পিত্ত এস্কুলিন আগর: যুক্তি, প্রস্তুতি এবং ব্যবহার - জীববিদ্যা - 2025

পিত্ত esculin Agar নির্বাচনী এবং ডিফারেনশিয়াল মাঝারি কঠিন সংস্কৃতি। এটি একটি নির্দিষ্ট অণুজীবের পিত্তযুক্ত মিডিয়ামে বৃদ্ধির দক্ষতা নির্ধারণ এবং গ্লুকোসাইড এসকুলিনকে এসিউলেটিন এবং গ্লুকোজে বিভক্ত করার ক্ষমতা নির্ধারণ করতে ডায়াগনস্টিক পরীক্ষা হিসাবে ব্যবহৃত হয় is

এই ডায়াগনস্টিক টেস্টটি স্ট্রেপ্টোকোকাসের অন্যান্য গ্রুপ থেকে, যা এই পরীক্ষায় নেতিবাচক প্রতিক্রিয়া দেখায়, গ্রুপ ডি (পিত্ত এসকুলিন পজিটিভ) এর জেনাস স্ট্রেপ্টোকোকাসের প্রজাতির পার্থক্য করতে ব্যবহৃত হয়।

পিত্তর এস্কুলিন আগর প্লেট, এন্টারোকোকাস স্ট্রেন (টেস্ট পজিটিভ) দিয়ে সজ্জিত। উত্স: কোনও মেশিন-পঠনযোগ্য লেখক সরবরাহ করেন নি। ফিলিপিনজল ধরে নেওয়া (কপিরাইট দাবির ভিত্তিতে)।

এটি লক্ষ করা উচিত যে ভাইরাডান গ্রুপের কিছু স্ট্রেপ্টোকোকি এস্কুলিনকে হাইড্রোলাইজ করতে পারে তবে তারা 40% এর ঘনত্বের মধ্যে পিত্তের উপস্থিতিতে বৃদ্ধি পেতে সক্ষম নয়, অতএব, এই মাধ্যমের মধ্যে এই গোষ্ঠীর জন্য প্রতিক্রিয়া নেতিবাচক।

অন্যদিকে, পিত্তর এস্কুলিন মাঝারিটি লিস্টারিয়া মনোকাইটোজেনস বা অ্যারোকক্কাস স্প প্রজাতির নির্ণয়ের জন্যও কার্যকর, যেহেতু এই অণুজীবগুলি পিত্তের এস্কুলিন ধনাত্মক হয়।

এসকুলিন বিলে আগর পেপটোন, মাংসের নির্যাস, ষাঁড় পিত্তর, এস্কুলিন, আয়রন সাইট্রেট, আগর এবং পাতিত জল দিয়ে গঠিত। কিছু বাণিজ্যিক বাড়িগুলির মধ্যে মাঝারিটির সংমিশ্রণের মধ্যে সোডিয়াম অ্যাজাইড অন্তর্ভুক্ত রয়েছে।

আপনার যদি সমস্ত যৌগিক আলাদাভাবে থাকে বা এটি বাণিজ্যিক ডিহাইড্রেটেড মাধ্যম থেকে তৈরি করা যায় তবে পরীক্ষাগারে মিডিয়ামটি প্রস্তুত করা যেতে পারে।

ভিত্তি

পিত্তর এস্কুলিন মিডিয়ামে পেপটোন এবং মাংসের নির্যাস থাকে, উভয় যৌগই অণুজীবের বৃদ্ধির জন্য প্রয়োজনীয় পুষ্টি সরবরাহ করে।

এটিতে এসকুলিনও রয়েছে; এই যৌগটি অ্যাসিটাল বা গ্লুকোসিডিক বন্ধনের দ্বারা সংযুক্ত,,7-ডাইহাইড্রোক্সাইকোমারিন বা এস্কুলেটিন (অগ্লুকোন) নামে একটি যৌগযুক্ত একটি সাধারণ মনোস্যাকচারাইড (গ্লুকোজ) এর ইউনিয়ন দ্বারা গঠিত একটি গ্লাইকোসাইড।

পরীক্ষাটি ব্যাকটিরিয়া হাইড্রোলাইজিং এস্কুলিন সক্ষম কিনা তা দেখানোর ভিত্তিতে তৈরি করা হয়। যদি এটি ঘটে থাকে তবে এসকুলিন ভেঙে এসুলেটিন এবং গ্লুকোজ হয়। এস্কুলেটিনা মাঝারি উপস্থিত লোহার সাথে প্রতিক্রিয়া প্রকাশ করে একটি গা brown় বাদামী, প্রায় কালো মিশ্রণ গঠন করে।

এর অর্থ ফেরিক সিট্রেট একটি প্রতিক্রিয়া বিকাশকারী হিসাবে কাজ করে। এই বৈশিষ্ট্যটি বিলে এসকুলিন আগরকে একটি ডিফারেন্সিয়াল মিডিয়াম করে তোলে।

এর অংশ হিসাবে, পিত্ত একটি প্রতিরোধক যা কিছু অণুজীবের বৃদ্ধি রোধ করে, তাই, এসকুলিনকে বিভক্ত করার আগে জীবাণুটি অবশ্যই পিত্তের উপস্থিতিতে বৃদ্ধি পেতে সক্ষম হতে পারে। সুতরাং, এই মাধ্যমটি নির্বাচনী হিসাবে বিবেচিত হয়।

এই পরিবেশে যে ব্যাকটেরিয়াগুলি বিকাশ করতে পারে সেগুলি হ'ল মূলত অন্ত্রের পরিবেশে বাস করে।

এই অর্থে, কিছু বাণিজ্যিক সংস্থা মাধ্যমের সাথে সোডিয়াম অ্যাজাইড যুক্ত করে এন্টারিক গ্রাম নেগেটিভ ব্যাসিলির বৃদ্ধিকে আরও বাধা দেয়, স্ট্রেপ্টোকোকাসের বিকাশের জন্য মাধ্যমের निवडকতা বাড়িয়ে তোলে।

অবশেষে, আগরটি মাঝারিটিকে দৃ cons় ধারাবাহিকতা দেয় এবং জল হল যৌগিকগুলির দ্রাবক।

প্রস্তুতি

পিত্ত এসকুলিন আগর বাড়িতে তৈরি প্রস্তুতি

ওজন করতে:

5 গ্রাম পেপটোন

মাংস নিষ্কাশন 3 গ্রাম

40 গ্রাম গরুর মাংসের পিত্ত

এসক্রুলিন 1 গ্রাম

আয়রন সাইট্রেট 0.5 গ্রাম

15 গ্রাম আগর

পাতিত জল 1000 মিলি

সোডিয়াম অ্যাসাইড যুক্ত করার ক্ষেত্রে, 0.25 গ্রাম / লিটার ওজন করে মিশ্রণে যুক্ত করা হয়।

মিশ্রিত পানির লিটারে উপাদানগুলি দ্রবীভূত করুন, যৌগগুলি সম্পূর্ণ দ্রবীভূত না হওয়া পর্যন্ত উত্তাপ করুন। 16 মিলি 125 মিমি স্ক্রু ক্যাপ পরীক্ষার টিউবগুলিতে 5 মিলি বিতরণ করুন। 121 ডিগ্রি সেলসিয়াসে অটোক্লেভ, 15 মিনিটের জন্য 15 পাউন্ড চাপ।

অটোক্লেভ থেকে সরান এবং একটি টিউবগুলিকে একটি সহায়তার সাথে ঝুঁকুন, যাতে আগরটি একটি বাঁশীর বীচকে শক্ত করে তোলে।

ব্যবহার না করা পর্যন্ত একটি ফ্রিজে রেখে দিন। বপনের আগে ঘরের তাপমাত্রায় নিয়ে আসুন।

পিত্ত এস্কুলিন আগর প্লেটগুলিও প্রস্তুত করা যেতে পারে; এই ক্ষেত্রে, পুরো মিশ্রণটি একটি ফ্লাস্কে অটোক্ল্যাভ করা হয় এবং পরে নির্বীজন পেট্রি থালাগুলিতে বিতরণ করা হয়। তাদের দৃify় করা এবং ফ্রিজে সঞ্চয় করতে দিন।

মাধ্যমের পিএইচ অবশ্যই 6.6 ± 0.2 হতে হবে।

বাণিজ্যিক মাধ্যম থেকে পিত্ত এসকুলিন আগর প্রস্তুতকরণ

সন্নিবেশ দ্বারা নির্দিষ্ট পরিমাণের ওজন করুন। এটি এক ব্যবসায়িক বাড়ি থেকে অন্য ব্যবসায়ের বাড়িতে পরিবর্তিত হতে পারে। পরবর্তীকালে, উপরে বর্ণিত পদ্ধতিটির মতোই এগিয়ে যান।

মাধ্যমের পিএইচ 6.6 ± 0.2 হতে হবে। ডিহাইড্রেটেড মিডিয়ামের রঙ হালকা বেইজ এবং প্রস্তুত মিডিয়াম গা dark় অ্যাম্বার।

বাণিজ্যিক পিত্ত ইস্কুলিন মাঝারি। সূত্র: লেখক এমএসসি তোলা ছবি। মেরিলিসা গিল।

অ্যাপ্লিকেশন

পিত্তর এস্কুলিন মাধ্যমটি সাধারণত স্ট্রিপ্টোক্কাস গ্রুপের (পিত্তের এস্কুলিন নেতিবাচক) গ্রুপ থেকে ডি গ্রুপ স্ট্রেপ্টোকোকাস (পিত্তের এস্কুলিন পজিটিভ) পার্থক্য করতে ব্যবহৃত হয়।

পিত্তর এস্কুলিন পরীক্ষার সাথে হাইপারসলেটেড ব্রোথ বৃদ্ধি পরীক্ষা সংমিশ্রণ করা এন্টারোকোকাস নামে একটি গ্রুপ ডি স্ট্রেপ্টোকোকাসের একটি বিশেষ গ্রুপ চিহ্নিত করতে পারে।

স্ট্রেপ্টোকোকাসের এই বিশেষ গোষ্ঠীটি পূর্বোক্ত জিনসের গ্রুপ ডি এর অন্তর্গত এবং তারা গ্রুপ ডি এর সদস্যদের মতো পিত্তের উপস্থিতিতে হাইড্রোলাইজিং এস্কুলিনকে সক্ষম, তবে তারা হাইপারসাল্টেড মিডিয়ামে (বিআইএইচ ক্লোরাইডযুক্ত) বিকাশ করতেও সক্ষম 6.5% সোডিয়াম), পার্থক্য তৈরি করে এমন একটি সম্পত্তি।

অতএব, স্ট্রেপ্টোকোসি যে হাইপারলাইজ এসকুলিন পিত্ত কিন্তু হাইপারসাল্টেড ঝোলের মধ্যে বৃদ্ধি পায় না তাদের নন-এন্টারোকোকোকি গ্রুপ ডি স্ট্রেপ্টোকোসি বলে।

বোনা

খাঁটি টড-হুইট 24 ঘন্টা ঝোল থেকে পছন্দ করে মাঝারিটি Inোকান।

একটি পাস্তর পিপেটের সাহায্যে মাঝারি পৃষ্ঠে 2 ফোঁটা যুক্ত করুন এবং প্ল্যাটিনাম লুপের সাহায্যে মিডিয়ামে ছড়িয়ে দিন।

48 ঘন্টার জন্য 35 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রা সঞ্চিত করুন, যখন ইনকিউবেশন সময়টি পূরণ করা হয়, তবে এটি ইতিবাচক প্রতিক্রিয়া আছে কিনা তা পর্যবেক্ষণ করা যেতে পারে। যদি সময়ের শেষে প্রতিক্রিয়াটি নেতিবাচক থাকে, তবে এটি 72 ঘন্টা পর্যন্ত সজ্জিত হতে পারে।

ব্যাখ্যা

ইতিবাচক প্রতিক্রিয়া: বাঁশীর চাঁচায় একটি গা brown় বাদামী, প্রায় কালো রঙের উপস্থিতি (টিউব পরীক্ষার ক্ষেত্রে) বা উপনিবেশের চারপাশে আগর কালো করা (প্লেট পরীক্ষার ক্ষেত্রে)।

নেতিবাচক প্রতিক্রিয়া: মাঝারি কোনও কালোভাব দেখা দেয় না বা hours২ ঘন্টা ইনকিউবেশন হওয়ার পরে টিউবের অর্ধেকেরও কম অংশে কালো উপস্থিতি দেখা দেয়। অন্যদিকে, কালো রঙের উপস্থিতি ছাড়াই মাঝারিটিতে ব্যাকটিরিয়া বৃদ্ধি একটি নেতিবাচক পরীক্ষা হিসাবে বিবেচনা করা উচিত।

QA তে

মাধ্যমের গুণাগুণটি মূল্যায়নের জন্য, একটি এন্টারোকোকাস ফ্যাকালিস এটিসিসি 29212 স্ট্রেন অবশ্যই একটি ধনাত্মক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে উপলব্ধ থাকতে হবে এবং স্ট্রেপ্টোকোকাস স্ট্রেনটি ডি গ্রুপের সাথে নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে নয়।

সীমাবদ্ধতা

-মাডিয়ায় সোডিয়াম অ্যাসাইড থাকে না এমন এন্ট্রিক গ্রাম নেগেটিভ ব্যাসিলির বৃদ্ধি করতে দেয়। তাদের মধ্যে কিছু মাঝখানে কালো করতে পারে can

- কিছু বাণিজ্যিক ঘরগুলি পিত্তের ঘন ঘনত্বকে সংযোজন করে (10%) এবং এই কারণে কিছু স্ট্রেপ্টোকোকাস যা ডি গ্রুপের অন্তর্গত নয়, মাঝারি এবং হাইড্রোলাইজ এসকুলিন বিকাশ করতে পারে, যা ব্যাখ্যায় ত্রুটি তৈরি করতে পারে।

তথ্যসূত্র

1. কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 5 তম সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
2. ফোর্বস বি, সাহম ডি, ওয়েসফেল্ড এ (২০০৯)। বেইলি এবং স্কট মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 12 এড। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
3. ম্যাক ফাদ্দিন জে। (2003)। ক্লিনিকাল গুরুত্বের ব্যাকটেরিয়া সনাক্তকরণের জন্য জৈব রাসায়নিক পরীক্ষা। তৃতীয় সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা। বুয়েনস আইরেস আর্জেন্টিনা।
4. ল্যাব। ব্রিটানিয়া। অ্যাজিড আগর সহ এসকুলিন পিত্ত। 2015. উপলভ্য: ব্রিটিয়ানাল্যাব.কম
5. "পিত্ত এসকুলিন আগর।" উইকিপিডিয়া, মুক্ত বিশ্বকোষ থেকে. 22 আগস্ট 2017, 17:30 ইউটিসি। 22 এপ্রিল 2019, 17:35। es.wikipedia.org।
6. ল্যাবরেটরিওস বিডি। বিলে এসকুলিন আগর স্লেন্টস। 2015. উপলভ্য: বিডি.কম
7. নিওজন ল্যাবরেটরিজ পিত্ত এস্কুলিন আগর। এখানে পাওয়া যায়: Foodafety.neogen.com