সিমন্স সিত্রিত Agar এটা একটি কঠিন বায়োকেমিক্যাল সনাক্তকরণ পরীক্ষা অণুজীবের, বিশেষ করে গ্রাম হিসাবে ব্যবহার মাধ্যম - নেতিবাচক bacilli। আসল মাধ্যমটি 1923 সালে কোসার তৈরি করেছিলেন।
কোসারের সিট্রেট মিডিয়ামে সোডিয়াম ফসফেট, অ্যামোনিয়াম ফসফেট, মনোপোটাসিয়াম ফসফেট, ম্যাগনেসিয়াম সালফেট এবং সোডিয়াম সাইট্রেট যুক্ত ব্রোথ ছিল।
উঃ ডিহাইড্রেটেড সিমন্স সিট্রেট আগর বাণিজ্যিক মাধ্যম বি। সিমন্স সিট্রেট আগর প্রস্তুত। সূত্র: এ। এমএসসি তোলা ছবি। মেরিলিসা গিল বি। রোটো 2 এসডিওস, উইকিমিডিয়া কমন্স থেকে
যেমন দেখা যায়, মাঝারি কার্বনের একমাত্র উত্স হল সাইট্রেট, এবং নাইট্রোজেনের হ'ল অ্যামোনিয়াম ফসফেট, প্রোটিন এবং কার্বোহাইড্রেট বাদ দিয়ে এই উপাদানগুলির উত্স, তারা অন্যান্য মিডিয়ায় সাধারণত উপস্থিত থাকে।
সুতরাং, এই মাধ্যমের ইনোকুলেটেড ব্যাকটিরিয়া কেবল তখনই পুনরুত্পাদন করতে পারে যদি এটি সিট্রেট থেকে কার্বন গ্রহণ করতে সক্ষম হয়। মাধ্যমটিতে টারবিডিটি থাকলে পরীক্ষাটি ইতিবাচক ছিল, তবে এটির অসুবিধাটি ছিল যে অ-নির্দিষ্ট টার্বিডিটি হতে পারে।
এই সমস্যাটি সিমনস দ্বারা ব্রোমোথিয়ামল নীল এবং আগর কেসারের মূল সূত্রে যুক্ত করে সমাধান করা হয়েছিল। নীতিটি একই হলেও এটি আলাদাভাবে ব্যাখ্যা করা হয়।
ভিত্তি
কিছু ব্যাকটিরিয়ায় গাঁজন বা ল্যাকটিক অ্যাসিড উত্পাদনের অভাবে বেঁচে থাকার ক্ষমতা থাকে, অন্যান্য স্তরগুলির ব্যবহারের মাধ্যমে শক্তি অর্জনের প্রয়োজন হয়। এই পরীক্ষায় দেওয়া একমাত্র কার্বন উত্স হল সাইট্রেট।
ব্যাকটিরিয়া যেগুলি এই অবস্থার মধ্যে বেঁচে থাকতে সক্ষম হয় ট্রাইকার্বোঅক্সিলিক অ্যাসিড চক্র বা সাইট্রেট ফারমেন্টেশন চক্র ব্যবহার করে theতিহ্যবাহী রুটের বিকল্পে সাইট্রেট বিপাকটি দ্রুত বিপাক করে।
ব্যাকটিরিয়া দ্বারা সিট্রেটের ক্যাটাবোলিজমে কোএনজাইম এ-এর হস্তক্ষেপ ছাড়াই একটি এনজাইম্যাটিক প্রক্রিয়া থাকে যা এই এনজাইম সিট্রিক্যাস (সিট্রেট অক্সালয়েসেটেট লাইজ) বা সাইট্রেট ডেসমোলেজ নামে পরিচিত। প্রতিক্রিয়াটির জন্য একটি ডিভলেন্ট ক্যেশন উপস্থিতি প্রয়োজন, যা সেই ক্ষেত্রে ম্যাগনেসিয়াম সরবরাহ করে।
প্রতিক্রিয়া অক্সালয়েসেটেট এবং পাইরুভেট উত্পন্ন করে, যা নাইট্রোজেন উত্স ব্যবহার করে গঠিত ক্ষারীয় পিএইচ এর মাঝখানে জৈব অ্যাসিড জন্মায়। এই জৈব অ্যাসিডগুলি কার্বন উত্স উত্পাদনকারী কার্বনেট এবং বাইকার্বোনেট হিসাবে ব্যবহৃত হয়, পরিবেশকে আরও ক্ষারায়িত করে।
বপন মোড
সিমন্স সিট্রেট মাঝারিটি একটি সরল লুপ বা সূঁচ ব্যবহার করে হালকাভাবে ফিশটেলের মধ্যে ইনোকুলেট করা উচিত এবং ২৪ ঘন্টা ৩ 35-৩7 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপিত করা উচিত should সময় পরে, ফলাফল পর্যবেক্ষণ করা হয়।
বীজ কেবল আগরের উপরিভাগে করা হয়। পাঞ্চার করবেন না।
ব্যাখ্যা
যদি মাধ্যমটি মূল বর্ণ (সবুজ) থেকে যায় এবং কোনও দৃশ্যমান বৃদ্ধি না ঘটে তবে পরীক্ষাটি নেতিবাচক হয় তবে যদি মাঝারিটি নীল হয়ে যায় তবে এটি ক্ষারীয় পণ্যের উপস্থিতি নির্দেশ করে, যা পিএইচ সূচক দ্বারা সনাক্ত করা হয়। এক্ষেত্রে পরীক্ষাটি ইতিবাচক।
সাইট্রেট (+) এবং (-)। সূত্র: এমএসসি। মেরিলসা গিল
এটি ঘটে কারণ ব্যাকটিরিয়াম যদি সিট্রেটের কার্বন ব্যবহার করে তবে এটি অ্যামোনিয়াম ফসফেটের নাইট্রোজেন গ্রহণের ক্ষমতা রাখে যা এটি অ্যামোনিয়া প্রকাশ করে, মাঝারিটি ক্ষারযুক্ত করে।
অন্যদিকে, যদি ব্যাকটিরিয়ার বৃদ্ধি মাঝামাঝি পর্যবেক্ষণ করা হয় তবে রঙ পরিবর্তন হয় না তবে পরীক্ষাটি অবশ্যই ইতিবাচক হিসাবে বিবেচনা করা উচিত, কারণ যদি বৃদ্ধি হয় তবে এর অর্থ এই যে ব্যাকটিরিয়া একটি কার্বন উত্স হিসাবে সাইট্রেট ব্যবহার করতে সক্ষম হয়েছিল, যদিও এই মুহুর্তে পিএইচ-তে কোনও পরিবর্তন নেই (কখনও কখনও এটি সময় নিতে পারে)।
যদি চূড়ান্ত রঙের ব্যাখ্যায় কোনও সন্দেহ থাকে তবে এটি একটি নন-ইনোকুলেটেড সাইট্রেট নলের সাথে তুলনা করা যেতে পারে।
প্রস্তুতি
এক লিটার পানির জন্য 24 ডিগ্রি ডিহাইড্রেটেড মাঝারি। মিশ্রণ করুন এবং এটি প্রায় 5 মিনিটের জন্য বিশ্রাম দিন। ঘন ঘন কাঁপুন, 1 বা দুই মিনিট গরম করে মাঝারিটি দ্রবীভূতকরণ শেষ করুন।
পরীক্ষার টিউবগুলিতে 4 মিলি andালা এবং 15 মিনিটের জন্য 121 ডিগ্রি সেলসিয়াসে অটোক্লেভ.ালুন। অটোক্লেভটি ছাড়ার সময়, সহায়তার সাহায্যে এমনভাবে ঝুঁকুন যাতে আগরটি একটি ছোট্ট ব্লক বা নীচে এবং আরও বেভেল দিয়ে বাঁশি চাঁচির আকারে দৃif় হয়।
সাইট্রেট মিডিয়ামের চূড়ান্ত পিএইচ 6.9 (সবুজ বর্ণ)। এই মাধ্যমটি পিএইচ পরিবর্তনের জন্য খুব সংবেদনশীল।
পিএইচ 6 বা নীচে, মাঝারিটি হলুদ হয়ে যায়। ব্যাকটিরিয়া পরীক্ষায় এই রঙটি পর্যবেক্ষণ করা হয় না।
এবং পিএইচ 7.6 বা তারও উপরে, মাঝারিটি গভীর প্রুশিয়ান নীল করে।
ব্যবহার
সিমন্স সিট্রেট আগর নির্দিষ্ট অণুজীবের সনাক্তকরণের জন্য ব্যবহৃত হয়, বিশেষত এন্টারোব্যাকটেরিয়া পরিবার এবং অন্যান্য নন-গ্লুকোজ ফেরেন্টিং ব্যসিলির ব্যাসিলি সনাক্তকরণের জন্য ব্যবহৃত হয়।
উত্স: কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 5 তম সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
সর্বশেষ ভাবনা
সিমন্স সিট্রেট মিডিয়াম একটি খুব সূক্ষ্ম পরীক্ষা, কারণ কিছু ভুল হলে ভুল মিথ্যা ইতিবাচক ধারণা পাওয়া যায়।
যত্ন নিতে হবে যে নিম্নলিখিত:
Inoculum
খুব ঘন বা লোডযুক্ত ব্যাকটেরিয়াল ইনোকুলাম তৈরি করা উচিত নয়, কারণ এটি একটি তামাটে হলুদ বর্ণের বীজ বপন করতে পারে, বাকি মাঝারিটি প্রভাবিত না করেই, তবে এটি বিশ্বাস করতে পারে যে সেখানে বৃদ্ধি রয়েছে। এটি পরীক্ষার ইতিবাচকতা বোঝায় না।
এছাড়াও, একটি ঘন ইনোকুলাম একটি মিথ্যা ধনাত্মক উত্পন্ন করতে পারে, কারণ মৃত ব্যাকটিরিয়ার কোষের দেয়ালগুলির মধ্যে উপস্থিত জৈব যৌগগুলি পিএইচ সূচকটি ঘুরিয়ে দেওয়ার জন্য পর্যাপ্ত কার্বন এবং নাইট্রোজেন ছেড়ে দিতে পারে।
অতএব, অতিরিক্ত হ'ল উপাদান এড়ানো এড়াতে আদর্শ প্ল্যাটিনাম হ্যান্ডেলের পরিবর্তে সুই ব্যবহার করে বপন করা।
বোনা
অন্যদিকে, যখন প্রশ্নে থাকা অণুজীবের সনাক্তকরণের জন্য বায়োকেমিক্যাল পরীক্ষার ব্যাটারি বীজযুক্ত হচ্ছে, তখন এটি গুরুত্বপূর্ণ যে অন্য কোনও মাধ্যম থেকে প্রোটিন বা শর্করাগুলির বহন করা এড়াতে সিট্রেট পরীক্ষাটি প্রথম ইনোকুলেটেড হয়।
এই পরিস্থিতিতে একটি মিথ্যা ধনাত্মক প্রাপ্তি সম্ভব, কারণ ভুলরূপে চালু হওয়া এই পদার্থগুলির মধ্যে যে কোনও একটি বিপাকযুক্ত হয়ে পিএইচ পরিবর্তনের কারণ হতে পারে।
পদার্থের বহনকে এড়াতে যাওয়ার আরেকটি উপায় হ'ল লুপটি ভালভাবে পোড়ানো এবং একটি পরীক্ষা এবং অন্যটির মধ্যে একটি নতুন ইনোকুলাম নেওয়া।
ইনোকুলাম সম্পাদনের জন্য কলোনিকে স্পর্শ করার সময়ও যত্ন নেওয়া উচিত, যেহেতু উপরেরটি ব্যাখ্যা করার কারণে, ব্যাকটিরিয়া যে সংস্কৃতি থেকে আসে সেখান থেকে আগরের অংশটি টানা এড়ানো উচিত।
এই অর্থে, অন্যান্য কার্বন উত্সের স্থানান্তর এড়াতে সাইট্রেট পরীক্ষাটি ইনোকুলেট করার আগে ম্যাটসেন, শেরিস এবং ব্র্যানসন শারীরবৃত্তীয় সমাধানে ইনোকুলামকে মিশ্রিত করার পরামর্শ দেন।
রঙের তীব্রতা
এটি বিবেচনায় নেওয়া উচিত যে পরীক্ষাটি ইতিবাচক হলে উত্পাদিত রঙের তীব্রতা বাণিজ্যিক বাড়ির অনুসারে পরিবর্তিত হতে পারে।
তদতিরিক্ত, এমন অণুজীব আছে যা 24 ঘন্টা ইতিবাচক পরীক্ষা করে, তবে অন্যান্য স্ট্রেনগুলিও রয়েছে যা পিএইচ পরিবর্তনের জন্য 48 ঘন্টা বা তারও বেশি সময় প্রয়োজন।
তথ্যসূত্র
- ম্যাক ফাদ্দিন জে। (2003)। ক্লিনিকাল গুরুত্বের ব্যাকটেরিয়া সনাক্তকরণের জন্য জৈব রাসায়নিক পরীক্ষা। তৃতীয় সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা। বুয়েনস আইরেস আর্জেন্টিনা।
- ফোর্বস বি, সাহম ডি, ওয়েসফেল্ড এ (২০০৯)। বেইলি এবং স্কট মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 12 এড। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
- কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 5 তম সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
- বিডি ল্যাবরেটরিজ। বিবিএল সিমন্স সিট্রেট আগর স্লেন্টস। 2015. উপলভ্য: বিডি.কম
- ব্রিটানিয়া ল্যাবরেটরিজ। সিমন্স সিট্রেট আগর। 2015. উপলভ্য: ব্রিটিয়ানাল্যাব.কম
- ভালটেক ডায়াগনস্টিক ল্যাবরেটরিগুলি। সিমন্স সিট্রেট আগর। 2016. উপলভ্য: andinamedica.com এ.com