ব্যাকটিরিয়া স্মিয়ার: বৈশিষ্ট্য এবং প্রস্তুতি - জীববিদ্যা - 2025

ব্যাকটেরিয়া মলা পাতলা চলচ্চিত্র মলা যে একটি হালকা মাইক্রোস্কোপ অধীনে একটি স্বচ্ছ কাচের প্লেট বা স্লাইডে তৈরি করা হয়, পর্যবেক্ষণ জন্য ব্যাকটেরিয়া অণুজীবের একটি সাসপেনশন করুন।

একটি ফিল্ম আকারে এক্সটেনশনটি যতটা সম্ভব অণুজীবকে পৃথক করার জন্য পরিচালিত হয়, যেহেতু তারা দলবদ্ধ করা হয় তবে পর্যবেক্ষণটি পরিষ্কার নয়।

চিত্র ১. স্ক্যানিং ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপের নীচে ব্যাকটিরিয়া স্মিয়ার দেখা যায়। সূত্র: pixbay.com

ব্যাকটিরিয়া সংস্কৃতিগুলির অধ্যয়নের ক্ষেত্রে স্মিয়ার প্রস্তুতি, স্থিরকরণ এবং স্টেনিং কৌশলগুলি তাদের আরও বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহৃত হয়। ক্ষুদ্রতর আকারের অণুজীবের কারণে তাদের পর্যবেক্ষণের জন্য অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করা প্রয়োজন।

অপেক্ষাকৃত মাইক্রোস্কোপগুলি স্মিয়ারগুলি পর্যবেক্ষণ করার জন্য প্রয়োজনীয় সরঞ্জাম। এগুলি অপটিক্যাল লেন্স এবং হালকা নিয়োগ করে যাতে উচ্চতর বিবর্ধন সহ নমুনাগুলি দেখা যায়।

সাধারণভাবে, জীবন্ত কোষগুলির বেশিরভাগ রঙিন কাঠামো থাকে না, হালকা মাইক্রোস্কোপের সাহায্যে তারা বর্ণহীন, স্বচ্ছ নমুনা থাকে এবং এগুলি খুব কম অভ্যন্তরীণ বৈপরীত্য এবং তাদের পরিবেশের সাথে দেখায়।

সহায়ক স্টেইনিং কৌশল ব্যবহার না করে সাধারণ উজ্জ্বল-ক্ষেত্র অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ সহ পর্যবেক্ষণ খুব সীমাবদ্ধ এবং কেবলমাত্র কিছু ক্ষেত্রে যেমন অণুজীবগুলির গতিবিধি পর্যবেক্ষণে ব্যবহৃত হয়।

অণুজীবের সর্বোত্তম পর্যবেক্ষণের জন্য, বিপরীতে এবং রেজোলিউশনের মধ্যে ভারসাম্য বজায় রাখতে হবে। উচ্চতর রেজোলিউশন সহ এমনকি মাইক্রোস্কোপের নীচে সেল বিশদগুলি দেখা যায় না; ছোপানো কৌশলগুলির মাধ্যমে রঞ্জক ব্যবহার করা প্রয়োজন যা পর্যবেক্ষণের জন্য বৈপরীত্য সরবরাহ করে।

একটি ভাল মানের ব্যাকটেরিয়া স্মিয়ার বৈশিষ্ট্য

দুর্দান্ত বৈপরীত্য

দুর্দান্ত বৈসাদৃশ্য অর্জনের জন্য রয়েছে ফেজ কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপস, ডিফারেনশিয়াল হস্তক্ষেপ মাইক্রোস্কোপ এবং গা dark় ক্ষেত্রের মাইক্রোস্কোপস নামে পরিশীলিত মাইক্রোস্কোপগুলি। এই ধরণের মাইক্রোস্কোপ অন্যদের মধ্যে জীবাণু এবং ফিলামেন্টের মতো ব্যাকটিরিয়া কাঠামো পর্যবেক্ষণ করতে ব্যবহৃত হয়।

স্টেইনিং বিপরীতে বাড়াতে একটি সহজ কৌশল যা একটি ব্রাইটফিল্ড মাইক্রোস্কোপ দিয়ে অর্জন করা হয়। এই কৌশলটিতে, বিভিন্ন দাগ ব্যবহার করা যেতে পারে, যা মাইক্রোস্কোপিক পর্যবেক্ষণকে উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত করে।

এর আগে দাগ শুকানো এবং স্থির করা স্লাইডগুলিতে অণুজীবের ঝুলে থাকাগুলির স্মার বা এক্সটেনশনের উপর সরাসরি বাহিত হয়।

ভাল ফিক্স

স্থিরতা কোষ কাঠামো সংরক্ষণের জন্য ব্যবহৃত একটি কৌশল; অণুজীবের অকার্যকরতা এবং স্লাইডের কাচের সাথে সংযুক্তি সৃষ্টি করে। বিভিন্ন ফিক্সিং চিকিত্সা রয়েছে: তাপ নির্ধারণ এবং রাসায়নিক স্থিরকরণ।

তাপ নির্ধারণ

ব্যাকটিরিয়া স্মারগুলি পর্যবেক্ষণের জন্য এটি সর্বাধিক ব্যবহৃত পদ্ধতি। কৌশলটি একটি লাইটারের শিখার মধ্য দিয়ে স্মিয়ারের ব্যাকটেরিয়াল সাসপেনশনকে কেন্দ্র করে consists এই কৌশলটি ব্যাকটিরিয়ার বাহ্যিক রূপচর্চা সংরক্ষণ করতে সক্ষম, তবে তাদের অভ্যন্তরীণ কাঠামো ধ্বংস করে।

রাসায়নিক নির্ধারণ

রাসায়নিক স্থিরকরণের জন্য অন্যদের মধ্যে ফর্মালডিহাইড বা ফরমালিন, ইথানল এবং এসিটিক অ্যাসিডের মতো সংরক্ষণের রাসায়নিক ব্যবহার করা হয়। রাসায়নিক ফিক্সিং এজেন্টগুলির ব্যবহারের সুবিধাটি হ'ল অণুজীবের অভ্যন্তরীণ সেলুলার কাঠামোর সংরক্ষণ করা হয়।

চিত্র 2. রক্তের স্মিয়ার। সূত্র: বোকজগালিন্দো, উইকিমিডিয়া কমন্স থেকে

ভাল স্টেনিং

পূর্বে শুকানো এবং স্থির স্মির স্ট্যানিংয়ের সর্বাধিক সাধারণ পদ্ধতি হ'ল ধনাত্মক বা সাধারণ স্টেইনিং, ডিফারেনশিয়াল স্টেইনিং এবং নেতিবাচক স্টেইনিং। নির্দিষ্ট কোষ কাঠামো (ক্যাপসুল, স্পোর, ফ্ল্যাজেলা) দাগ দেওয়ার জন্য বিশেষ কৌশল রয়েছে।

ইতিবাচক দাগ বা সরল দাগ

ইতিবাচক বা সাধারণ স্টেইনিং সর্বাধিক ব্যবহৃত স্যামিয়ার স্টেইনিং কৌশল। এটি এমন রঞ্জক ব্যবহার করে যা নির্দিষ্ট মাইক্রোবিয়াল কাঠামোর সাথে আবদ্ধ হওয়ার ক্ষমতা রাখে এবং এগুলি একটি মাইক্রোস্কোপের নীচে পর্যবেক্ষণ করতে দেয়।

এই রঞ্জকগুলির ক্রমিকোফোর গোষ্ঠীগুলি (রঙিন অংশ) তাদের রাসায়নিক কাঠামোর সাথে সাথে বিকল্প ডাবল বন্ড এবং একক বন্ধন (সংযোগ) সহ। এই বন্ধনগুলি কিছু সেলুলার স্ট্রাকচারের সাথে আয়নিক বা সমবয়সী বন্ধন প্রতিষ্ঠা করতে পারে।

ইতিবাচক বা সাধারণ স্টেইনিংয়ে ব্যবহৃত রঞ্জকগুলি বেশিরভাগই অ্যানিলিনের বর্ণগত ডেরাইভেটিভগুলি (রঙিন জৈব লবণের) হয়।

অন্যদিকে, রঞ্জকগুলির মধ্যে আমরা একটি বেসিক পিএইচ এবং কিছুতে অ্যাসিডিক পিএইচ সহ কিছু খুঁজে পেতে পারি।

বেসিক কালারেন্টস

মৌলিক বর্ণের মধ্যে ক্রোমোফোর গ্রুপের ইতিবাচক বৈদ্যুতিক চার্জ থাকে। বেশিরভাগ প্রোকারিয়োটিক অণুজীবের একটি নিরপেক্ষ অভ্যন্তরীণ পিএইচ থাকে এবং তাদের কোষের পৃষ্ঠটি নেতিবাচকভাবে চার্জ করা হয়। এই ইলেক্ট্রোস্ট্যাটিক মিথস্ক্রিয়াটির মাধ্যমে ক্রোমোফোরটি কোষের সাথে আবদ্ধ হয় এবং এটি দাগ দেয়।

মৌলিক বর্ণের উদাহরণগুলি হল মিথাইলিন নীল, স্ফটিক ভায়োলেট, ম্যালাচাইট সবুজ, বেসিক ফুসিন, সাফ্রেনিন এবং অন্যান্য।

অ্যাসিড রঞ্জকতা

অ্যাসিড রঞ্জনায় ক্রোমোফোর গোষ্ঠীর নেতিবাচক বৈদ্যুতিক চার্জ থাকে। এগুলি ইতিবাচক চার্জড অ্যামিনো গ্রুপগুলির সাথে প্রোটিন দাগ করতে ব্যবহৃত হয়। অ্যাসিড বর্ণের উদাহরণগুলি হ'ল অ্যাসিড ফুসিন, গোলাপ বেঙ্গল, কঙ্গো লাল এবং ইওসিন।

ডিফারেনশিয়াল স্টেনিং

ডিফারেনশিয়াল স্টেইনিং কৌশলটিতে মাইক্রোস্কোপের অধীনে বিভিন্ন অণুজীবকে পৃথক করতে বিভিন্ন বর্ণ বা তীব্রতার দুটি বর্ণ প্রয়োগ করা হয়। গ্রাম দাগ এবং অ্যাসিড-অ্যালকোহল প্রতিরোধের দাগ ব্যাকটিরিওলজিতে সর্বাধিক ব্যবহৃত ডিফারেন্সিয়াল দাগ।

আকার, আকার, কোষ গ্রুপিং এবং সেই সাথে কোষের প্রাচীরের প্রকার জানতে প্রাথমিক পরীক্ষা হিসাবে গ্রাম দাগ ব্যবহার করা হয়। গ্রাম দাগ পরীক্ষা ব্যবহার করে, সেল প্রাচীর ব্যাকটেরিয়াগুলি গ্রাম পজিটিভ ব্যাকটিরিয়া এবং গ্রাম নেতিবাচক ব্যাকটিরিয়ায় শ্রেণিবদ্ধ করা হয়।

নেতিবাচক দাগ

এই কৌশলটিতে, রাসায়নিক রঙিনগুলি ব্যবহার করা হয় যা কোষের অভ্যন্তরে প্রবেশ করে না, তবে যে মাধ্যমটিতে অণুজীবগুলি কালো পটভূমি হিসাবে প্রদর্শিত হবে make

নেতিবাচক স্টেনিং কৌশলটিতে, স্মিয়ারটি ভারতের কালি বা নিগ্রোজিন স্থগিতাদেশের একটি ড্রপ দিয়ে তৈরি করা হয়, যা ঘরের তাপমাত্রায় শুকানোর পরে আলোর উত্তরণে একটি অস্বচ্ছ ফিল্ম গঠন করে। এইভাবে, অণুজীবগুলি অন্ধকার পটভূমিতে উজ্জ্বল আকার হিসাবে প্রদর্শিত হয়।

প্রস্তুতি

উ: স্মিয়ার

1.- স্লাইডগুলি খুব ভালভাবে ধুয়ে নিন, শোষণকারী কাগজ দিয়ে শুকিয়ে নিন এবং সেগুলি লেবেল করুন। লেবেলে অবশ্যই প্রস্তুতির সামগ্রী, তারিখ এবং যিনি প্রক্রিয়া করেছেন তার নাম উল্লেখ করতে হবে।

২- হালকা হালকা করুন এবং উজ্জ্বল লাল হওয়া পর্যন্ত শিখায় ইনোকুলেশন লুপটিকে নির্বীজন করুন।

৩.- হ্যান্ডেলটি ঠান্ডা হতে দিন।

৪- ব্যাকটিরিয়া কালচার টিউব নিন, ক্যাপটি সরিয়ে দ্রুত বার্নার শিখার (শিখা) কাছে নলের মুখটি পাস করুন।

5.- ব্যাকটিরিয়া সংস্কৃতিযুক্ত নলটিতে ইনোকুলেশন লুপটি প্রবেশ করান এবং নমুনাটি নিন।

-.- সংস্কৃতি যদি তরল মাঝারি হয় তবে হ্যান্ডেলটির সাথে নেওয়া নমুনাটি স্লাইডের মাঝখানে রাখুন এবং আনুমানিক 2 সেন্টিমিটার ব্যাসের বৃত্তে সাবধানে ছড়িয়ে দিন।

7.- আবার ইনোকুলেশন লুপ নির্বীজন করুন।

৮- স্মিয়ারটি বাতাসে শুকতে দিন।

9.- 3 থেকে 8 বার তিনবার পুনরাবৃত্তি করুন।

১০- সংস্কৃতি যদি শক্ত মাঝারি হয় তবে ডিস্টিলড জলের একটি ফোঁটা পূর্বে স্লাইডে রাখতে হবে। এটি ইনোকুলেশন লুপের সাথে নেওয়া সংস্কৃতির একটি ছোট্ট নমুনা মিশ্রিত করার জন্য করা হয়, যেমন 2 থেকে 5 ধাপে নির্দেশিত (অ্যাসেটিক শর্ত)।

১১- স্লাইডে জলের ফোটা দিয়ে পাতলা নমুনা ছড়িয়ে দিন এবং তিনবার পুনরাবৃত্তি করুন।

বি স্থিরকরণ

1.- শুষ্ক স্মারগুলিতে দুটি ফোটা মিথেনল বা পরম ইথানল যুক্ত করুন - তরল মাধ্যমের সংস্কৃতি থেকে -।

2.- হালকা থেকে দূরে বায়ু শুকানোর অনুমতি দিন।

৩.- যদি সোমার শক্ত মিডিয়াম থেকে কোনও সংস্কৃতি থেকে আসে তবে শুকনো সোমারটি তাপের সাথে সংশোধন করা হয়, এটি হালকা শিখার সবচেয়ে উষ্ণ অংশের মাধ্যমে 2 থেকে 3 বার দ্রুত পাস করে।

৪.- বাম হাতের ডোরসাল অংশের সাথে স্মিয়ারের নীচের অংশটি স্পর্শ করুন (ডান-হ্যান্ডারদের জন্য; অন্যথায়, ডান হাতটি ব্যবহার করুন) এবং এটি শীতল কিনা তা যাচাই করুন।

সি সরল দাগ

1.- নির্বাচিত দাগের 2 টি ফোঁটা সোয়ারে যুক্ত করুন এবং প্রতিটি দাগের জন্য নির্দিষ্ট প্রোটোকলগুলিতে প্রয়োজনীয় সময়ের জন্য কাজ করতে ছেড়ে যান (সাধারণত 1 থেকে 5 মিনিটের মধ্যে)।

2.- কিছু দাগ তাদের সক্রিয়করণের জন্য তাপ ব্যবহার করা প্রয়োজন, এক্ষেত্রে হালকা শিখাতে স্লাইডটি গরম করার সময় খুব সতর্কতা অবলম্বন করা প্রয়োজন (এটি টুইজার দিয়ে ম্যানিপুলেট করুন এবং ফুটন্ত এড়ানো)। অতি উত্তাপের উত্তাপটি পর্যবেক্ষণ করা কোষগুলি ধ্বংস করতে পারে।

৩- একটি পিকেট থেকে পাতিত জল দিয়ে ধুয়ে অতিরিক্ত রঙিন সরান। কাজের টেবিলে কাত হয়ে ধীরে ধীরে স্লাইডটি তার প্রান্তে আলতো চাপ দিয়ে ওয়াশ ওয়াটারটি সরান।

4.- বায়ু শুকানোর অনুমতি দিন।

৫.- পর্যবেক্ষণের ধরণের উপর নির্ভর করে একটি কভারস্লিপ ব্যবহৃত হয় বা এই পর্যায়ে নেই। কভারস্লিপ স্মিয়ার সুরক্ষা এবং সংরক্ষণ করে। যদি এই পর্যায়ে কোনও তেল নিমজ্জন পর্যবেক্ষণ করা হয় তবে কোনও কভারস্লিপ ব্যবহার করা হয় না তবে স্মিয়ারটি সংরক্ষণ করা যায় না।

D. স্মিয়ারের সংজ্ঞা সংরক্ষণ

1.- সর্বনিম্ন 5 মিনিটের জন্য, নীচে নির্দেশিত প্রতিটি সমাধানে ক্রমাগত স্মির নিমজ্জন করুন। এই "স্নান "গুলির উদ্দেশ্যটি সম্পূর্ণরূপে স্মিয়ার ডিহাইড্রেট করা। পরবর্তী স্নানের মধ্যে স্মিয়ার প্রবর্তনের আগে প্রতিটি রিএজেন্ট ভালভাবে শুকিয়ে নেওয়া উচিত।

ডিহাইড্রটিং স্নানের ক্রমটি নিম্নরূপ:

1. ইথানল 70%
2. ইথানল 95%
3. খাঁটি অ্যাসিটোন
4. অ্যাসিটোন -এক্সাইলল 1: 1 মিশ্রণ
5. Xylol

তারপরে শুকনো বায়ুতে অনুমতি দিন।

২- কানাডা বালসাম বা অন্যান্য মাউন্টিং মাধ্যমটি ব্যবহার করে কভারস্লিপ মাউন্ট করুন fe

তথ্যসূত্র

1. ব্রিগস, জি। (1965)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ল্যাবরেটরি দুর্ঘটনা এবং সংক্রমণের কার্যকারক কারণগুলি। মার্কিন সেনা বায়োলজিক্যাল ল্যাবরেটরিজ। ফোর্ট ডেট্রিক
2. ক্যাপুচিনো, জিজি এবং ওয়েলচ, সিটি (2017)। মাইক্রোবায়োলজি: একটি পরীক্ষাগার ম্যানুয়াল। পিয়ারসন।
3. হল্ট, জিজি সম্পাদক। (1977)। সংক্ষিপ্ত জীবাণুবিদ্যার সংক্ষিপ্ত বার্গির ম্যানুয়াল। 8 ^ম বাল্টিমোর: দ্য উইলিয়ামস ও উইলকিন্স কোং
4. জনসন, টিআর এবং কেস; সিএল (2018)। মাইক্রোবায়োলজিতে পরীক্ষাগার পরীক্ষা পিয়ারসন।
5. টিলে, পি। (2017)। ডায়াগনস্টিক মাইক্রোবায়োলজি। 14 ^ম সেন্ট লুই, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র: এলসিভার, ইনক।