ম্যালোনেট ব্রোথ: ভিত্তি, প্রস্তুতি এবং ব্যবহার - জীববিদ্যা - 2025

Malonate ঝোল তরল সংস্কৃতি ডায়গনিস্টিক পরীক্ষা (malonate) জন্য ব্যবহার করা মাঝারি, পরিবার Enterobacteriaceae কিছু গণের পার্থক্য ব্যবহার করা হয়। এটি লিফসন ১৯৩৩ সালে তৈরি করেছিলেন এবং পরে এউইং দ্বারা সংশোধন করেছিলেন, যিনি মূল সূত্রে অল্প পরিমাণে ডেক্সট্রোজ এবং ইস্ট এক্সট্রাক্ট যুক্ত করেছিলেন।

মিডিয়ামটি বর্তমানে ইস্ট এক্সট্রাক্ট, অ্যামোনিয়াম সালফেট, ডিপোটাসিয়াম ফসফেট, মনোপোটাসিয়াম ফসফেট, সোডিয়াম ক্লোরাইড, সোডিয়াম ম্যালোনেট, ডেক্সট্রোজ এবং ব্রোমোথিয়ামল নীল দ্বারা গঠিত। এই পরীক্ষাটি সাধারণত জেনারো এবং প্রজাতির পার্থক্য করতে সহায়তা করে এন্টারোব্যাক্টেরিয়াসিটির জৈব-রাসায়নিক পরিচয় ব্যাটারির অন্তর্ভুক্ত থাকে।

ম্যালোনেট পরীক্ষার গ্রাফিক উপস্থাপনা। উ: নেতিবাচক পরীক্ষা, বি (অ্যাসিডিফিকেশন) নেতিবাচক পরীক্ষা, সি। (মাঝারি ক্ষারক) ইতিবাচক পরীক্ষা উত্স: রঙিন টিউব পাবলিকডোমেনপিক্টরনেট.নেট

ম্যালোনেট পরীক্ষাটি মূলত কিছু অণুজীবের ক্ষতিকারক সোডিয়াম ম্যালোনেটকে তাদের একমাত্র কার্বন উত্স এবং অ্যামোনিয়াম সালফেটকে নাইট্রোজেন উত্স হিসাবে ব্যবহার করার দক্ষতার উপর ভিত্তি করে তৈরি হয়।

ম্যালোনেট পরীক্ষাটি এন্টারোব্যাক্টর, ক্লিবিসিলা এবং সিট্রোব্যাক্টর জেনারার কয়েকটি প্রজাতির ক্ষেত্রে সাধারণত ইতিবাচক হয়। অন্যদিকে, জেনার বেশিরভাগ প্রজাতির ইসেরিচিয়া, সালমোনেলা, শিগেলা, এডওয়ার্ডসিয়েলা, ইয়েরসিনিয়া, সের্তিয়া, মরগেনেলা, প্রোটিয়াস এবং প্রোভিডেনসিয়া, নেতিবাচক প্রতিক্রিয়া দেয়।

ভিত্তি

ম্যালোনেট পরীক্ষায় সেই ব্যাকটিরিয়াগুলি দেখা যায় যা সোডিয়াম ম্যালোনেটকে একমাত্র কার্বন উত্স হিসাবে এবং অ্যামোনিয়াম সালফেট নাইট্রোজেন উত্স হিসাবে ব্যবহার করতে সক্ষম।

ডেকট্রোজ এবং ইস্ট এক্সট্রাক্টকে পুষ্টি হিসাবে গ্রহণ করে বেশিরভাগ এন্টারোব্যাক্টেরিয়াসি যা ম্যালোনেট ব্যবহার করেন না তারা এই মাধ্যমটিতে বেড়ে উঠতে সক্ষম।

এই ক্ষেত্রে, পেপটোনগুলি ব্যবহার করে ক্ষারীয় হওয়ার যে কোনও প্রয়াস ডেক্সট্রোজের fermentation দ্বারা উত্পাদিত অ্যাসিডগুলির উত্পাদনের দ্বারা প্রতিহত করা হবে। তেমনি, ডিপোটাসিয়াম এবং মনোপোটাসিয়াম ফসফেটগুলি বাফার হিসাবে কাজ করে, পিএইচটি 6.7 বজায় রাখে।

এ কারণেই, পরীক্ষাটি নেতিবাচক হলে, ঝোল একই মূল রঙ (সবুজ) থেকে যায়। বিরল ঘটনাগুলিতে ডেক্সট্রোজের fermentation এর কারণে মাঝারিটি অম্লীয় হয়ে উঠতে পারে; পেপটোন এবং পিএইচ সূচক ব্যবহার ছাড়াই এটি মাঝারিটির রং হলুদ হয়ে যাবে। এটি হওয়ার জন্য, পিএইচ 6 এ নেমে যেতে হবে।

তবে, যখন এই পরীক্ষাটি ইতিবাচক হয়, তখন বলা হয় যে অণুজীবগুলি অন্যান্য উপাদানগুলির ব্যবহার না করে যথাক্রমে ম্যালোনেট এবং অ্যামোনিয়াম সালফেটকে কার্বন এবং নাইট্রোজেন উত্স হিসাবে ব্যবহার করে।

এই ক্ষেত্রে, সোডিয়াম প্রকাশ এবং NaOH এর ফলে গঠনের ফলে মাঝারিটি ক্ষারীয় হয়ে যায়। এই অর্থে, পিএইচ সূচক (ব্রোমোথিয়ামল নীল) পিএইচ এর সমান বা.6..6 এর চেয়ে বেশি হলে মাঝারি রঙকে সবুজ থেকে নীল করে তোলে। নীল হালকা বা তীব্র হতে পারে (প্রুশিয়ান নীল)।

অবশেষে, সোডিয়াম ক্লোরাইড মাঝারিটির অসম্পূর্ণতা বজায় রাখে এবং জল হ'ল সমস্ত উপাদানগুলির মিশ্রণ।

ব্যাখ্যা

একই রঙের ঝোল (সবুজ) - নেতিবাচক পরীক্ষা

হলুদ ঝোল: নেতিবাচক পরীক্ষা

হালকা বা গভীর নীল ঝোল: পরীক্ষা ইতিবাচক

ফেনিল্লানাইন ম্যালোনেট ব্রোথ নামে একটি বৈকল্পিক রয়েছে, তাকে শ এবং ক্লার্কের মাধ্যমও বলা হয়। এই ক্ষেত্রে, দুটি পরীক্ষা বিশ্লেষণ করা যেতে পারে, কার্বন উত্স হিসাবে ম্যালোনেট ব্যবহার এবং ফেনিল্লানাইন থেকে পাইরুভিক অ্যাসিড উত্পাদন।

প্রস্তুতি

ম্যালোনেট ব্রোথ

নির্বাচিত বাণিজ্যিক সংস্থার সন্নিবেশ দ্বারা নির্দিষ্ট করা গ্রামগুলির ওজন করা হয় (এটি একের থেকে আলাদা হতে পারে)। ওজনযুক্ত গ্রাম এক লিটার পাতিত পানিতে স্থগিত করা হয়। সম্পূর্ণ দ্রবীভূত হওয়া পর্যন্ত সামান্য তাপ। সুতির ক্যাপ সহ 13/100 টেস্ট টিউবগুলিতে মাঝারি 3 মিলি বিতরণ করুন।

15 থেকে 20 মিনিটের জন্য 121 ° C এ অটোক্লেভে জীবাণুমুক্ত।

ব্যবহারের আগে শীতল। যদি তারা তাত্ক্ষণিকভাবে ব্যবহার না করে, ব্যবহার না করা পর্যন্ত ফ্রিজে রেখে দিন। ইনোকুলেট করার আগে ঘরের তাপমাত্রায় ব্রোথগুলি আনুন।

মাধ্যমের পিএইচ 6.7 ± 0.2 হতে হবে। প্রস্তুত মাধ্যমের রঙ বোতল সবুজ।

ফেনিল্লানাইন ম্যালোনেট ব্রোথ

ডিহাইড্রেটেড মিডিয়ামের 11 গ্রাম ওজন এবং 1 লিটার পাতিত পানিতে দ্রবীভূত করুন। বাকি প্রস্তুতিটি পূর্ব বর্ণিত হিসাবে একই রকম।

এটি জীবাণুমুক্ত হওয়ার আগে ম্যালোনেট ব্রোথ মিডিয়ামে 2 গ্রাম / এল ফেনিল্লানাইন যুক্ত করে প্রস্তুত করা যেতে পারে।

ব্যবহার

এটি জৈব-রাসায়নিক পরীক্ষার ব্যাটারির অংশ হিসাবে ব্যবহৃত হয় যা এন্টারোব্যাকটিরিসি পরিবারের ব্যাকটেরিয়া সনাক্তকরণের জন্য একত্রিত হয়।

এর মধ্যে পার্থক্য করতে সহায়তা করে:

-এসেরিচিয়া এবং সেরারটিয়া (-) বংশের ক্ল্যাবিসিলা এবং এন্টারোব্যাক্টর (+) জেনাস।

-সালমনোলা এন্টারিকা এসরিপ আরিজোনা, প্রজাতি সালমোনেলা এন্টারিকা এসএসপি সালমে এবং সালমোনেলা এন্টারিকা এসএসপি ডায়ারিজনা (+), সালমনেলা এন্টারিকা এসএসপি এন্টারিকা (-) প্রজাতির মধ্যে রয়েছে।

- অ্যাক্টিনোব্যাকিলাস (-) জেনাস থেকে ক্লিবিসিলা জেনাস থেকে সাধারণত (+) পাওয়া যায়।

-সতর্কত এটি জেনেরা এবং এন্টারোব্যাকটেরিয়া পরিবারে অন্তর্ভুক্ত জীবাণুগুলির প্রজাতিগুলির পার্থক্যকে সহায়তা করতে পারে, যেমন নন-ফার্মেন্টিং গ্রাম নেগেটিভ ব্যাসিলি অ্যালকালিজেনস ফেকালিস (+) এবং অ্যাকিনেটোব্যাক্টর এসপি (-) এর মধ্যে।

উত্স: কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 5 তম সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।

প্রক্রিয়া

লাইটারের নিচে, খাঁটি কলোনির একটি অংশ সঠিকভাবে জীবাণুমুক্ত এবং কুলড প্লাটিনাম হ্যান্ডেল ব্যবহার করে নেওয়া হয়। নেওয়া নমুনা (হালকা ইনোকুলাম) ম্যালোনেট ব্রোথে দ্রবীভূত হয়। 24 থেকে 48 ঘন্টার জন্য 35 ° C ± 0.2 এয়ারোবায়োসিসে looseাকনাটি looseাকনা দিয়ে জ্বালান।

ট্রোনস্টিক্যাস সয়া ব্রোথে 18-24 ঘন্টা সংস্কৃতি থেকে ম্যালোনেট ব্রোথও ইনোকুলেশন করা যায়। এই ক্ষেত্রে, 0.01 মিলি একটি জীবাণুমুক্ত পিপেট সহ নেওয়া হয় এবং ম্যালোনেট ঝোলটি ইনোকুলেটেড হয়। 24 থেকে 48 ঘন্টার জন্য 35 ° C ± 0.2 এয়ারোবায়োসিসে looseাকনাটি looseাকনা দিয়ে জ্বালান।

সময় শেষে, ফলাফলগুলি ব্যাখ্যা করা হয়। ইনকিউবেশন এর 48 ঘন্টা পরে নীল রঙের যে কোনও ট্রেসকে ইতিবাচক হিসাবে বিবেচনা করা উচিত। 48 ঘন্টা ইনকিউবেশন সময়টি অতিক্রান্ত না হওয়া পর্যন্ত পরীক্ষাটি নেতিবাচক হিসাবে ব্যাখ্যা করা উচিত নয়।

ফেনিল্লানাইন ম্যালোনেট ব্রোথ বৈকল্পের ব্যবহারের ক্ষেত্রে ম্যালোনেটটি প্রথমে ব্যাখ্যা করা হয় এবং তারপরে 1N এইচসিএল এর 5 টি ড্রপ এবং 8% ফেরিক ক্লোরাইডের 3-5 ফোঁটা যুক্ত করা হয়। একটি গা green় সবুজ রঙ ফেনিল্যানালাইনের জন্য ধনাত্মক পরীক্ষা হিসাবে ব্যাখ্যা করা হয়। অন্যদিকে, যদি মাধ্যমটি ফ্যাকাশে নীল হয়ে যায় তবে টেস্টটি ফেনিল্যানালাইনের জন্য নেতিবাচক।

QA তে

মাঝারিটির স্টেরিলিটি নিয়ন্ত্রণ সম্পাদন করার জন্য, এক বা দুটি ব্রোথকে ২৪ ঘন্টা ইনকিউবেশন হওয়ার জন্য 35 ° C ± 0.2 এ সঞ্চারিত করা উচিত। এই সময়ের পরে কোনও মেঘলা বা রঙ পরিবর্তন হওয়া উচিত নয়।

মান নিয়ন্ত্রণের জন্য, পরিচিত বা শংসাপত্রযুক্ত স্ট্রেনগুলি ব্যবহার করা যেতে পারে, যেমন: এন্টারোব্যাক্টর এয়ারোজেনস এটিসিসি 13048, ক্লিবিসেলা নিউমোনিয়া এটিসিসি 33945, সালমোনেলা এন্টারিকা এসএসপি আরিজোনা এটিসিসি 13314 এবং এসেরিচিয়া কোলি এটিসিসি 25922।

প্রত্যাশিত ফলাফলগুলি হ'ল:

• এন্টারোব্যাক্টর এয়ারোজেনস, ক্লিবিসিলা নিউমোনিয়া এবং সালমোনেলা এন্টারিকা এসএসপি আরিজোনা একটি ইতিবাচক প্রতিক্রিয়া দেয় (মাঝারি নীল রঙ)।
• এসেরিচিয়া কোলির ক্ষেত্রে ফলাফলটি নেতিবাচক হওয়া উচিত, এটি প্রত্যাশা করা হয় যে কোনও রঙের পরিবর্তন (সবুজ) হবে না বা গ্লুকোজ ফেরেন্টেশনের কারণে এটি হলুদ হয়ে যাবে।

সীমাবদ্ধতা

ঘোরাঘুরি, বৃষ্টিপাত, রঙ পরিবর্তন বা অবনতির কোনও চিহ্ন দেখায় এমন ঝোল ব্যবহার করবেন না।

তথ্যসূত্র

1. পেদ্রাজা জে, সানান্দ্রেস এন, ভারেলা জেড, আগুয়েরে ই, কামাচো জে সলমোনেলা এসপিপির মাইক্রোবায়োলজিক্যাল বিচ্ছিন্নতা। এবং এটি সনাক্ত করার জন্য অণু সরঞ্জাম tools অযৌক্তিক স্বাস্থ্য। ব্যারানকুইলা (কর্নেল) 2014; 30 (1): 73-94। উপলব্ধ: scielo.org.co
2. বিবিএল। ম্যালোনেট ব্রোথ, ইওং সংশোধিত। 2007. বিডি.কম এ উপলব্ধ
3. সেনা ল্যাবরেটরিজ। ম্যালোনাতো ঝোল। উপলব্ধ: ciographicasenna.com
4. RenyLab। ম্যালোনাতো ঝোল। 2013. উপলব্ধ এখানে: es.renylab.ind.br
5. এমবিওলজ ডায়াগনস্টিক্স। ম্যালোনাতো ঝোল। Mbiolog.com এ উপলব্ধ
6. কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 5 তম সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
7. কনডা প্রোনাডিস ল্যাবরেটরিজ। ফেনিল্লানাইন ম্যালোনেট ঝোল। উপলব্ধ: condalab.com