ ব্যালেন্সিং সিস্টেম হিসাবে কাজ করে। এই সিস্টেমটি প্রয়োজনীয়, কারণ ব্রোথের মধ্যে থাকা ল্যাকটোজগুলি যখন অণুজীবের দ্বারা উত্তেজিত হয় তখন মাঝারিটি অ্যাসিডে পরিণত হয়, তবে এটি ফসফেট লবণ দ্বারা ক্ষতিপূরণ হয়।

অতএব, এই উপাদানগুলি অপরিহার্য, যেহেতু অনিয়ন্ত্রিত অম্লতা চাওয়া অণুজীবের সঠিক বিকাশকে প্রভাবিত করতে পারে can

তার অংশ হিসাবে, সোডিয়াম ক্লোরাইড মাঝারিটি স্থূলভাবে স্থিতিশীল করে, যখন জল উপস্থিত দ্রবণগুলির জন্য দ্রাবক হয় এবং মাঝারিটির জন্য তরল ধারাবাহিকতা সরবরাহ করে।

নভোবায়সিন পরিবর্তিত ইসি ব্রোথ

ওক্রেনড এবং রোজ নোভোবায়সিন পরিবর্তিত ইসি ব্রোথ নামে বিভিন্ন ইসি ব্রোথ তৈরি করেছিলেন। এই পরিবর্তনটিতে পিত্তের লবণের ঘনত্বকে হ্রাস করা এবং 20 মিলিগ্রাম / ডিএল নভোবায়সিন যুক্ত করা অন্তর্ভুক্ত।

এই পরিবর্তনটি এন্টারোহেমোরহাজিক ইসেরিচিয়া কোলি স্ট্রেনগুলির পুনরুদ্ধারের পক্ষে (O157: H7)।

এই ব্যাকটিরিয়া সেরোটাইপ মারাত্মক হেমোরজিক কোলাইটিসের কারণ হয় যা হেমোলিটিক ইউরেমিক সিনড্রোম (এইচএস) হতে পারে; যা পরিবর্তে তীব্র রেনাল ব্যর্থতা তৈরি করতে পারে, উচ্চ মৃত্যুর হার সহ যা বয়স্কদের মধ্যে 50% অবধি পৌঁছে যেতে পারে।

দূষিত খাবার গ্রহণের কারণে এই জীবাণু দ্বারা সৃষ্ট বার্ষিক অসুস্থতা এবং মৃত্যুর কারণে, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রের কৃষি বিভাগ (ইউএসডিএ) এই মাধ্যমটি ব্যবহারের জন্য অত্যন্ত পরামর্শ দেয়।

প্রস্তুতি

ইসি ঝোল

ডিহাইড্রেটেড মাঝারিটির 37.4 গ্রাম ওজন এবং 1 লিটার পাতিত পানিতে দ্রবীভূত করুন। মিশ্রণটি 5 মিনিটের জন্য দাঁড়াতে দেওয়া উচিত। পরবর্তীকালে, একটি তাপ উত্সে, এটি ঘন ঘন আলোড়ন দিয়ে দ্রবীভূত করা শেষ হয়।

একবার দ্রবীভূত হয়ে গেলে, এটি ভিতরে ডারহাম নল দিয়ে পূর্বশর্তীকৃত টেস্ট টিউবে বিতরণ করা হয়। 15 মিনিটের জন্য 121 ডিগ্রি সেলসিয়াসে অটোক্লেভে জীবাণুমুক্ত।

মাধ্যমের পিএইচ 6.9 ± 0.2 হতে হবে। ডিহাইড্রেটেড মিডিয়ামের রঙ বেইজ এবং প্রস্তুত মিডিয়াম হালকা অ্যাম্বার।

ব্রোথগুলি ব্যবহার না করা পর্যন্ত ফ্রিজে রাখা হয়। ব্যবহারের সময়, ঝোলগুলি অবশ্যই তাপমাত্রায় থাকতে হবে।

অন্যদিকে, ইসি ঝোলও ডাবল ঘনত্বের সাথে প্রস্তুত করা যেতে পারে।

নভোবায়সিন পরিবর্তিত ইসি ব্রোথ

ডিহাইড্রেটেড মিডিয়ামের ওজন 36.7 গ্রাম এবং 1 লিটার পানিতে দ্রবীভূত করুন। বাকি প্রস্তুতিটি উপরে বর্ণিত হিসাবে একই।

ব্যবহার

মোট এবং মল কলিফর্ম বিশ্লেষণ

জলের নমুনা, পাশাপাশি ফার্মাসিউটিক্যাল পণ্য এবং খাবার উভয় ক্ষেত্রে, এনএমপি পদ্ধতি দ্বারা কলিফর্মগুলির অধ্যয়নের নিশ্চিতকরণের পর্যায়ে ইসি ব্রোথ আদর্শ।

অনুমানমূলক পর্যায়ে প্রাপ্ত টার্বিড, গ্যাস উত্পাদনকারী ল্যাকটোজ ব্রোথগুলি 2% পিত্ত উজ্জ্বল সবুজ ব্রোথ এবং ইসি ঝোলগুলিতে পুনরায় করা উচিত।

মোট কলিফর্মগুলির জন্য, ইসি ব্রোথগুলি বায়বীয়ভাবে 24 থেকে 48 ঘন্টা 37 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় সঞ্চিত হয় এবং মলিক কলিফর্মগুলির জন্য তারা 44 ° সেন্টিগ্রেডে 24 থেকে 48 ঘন্টা বায়বীয়ভাবে উদ্দীপ্ত হয় are

উভয় ক্ষেত্রে এটি নিম্নলিখিত হিসাবে ব্যাখ্যা করা হয়: গ্যাস উত্পাদন সহ টার্বিড টিউবগুলি ইতিবাচক হিসাবে বিবেচনা করা হয়। 24 ঘন্টা যদি গ্যাসের উত্পাদন না হয় তবে ইনকিউবেশন 48 ঘন্টা অবধি অব্যাহত থাকে।

ইসি পজিটিভ ব্রোথগুলি সম্পূর্ণ নিশ্চিতকরণের পর্যায়ে চলে যায়, যা ম্যাক কনকি আগর, ইএমবি আগার বা এন্ডো আগরের মতো নির্বাচনী মিডিয়াতে গবেষণা করে।

যদি ব্যবহার করা ঝোল নভোবায়সিন-সংশোধিত ইসি হয় তবে সারণিযুক্ত টিউবগুলি মর কনকি আগরকে সর্বিটল সহ পুনরায় নির্ধারণ করার পরামর্শ দেওয়া হয়।

QA তে

প্রস্তুত মিডিয়াম প্রতিটি ব্যাচ মান নিয়ন্ত্রণ করা আবশ্যক। প্রথমত, মাধ্যমের স্টেরিলিটি মূল্যায়ন করতে হবে। এই অর্থে, এক বা দুটি ব্রোথ 37 ঘন্টা ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে 24 ঘন্টা অ্যারোবায়োসিসে ইনোকুলেশন ছাড়াই জ্বালান are প্রত্যাশিত ফলাফলটি স্বচ্ছ ঝোল, অশান্তি বা রঙ পরিবর্তন ছাড়াই।

দ্বিতীয়ত, জ্ঞাত স্ট্রেনগুলির বৃদ্ধি অবশ্যই মূল্যায়ন করা উচিত, এর জন্য নিম্নলিখিত ব্যাকটিরিয়া ব্যবহার করা যেতে পারে: ইসেরিচিয়া কোলি, এটিসিসি 8739, এসচেরিচিয়া কোলি এটিসিসি 25922, সালমোনেলা টাইফিমিউরিয়াম এটিসিসি 14028।

সব ক্ষেত্রেই সন্তোষজনক মাইক্রোবিয়াল বিকাশ প্রত্যাশিত, একটি মেঘলা ব্রোথ পর্যবেক্ষণ করে ই কোলির জন্য গ্যাস উত্পাদন এবং সালমোনেলার ​​কোনও গ্যাস নেই।

নিয়ন্ত্রণে অন্তর্ভুক্ত করা যেতে পারে এমন অন্যান্য স্ট্রেনগুলি হলেন: স্ট্যাফিলোকক্কাস অরিয়াস এটিসিসি 25923, এন্টারোকোকাস ফ্যাকালিস এটিসিসি 29212 These এই স্ট্রেনগুলি অবশ্যই সম্পূর্ণভাবে বাধা দেওয়া উচিত।

সুপারিশ

-কুরিফর্মগুলির অধ্যয়নের জন্য ডরহম টিউব স্থাপন করা প্রয়োজনীয়।

- জীবাণুমুক্ত করার আগে টেস্ট টিউবগুলিতে মাঝারিটি বিতরণ করুন, কখনই নয়।

-মাধ্যমটি 3 মাসের বেশি পুরানো হলে ব্যবহার করবেন না।

-মাধ্যমের স্বাভাবিক বৈশিষ্ট্যগুলিতে কোনও পরিবর্তন লক্ষ করা গেলে ব্যবহার করবেন না।

তথ্যসূত্র

1. ব্রিটানিয়া ল্যাবরেটরিজ। ইসি মিডিয়াম। 2015. উপলভ্য: ব্রিটিয়ানাল্যাব.কম
2. এন্টারোহেমোরহ্যাগিক ই কোলি। খাদ্য সুরক্ষা এবং জনস্বাস্থ্যের কেন্দ্র। 2010. উপলভ্য: cfsph.iastate.edu
3. নিওজন কর্পোরেশন ইসি মাধ্যম। এখানে পাওয়া যায়: Foodafety.neogen.com
4. Neogen। নভোবায়সিন ইসি মাধ্যম পরিবর্তিত। এখানে পাওয়া যায়: Foodafety.neogen.com
5. জুরে এম, কন্ডোরি এস, লিওটা জি, চিনেন আই, মিলিওবস্কি ই, অ্যালোরি সি, অলেট ও, ডি কাস্টিলো এম। সনাক্তকরণ, বিচ্ছিন্নতা এবং এশিরিচিয়া কোলি প্রজাতন্ত্রের কনসেপিশনে কসাইয়ের মাংস থেকে টাটকা মাংস থেকে শিগা বিষ উত্পাদনকারী বিচ্ছিন্নতা এবং বৈশিষ্ট্য টুকুমান থেকে মাইক্রোবায়ল রেভ আরগ; 2010, 42 (4): 284-287। Www.scielo.org এ উপলব্ধ।