- সিএলইডি আগর রেশনালে
- সিএলইডি আগর (বেভিস) এর মূলসূত্র
- অ্যাপ্লিকেশন
- প্রস্রাবের নমুনাগুলি বপন করা
- ব্যাখ্যা
- আইডি
- প্রস্তুতি
- তথ্যসূত্র
CLED Agar (Cystine-ল্যাকটোজ-ইলেক্ট্রোলাইট ঘাটতি) একটি কঠিন সংস্কৃতি মাঝারি ডিফারেনশিয়াল, মূত্রনালীর সংক্রমণ নির্ণয়ের জন্য ব্যবহৃত হয়। সংস্কৃতি মাধ্যমের সংমিশ্রণটি মূত্রনালীর প্যাথোজেনগুলির ভাল বিকাশের জন্য ডিজাইন করা হয়েছে এবং উপনিবেশ গঠনের ইউনিটগুলির পরিমাণ নির্ধারণের জন্য আদর্শ (সিএফইউ)।
সিএলইডি সংস্কৃতি মাধ্যমটি অ-নির্বাচনমূলক, কারণ গ্রাম নেতিবাচক এবং গ্রাম পজিটিভ অণুজীবগুলি এতে বৃদ্ধি করতে পারে। তবে এটি কোনও সমস্যা নয়, যেহেতু বেশিরভাগ ইউটিআই কেবলমাত্র এক ধরণের অণুজীবের কারণে ঘটে।
CLED আগর
পলিমাইক্রোবায়াল সংক্রমণের ক্ষেত্রে, 2 বা 3 বিভিন্ন ব্যাকটেরিয়া পাওয়া যায়, তবে এটি খুব বিরল এবং বেশিরভাগ সময় এটি দূষিত নমুনাগুলি থাকে।
এই মাধ্যমটিতে যে গ্রাম নেতিবাচক ব্যাকটিরিয়া বৃদ্ধি পেতে পারে তার মধ্যে এন্টারোব্যাকটেরিয়া পরিবার এবং অন্যান্য এন্টারিক ব্য্যাসিলির ব্যাসিলি রয়েছে, ইউরোপ্যাথোজেনগুলি প্রায়শই প্রস্রাবের নমুনাগুলিতে বিচ্ছিন্ন হয়ে থাকে: Escherichia coli, Klebsiella নিউমোনিয়া, প্রোটিয়াস মিরাবিলিস, মরগানেলা মোরগনি, সিউডোমোনাস এরুগিনোসা, অন্যদের মধ্যে।
তেমনি, এই মাধ্যমটিতে যে গ্রাম পজিটিভ ব্যাকটিরিয়া বৃদ্ধি পেতে পারে সেগুলির মধ্যে রয়েছে স্ট্যাফিলোকক্কাস অরিয়াস, স্টাফিলোকক্কাস স্যাপ্রোফিটিকাস, এন্টারোকোকাস ফ্যাকালিস, স্ট্র্যাপোকোককাস আগাল্যাকটিয়, কোরিনেব্যাকেরিয়াম এসপি, ল্যাক্টোব্যাকিলাস এসপি এবং এমনকি খামির, যেমন ক্যানডিডা অ্যালবিকানস কমপ্লেক্স, বৃদ্ধি পেতে পারে।
যাইহোক, মাধ্যমের রাসায়নিক সংমিশ্রণের কারণে এটি কিছু দাবি করা জেনিটোরিওনারি প্যাথোজেনগুলির বৃদ্ধির অনুমতি দেয় না যেমন নিসেরিয়া গনোরিয়া, গার্ডনারেলো যোনিলিস ইত্যাদি।
সিএলইডি আগর রেশনালে
সিএলইডি সংস্কৃতি মাধ্যমের একটি শক্তির উত্স হিসাবে মাংসের নির্যাস, কেসিনের অগ্ন্যাশয় হাইড্রোলাইজেট এবং জেলটিনের হাইড্রোলাইজেট রয়েছে। এগুলি অমান্যকারী ব্যাকটিরিয়ার বিকাশের জন্য পুষ্টি সরবরাহ করে।
এতে সিস্টোস্টাইন, একটি অ্যামিনো অ্যাসিড রয়েছে যা তাদের ছোট আকারের দ্বারা পৃথকযোগ্য কলিফর্মগুলির বর্ধন করতে দেয়।
তেমনি, এটিতে ফেরেন্টেবল কার্বোহাইড্রেট হিসাবে ল্যাকটোজ রয়েছে, এই কারণে এই মাধ্যমটি পৃথক; নন-ল্যাকটোজ ফেরেন্টিং থেকে ফেরেন্টিং ব্যাকটিরিয়া পার্থক্য করতে সক্ষম হচ্ছেন।
ফেরেন্টিং ব্যাকটিরিয়াগুলি অ্যাসিডের উত্পাদনের মাধ্যমে মিডিয়ামের পিএইচ পরিবর্তনের কারণ হয়, হলুদ উপনিবেশগুলি বিকাশ করে, যখন অ-ফেরমেন্টিং ব্যাকটিরিয়া মাঝারিটিতে কোনও পরিবর্তন সাধন করে না, তাই তারা মূল আগর, সবুজ রঙ ধারণ করে।
গাঁজন প্রতিক্রিয়া পিএইচ সূচক উপস্থিতি ধন্যবাদ প্রকাশিত হয়, যা এই মাঝারি ব্রোমোথিয়ামল নীল।
অন্যদিকে, মাধ্যমের কম ইলেক্ট্রোলাইট ঘনত্ব প্রোটিয়াম জেনাসের সাধারণ আক্রমণাত্মক বৃদ্ধিকে বাধা দেয়, যাকে সুইমিং এফেক্ট বলে। এটি অন্যান্য মিডিয়াগুলির জন্য একটি সুবিধা উত্পন্ন করে, যেহেতু এটি সিএফইউগুলির গণনা করতে দেয়, প্রোটিয়াস জেনাস উপস্থিত রয়েছে কিনা তা সহ।
তবে ইলেক্ট্রোলাইটের কম ঘনত্ব শিগেলা জিনের কিছু প্রজাতির বৃদ্ধি বাধা দেয়, এটি অন্যান্য মিডিয়ার তুলনায় অসুবিধা।
সিএলইডি আগর (বেভিস) এর মূলসূত্র
বেভিস দ্বারা তৈরি এই মাধ্যমের একটি বৈকল্পিক বা পরিবর্তন রয়েছে, যিনি মূল রচনায় অ্যাসিড ফুচিন (অ্যান্ড্রেডের সূচক) অন্তর্ভুক্ত করেছিলেন। এটি নন-ফেরমেন্টিং ব্যাকটিরিয়া থেকে ফেরেন্টিংয়ের পার্থক্য করতে ব্রোমোথিয়ামল ব্লুয়ের সাথে একত্রে কাজ করে।
প্রচলিত এবং পরিবর্তিত মাধ্যমের মধ্যে পার্থক্য হ'ল thatপনিবেশগুলি গ্রহণ করে। ল্যাকটোজ-ফেরেন্টিং ব্যাকটেরিয়াগুলির ক্ষেত্রে, উপনিবেশগুলি গোলাপী বা লাল হলোর সাথে লাল-কমলা হয়ে যায়, যখন অ-গাঁজনকারীগুলি নীল-ধূসর হয়।
অ্যাপ্লিকেশন
সিএলইডি আগর প্রস্রাবের নমুনাগুলির বীজ জন্য বিশেষভাবে ব্যবহৃত হয়। ইউরোপীয় পরীক্ষাগারগুলিতে এই মাধ্যমের ব্যবহার বিশেষত ঘন ঘন, আমেরিকাতে এটি কম ব্যবহৃত হয়।
নমুনা সংগ্রহকে নির্ভরযোগ্য নির্ভরযোগ্য ফলাফলগুলি পেতে নির্দিষ্ট প্যারামিটারগুলি অবশ্যই পূরণ করতে হবে:
- নমুনা দেওয়ার আগে অ্যান্টিবায়োটিক গ্রহণ করবেন না।
- আক্রমণাত্মক পদ্ধতিতে নমুনা নেওয়া সম্ভব না হওয়ার পরে, বেশি ঘন হওয়ার কারণে, প্রথমে সকালে প্রস্রাবের প্রথম জিনিসটি গ্রহণ করুন।
- নমুনা নেওয়ার আগে যৌনাঙ্গে ভালভাবে ধুয়ে ফেলুন।
- প্রস্রাবের প্রথম প্রবাহটি ত্যাগ করুন এবং তারপরে পাত্রে রাখুন।
- একটি ভাল লেবেল নির্বীজিত পাত্রে 25 থেকে 30 মিলি প্রস্রাব সংগ্রহ করুন।
- তত্ক্ষণাত বরফে ঘেরা পরীক্ষাগারে যান।
- এটি ইস্যু হওয়ার 2 ঘন্টার মধ্যে প্রক্রিয়া করা আবশ্যক বা সর্বোচ্চ 24 ঘন্টার জন্য 4 ডিগ্রি সেলসিয়াসে রেফ্রিজারেট করা উচিত।
প্রস্রাবের নমুনাগুলি বপন করা
মূত্রের নমুনা 1:50 মিশ্রিত করা উচিত।
দুর্বলতার জন্য, রোগীর প্রস্রাবের 0.5 মিলি রাখুন এবং 24.5 মিলি জীবাণুমুক্ত শারীরবৃত্তীয় দ্রবণ দিয়ে পাতলা করুন।
মিশ্রিত প্রস্রাবের 0.1 মিলি পরিমাপ এবং সিএলইডি মাঝারিটিতে একটি ড্রিগালস্কি স্পটুলা দিয়ে পৃষ্ঠের ছড়িয়ে পড়ে। কলোনী গণনা করার জন্য এটি সেরা বীজ পদ্ধতি method এই কারণে এটি প্রস্রাবের নমুনাগুলিতে ব্যবহৃত হয়, যেহেতু ফলাফলগুলি অবশ্যই সিএফইউ / এমিলিতে প্রকাশ করা উচিত।
প্রাপ্ত কলোনীগুলির পরিমাণ নির্ধারণের জন্য, নিম্নলিখিত হিসাবে এগিয়ে যান: প্লেটে কলোনীগুলি গণনা করুন এবং 10 এবং তারপরে 50 দ্বারা গুণ করুন This এটি আপনাকে মূত্রের সিএফইউ / মিলি পরিমাণ দেয়।
ব্যাখ্যা
100,000 সিএফইউ / এমএল -– এর উপরে গণনাগুলি মূত্রতন্ত্রের সংক্রমণের ইঙ্গিত দেয়
1000 সিএফইউ / এমএল- এর নীচে গণনা করুন - কোনও সংক্রমণ নেই
1000-10,000 সিএফইউ / মিলি-between সন্দেহজনক, সম্ভাব্য দূষণ, পুনরায় নমুনার মাধ্যমে গণনা করে।
আইডি
সিএলইডি আগরতে উত্থিত উপনিবেশগুলির একটি গ্রাম থাকা উচিত এবং অণুজীবের মরফোটিনটোরিয়াল বৈশিষ্ট্যগুলির উপর নির্ভর করে একটি নির্দিষ্ট সাবক্ল্যাচার করা হয়।
উদাহরণস্বরূপ, যদি এটি একটি গ্রাম নেতিবাচক ব্যাসিলাস হয় তবে এটি ম্যাককনকি আগরে বপন করা হবে, যেখানে ল্যাকটোজের গাঁজন বা না খনন করা হয়। এছাড়াও, একটি পুষ্টি আগর অক্সিডেস পরীক্ষা করার জন্য সংযুক্ত থাকে।
যদি গ্রামটি গ্রাম পজিটিভ কোকি প্রকাশ করে, এটি নোনতা ম্যানিটল আগর এবং পুষ্টিকর আগরগুলিতে উপজাত করা যায়। পরবর্তীকালে, ক্যাটালাস পরীক্ষা করা হয়। পরিশেষে, যদি খামিরগুলি পালন করা হয় তবে তা সাবৌরুদ আগরে বপন করা হবে।
অনেক পরীক্ষাগার CLED মাঝারি ব্যবহার এড়ায় এবং কেবল রক্তের আগর, ম্যাককনকি এবং পুষ্টিকর আগর বীজের প্রস্রাবের নমুনাগুলিকে ব্যবহার করতে পছন্দ করে।
প্রস্তুতি
এক লিটার পাতিত জল দিয়ে ফ্লাস্কে সিএলইডি আগর গুঁড়ো 36.2 গ্রাম দ্রবীভূত করুন। 5 মিনিটের দাঁড়ানোর পরে, পুনরায় চাপানো আগর গরম করুন, 1 মিনিটের জন্য ফুটতে অবিচ্ছিন্নভাবে মিশ্রিত করুন।
তারপরে অটোক্লেভে 15 মিনিটের জন্য 121 ডিগ্রি সেলসিয়াসে নির্বীজন করুন। সময়ের শেষে, এটি অটোক্লেভ থেকে সরানো হয় এবং 45 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেড তাপমাত্রায় শীতল হতে দেয় allowed এরপরে, প্রতিটি জীবাণুমুক্ত পেট্রি থালাতে 15-20 মিলি পরিবেশন করা হয়।
প্লেট পরিবেশন পদ্ধতি অবশ্যই দূষণ এড়ানোর জন্য লামিনার ফ্লো হুডের ভিতরে বা বনসেন বার্নারের সামনে বাহিত হতে হবে।
পরিবেশন করা প্লেটগুলি দৃify়করণের জন্য ছেড়ে দেওয়া হয়, একটি উল্টা র্যাকের ব্যবস্থা করা হয় এবং ব্যবহার না করা পর্যন্ত একটি ফ্রিজে (2-8 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেড) সংরক্ষণ করা হয়।
প্রস্তুত মাধ্যমের চূড়ান্ত পিএইচ 7.3 ± 0.2 হতে হবে।
তথ্যসূত্র
- মূত্রতন্ত্রের সংক্রমণের মাইক্রোবায়োলজিকাল নির্ণয়ের জন্য প্রস্তাবনাগুলি। chil। infectol। 2001; 18 (1): 57-63। উপলভ্য: scielo.org।
- পঞ্চি জে মূত্রাশয় ক্যাথেটারাইজেশন করানো রোগীদের মূত্রনালীর সংক্রমণ ঘটাচ্ছে এমন মাইক্রোবিয়াল এজেন্টের সনাক্তকরণ। 2016. ক্লিনিকাল ল্যাবরেটরিতে স্নাতক ডিগ্রি অর্জনের জন্য স্নাতকোত্তর কাজ। টেকনিক্যাল ইউনিভার্সিটি অফ অ্যামাবাটো। ইকুয়েডর।
- ব্রিটানিয়া ল্যাবরেটরিজ। CLED মাঝারি। উপলভ্য: ব্রিটানিয়াবল.কম।
- রেনিল্যাব ল্যাবরেটরিজ। ব্যবহারের জন্য নির্দেশাবলী, সিএলইডি আগর। 2013 এ উপলব্ধ: es.renylab.ind.br।
- ক্লটিমেড ল্যাবরেটরিজ। মাইক্রোবায়োলজির বেসিক ম্যানুয়াল। উপলভ্য: আইকটিএসএল.এন.
- মুউজ পি, সেরসেনাদো ই, রদ্রেগিজ-ক্রিক্সেমস এম, ডাজ এমডি, ভিসেন্টে টি, বোজা ই। প্রস্রাব সংস্কৃতির রুটিনে সিএলইডি আগর বিকল্প। একটি সম্ভাব্য এবং তুলনামূলক মূল্যায়ন। মাইক্রোবায়ল ইনফ্যাক্ট ডিস্ক নির্ণয় করুন। 1992; 15 (4): 287-90।
- গার্সিয়া পি, পেরেসিস এফ, ফার্নান্দেজ ডেল ব্যারিও এম (1994)। ব্যবহারিক ক্লিনিকাল মাইক্রোবায়োলজি। ক্যাডিজ বিশ্ববিদ্যালয়, ২ য় সংস্করণ। ইউসিএ পাবলিকেশন পরিষেবা।