স্ট্যান্ডার্ড আগর পুঁতি: যুক্তি, প্রস্তুতি এবং ব্যবহার - জীববিদ্যা - 2025

মান গণনা Agar একটি কঠিন, অ-নির্বাচনী সংস্কৃতি মাঝারি, পানীয় জল, বর্জ্য জল, দুগ্ধ পানীয়, অন্যান্য খাদ্য মধ্যে নমুনা এ বায়ুজীবী মাইক্রোবিয়াল লোড বর্তমানে রাশিকরণ জন্য নির্মিত হয়েছে। ইংলিশ প্লেট কাউন্ট অ্যাগ্রারে সংক্ষিপ্ত আকারের জন্য এই মাধ্যমটি পিসিএ আগর নামেও পরিচিত। এটি 1953 সালে বুচবাইন্ডার, বারিস এবং গোল্ডস্টেইন দ্বারা তৈরি করা হয়েছিল।

স্ট্যান্ডার্ড গণনা আগর মাঝারিটি খামির নিষ্কাশন, ট্রিপটিন, গ্লুকোজ, আগর এবং পাতিত জল দিয়ে গঠিত। এই গঠনে মৌলিক পুষ্টির উপাদান রয়েছে যা বর্তমান বায়বীয় মাইক্রোবিয়াল লোডের বিকাশের জন্য অনুমতি দেয় না, দাবি করে না।

স্ট্যান্ডার্ড আগর গণনায় সিএফইউ গণনা করার জন্য দশমিক ডিলিউশন। সূত্র: কোয়ান্টিন গিসম্যান

যেহেতু মিডিয়ামটিতে বাধা থাকে না, ব্যাকটেরিয়াগুলি কোনও বিধিনিষেধ ছাড়াই বাড়তে পারে, এটি সাধারণ উপনিবেশ গণনার জন্য আদর্শ করে তোলে। যাইহোক, প্লেট পরিমাপের কৌশল উপস্থিত সমস্ত ব্যাকটিরিয়া সনাক্ত করতে পারে না, কেবল পরিবেশগত অবস্থার অধীনে বর্ধিত করতে সক্ষম এমন ব্যক্তিরা যেখানে বীজযুক্ত মান গণনা আগর সাবলীল হয়।

এই অর্থে, প্লেট পরিমাপের কৌশলটি সাধারণত বায়বীয় মেসোফিলিক ধরণের ব্যাকটেরিয়ার পরিমাণ নির্ধারণ করতে চেষ্টা করে, অর্থাৎ যারা 25 থেকে 40 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডের মধ্যে তাপমাত্রায় বিকাশ করে, এটি সর্বোত্তম বৃদ্ধির তাপমাত্রা 37 ডিগ্রি সে। ।

এই ব্যাকটিরিয়া গ্রুপটি অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ, কারণ মানুষের বেশিরভাগ রোগজীবাণু সেখানে পাওয়া যায়।

এটি লক্ষ করা উচিত যে কখনও কখনও খাবারে উপস্থিত সাইকোফিলিক ব্যাকটেরিয়াগুলির পরিমাণ নির্ধারণ করা আকর্ষণীয় হতে পারে। এই ব্যাকটিরিয়াগুলি হ'ল যা নিম্ন তাপমাত্রায় বেড়ে যায় (<20 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেড) এবং রেফ্রিজারেটেড থাকা সত্ত্বেও, খাদ্য দ্রুত পচে যাওয়ার জন্য দায়ী।

তেমনি, থার্মোফিলিক ব্যাকটিরিয়া, যা 50 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেড থেকে 80 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেড বা তার বেশিের মধ্যে সীমাবদ্ধ হয়, নির্দিষ্ট খাবার যেমন ডাবাকজাত খাবারে গুরুত্বপূর্ণ হতে পারে।

মাইক্রোবিয়াল পরিমাণ নির্ধারণ কলোনী ফর্মিং ইউনিট (সিএফইউ) প্রতি গ্রাম বা নমুনার মিলিলিটারে প্রকাশ করা হয়।

ভিত্তি

ইস্ট এক্সট্রাক্ট, ট্রিপটাইন এবং গ্লুকোজ হিসাবে ভাল অণুজীবের বৃদ্ধির জন্য প্রয়োজনীয় পুষ্টি সরবরাহ করার জন্য স্ট্যান্ডার্ড গণনা মাধ্যমটি অ-রোহিষ্ণু এ্যারোবিক ব্যাকটেরিয়াগুলির সফল বৃদ্ধির জন্য ডিজাইন করা হয়েছে।

অন্যদিকে, মাঝারিটির হালকা রঙ এবং স্বচ্ছ চেহারা রয়েছে, এ কারণেই এটি গভীর বীজ পদ্ধতি (প্লেট ingালাই) দ্বারা বিকাশিত কলোনীগুলির দর্শন জন্য আদর্শ।

ড্রিগালস্কি স্প্যাটুলা পৃষ্ঠতল বীজ পদ্ধতি দ্বারা কলোনী গণনাও সম্ভব।

যখন মাইক্রোবিয়াল লোড বেশি হয়, তখন অধ্যয়নের নমুনার দশমিক ডিলিউশনগুলি সিএফইউগুলি গণনা করতে সক্ষম হতে হবে।

এটি লক্ষ করা উচিত যে আমেরিকান পাবলিক হেলথ অ্যাসোসিয়েশন (এপিএইচএ) এরোবিক মেসোফিলগুলি গণনার জন্য এই মাধ্যমটি সুপারিশ করেছে।

প্রস্তুতি

পানিশূন্য মাধ্যমের 23.5 গ্রাম ওজন এবং পাত্রে জলে এক লিটার দ্রবীভূত করুন। সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত করতে, মিশ্রণটি সেদ্ধ না হওয়া পর্যন্ত ঘন ঘন নাড়তে দিয়ে গরম করা উচিত। পরবর্তী পরবর্তী পদক্ষেপগুলি ব্যবহারের জন্য বপনের কৌশলটির উপর নির্ভর করে।

-ালা-প্লেট কৌশল জন্য

পরীক্ষার টিউবগুলিতে 12 থেকে 15 মিলি বিতরণ করে বিতরণ করুন। এরপরে, 15 মিনিটের জন্য 121 ডিগ্রি সেলসিয়াসে একটি অটোক্লেভে জীবাণুমুক্ত করে। একটি ব্লকের আকারে উল্লম্বভাবে শক্ত করার মঞ্জুরি দিন। ব্যবহার না করা পর্যন্ত ফ্রিজে রেখে দিন।

আপনি যখন এটি ব্যবহার করতে যাচ্ছেন তখন প্লাগটি দ্রবীভূত করুন। একবার গলে গেলে, নমুনাগুলি প্রস্তুত হওয়ার সময় এটি 44-47 ডিগ্রি সেলসিয়াসে একটি জলে স্নানে রাখুন।

পৃষ্ঠ বপন জন্য

121 ডিগ্রি সেলসিয়াসে একটি অটোক্লেভে মাঝারিটি নির্বীজন করুন এবং তারপরে জীবাণুমুক্ত পেট্রি থালাগুলিতে 20 মিলি বিতরণ করুন। দৃ until়তর হওয়া, উল্টানো এবং ব্যবহার না করা পর্যন্ত ফ্রিজে রেখে দিন।

টেম্পার প্লেট ব্যবহারের আগে। মাধ্যমের পিএইচ 7.0 ± 0.2 হতে হবে।

ব্যবহার

জল এবং খাবারের জীবাণুবিজ্ঞানের বিশ্লেষণের সময় বায়বীয় মেসোফিলিক গণনা কৌশলটিতে স্ট্যান্ডার্ড কাউন্ট আগর ব্যবহৃত হয়। অ্যারোবিক মেসোফাইলগুলির গণনা প্রয়োজনীয়, যেহেতু এটি অধ্যয়নের অধীনে নমুনার স্যানিটারি গুণমান নির্ধারণ করে।

এই কৌশলটির প্রয়োগ (এই মাধ্যমটি ব্যবহার করে) তাদের পরিমিতকরণের জন্য বিচ্ছিন্ন উপনিবেশগুলির ম্যাক্রোস্কোপিক ভিজ্যুয়ালাইজেশনের অনুমতি দেয়।

প্লেট pourালা কৌশল (গভীরতা বপন)

-Process

কৌশলটি নিম্নলিখিতটি নিয়ে গঠিত:

1) উপস্থিত ব্যাকটিরিয়াগুলি পুনরায় বিতরণের জন্য নমুনাকে একত্রিত করুন।

2) প্রাথমিক স্থগিতকরণ একটি নির্বীজন বোতল বা ব্যাগে তৈরি করা হয়, 90 মিলিলিটার (10 ^-1) এর 90 মিলিতে 10 জিআর বা 10 মিলি নমুনার অনুপাতকে সম্মান করে ।

3) প্রাথমিক স্থগিতাদেশ থেকে, প্রাসঙ্গিক দশমিক ডিলিউশনগুলি নমুনার ধরণের উপর নির্ভর করে তৈরি করা হয়। উদাঃ (10 ^-2, 10 ^-3, 10 ^-4)। পেপটোন জল বা ফসফেট বাফার দিয়ে সমাধানগুলি করা হয়।

এটি করার জন্য, প্রাথমিক স্থগিতাদেশের 1 মিলি নিয়ে যান এবং এটি 9 মিলি মিশ্রণে রাখুন, প্রয়োজনে হতাশাগুলি চালিয়ে যান, এখন 10 ^-2 মিশ্রণের 1 মিলি গ্রহণ করা ইত্যাদি।

4) প্রতিটি মিশ্রণের 1 মিলি নিন এবং খালি জীবাণুমুক্ত পেট্রি খাবারে রাখুন।

5) প্রতিটি প্লেটে 12 থেকে 15 মিলি স্ট্যান্ডার্ড গণনা আগর যোগ করুন পূর্বে গলে এবং 44 - 47 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে স্থির হন

6) আগর ধরে নমুনাটি সমানভাবে বিতরণ করার জন্য প্লেটগুলি আস্তে আবর্তিত করুন এবং এটি দৃ solid় করার অনুমতি দিন।

7) প্লেটগুলি উল্টে দিন এবং 24 থেকে 48 ঘন্টা ধরে এয়ারোবায়োসিসে 37 ডিগ্রি সে।

8) সময় শেষে, প্লেটগুলি পরীক্ষা করা হয় এবং কল্পনাগুলি হ্রাস করা গর্তে গণনা করা হয় যা এটির অনুমতি দেয়। 30 থেকে 300 সিএফইউর মধ্যে থাকা এই প্লেটগুলি গণনার জন্য বেছে নেওয়া হয়েছে।

গণনা ম্যানুয়ালি করা যেতে পারে বা আপনি কলোনির কাউন্টার সরঞ্জামগুলি ব্যবহার করতে পারেন।

নমুনা প্রতি মিলি মঞ্জুরিপ্রাপ্ত মানগুলি নিয়ন্ত্রিত হয় সেগুলির উপর নির্ভর করে এক দেশ থেকে অন্য দেশে পরিবর্তিত হতে পারে।

- ইউএফসি এর গণনা

সাধারণ গণনা নিম্নলিখিত সূত্র ব্যবহার করে করা হয়:

সিএফইউগুলির পরিমাণ নির্ধারণের সাধারণ গণনার জন্য সূত্র। উত্স: মেডিসিন জাতীয় খাদ্য প্রশাসন ও খাদ্য প্রযুক্তি (এএনএমএটি)। খাদ্যের মাইক্রোবায়োলজিক বিশ্লেষণ, সরকারী বিশ্লেষণ পদ্ধতি, সূচক অণুজীবগুলি। 2014 ভলিউম 3. এ উপলব্ধ: anmat.gov.ar

1 বা 2 ডিজিটে ফলাফল প্রকাশ করুন, উপযুক্ত বেস 10 দ্বারা গুণিত করুন। উদাহরণ: যদি ফলাফলটি 16,545 হয় তবে এটি তৃতীয় অঙ্কের উপর ভিত্তি করে 17,000 হবে এবং এটি নিম্নলিখিত হিসাবে প্রকাশ করা হবে: 1.7 x 10 ⁴ । এখন, যদি ফলাফলটি 16,436 হয়, এটি 16,000 এর সাথে গোল করুন এবং 1.6 x 10 ⁴ প্রকাশ করুন ।

সারফেস বীজ কৌশল

-Process

-Inocular সরাসরি নমুনা 0.1 মিলি এটি তরল হলে, প্রাথমিক সাসপেনশন 10 ^-1 বা একটানা dilutions 10 ^-2, 10 ^-3 ইত্যাদি, একটি মান গণনা আগর প্লেটের কেন্দ্রে থাকে।

-ড্রিগালস্কি স্পটুলা বা এল-আকৃতির কাচের রড দিয়ে সমানভাবে নমুনাটি বিতরণ করুন এটি 10 ​​মিনিটের জন্য বিশ্রাম দিন।

-প্লেটগুলি পরিবর্তন করুন এবং 24 থেকে 48 ঘন্টা ধরে 37 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে বায়বীয়ভাবে উত্সাহিত করুন।

-কলোনিগুলি গণনা করতে এগিয়ে যান, সেই প্লেটগুলি নির্বাচন করুন যা 20 - 250 সিএফইউর মধ্যে রয়েছে range

- ইউএফসি এর গণনা

গণনার জন্য, হ্রাস উপাদানটি প্রয়োগ করা হয়, যা বিপরীত। সংখ্যাটি 2 টি গুরুত্বপূর্ণ অঙ্কে গোল করা হয় (তৃতীয় অঙ্ক অনুসারে বৃত্তাকার) এবং বেস 10 এর শক্তিতে প্রকাশ করা হয় উদাহরণস্বরূপ, 224 সিএফইউ যদি পাতন (10 ^-1) ছাড়াই নমুনায় গণনা করা হয়, 22 x 10 ¹ সিএফইউ রিপোর্ট করা হয়, তবে চিত্রটি 225 হলে 23 x 10 ¹ সিএফইউ রিপোর্ট করা হয়।

এখন, যদি 199 সিএফইউ 10 ^-3 টি মিশ্রণে গণনা করা হয়, 20 x 10 ⁴ সিএফইউ রিপোর্ট করা হবে, তবে যদি 153 সিএফইউ একই দুর্বলতায় গণনা করা হয়, 15 x 10 ⁴ সিএফইউ রিপোর্ট করা হবে।

QA তে

স্ট্যান্ডার্ড গণনা সংস্কৃতি মাধ্যমটি পরিচিত শংসাপত্রযুক্ত স্ট্রেনগুলি ব্যবহার করে মূল্যায়ন করা যেতে পারে, যেমন: ইসেরিচিয়া কোলি এটিসিসি 8739, স্টাফিলোকক্কাস অ্যারিয়াস এটিসিসি 6538, ব্যাসিলাস সাবটিলিস এটিসিসি 6633, ল্যাক্টোব্যাকিলাস ফেরমেন্টাম এটিসিসি 9338, স্টেফিলোকক্কাস এপিডার্মিডিস এটিসিসি 12228, শিগেলা ফ্লেক্সার।

যদি সংস্কৃতি মাধ্যমটি সর্বোত্তম পরিস্থিতিতে থাকে তবে এল-ফারমেন্টাম ব্যতীত সকল ক্ষেত্রে সন্তোষজনক বৃদ্ধি আশা করা যায়, যার নিয়মিত ফলন হতে পারে।

সংস্কৃতি মাধ্যমের জীবাণু নির্ধারণের জন্য, প্রতিটি প্রস্তুত ব্যাচের দুটি বা দুটি প্লেট (ইনোকুলেশন ছাড়াই) 24 ঘন্টা 24 ঘন্টা ধরে বায়বায়োসিসে 37 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেড করা উচিত। এই সময়ের পরে, কোনও বৃদ্ধি বা রঙ পরিবর্তন মাঝারি হিসাবে পালন করা উচিত।

সীমাবদ্ধতা

-এগার একাধিকবার গলবেন না।

- প্রস্তুত রেডিয়ামটি 3 মাস পর্যন্ত স্থায়ী হয় যতক্ষণ না এটি একটি ফ্রিজে রাখা হয় এবং আলো থেকে সুরক্ষিত থাকে।

-এটি মাধ্যম চাহিদা বা অ্যানেরোবিক অণুজীবের জন্য উপযুক্ত নয়।

তথ্যসূত্র

1. জাতীয় ওষুধ প্রশাসন, খাদ্য ও চিকিত্সা প্রযুক্তি (এএনএমএটি)। খাদ্যের মাইক্রোবায়োলজিক বিশ্লেষণ, সরকারী বিশ্লেষণ পদ্ধতি, সূচক অণুজীবগুলি। 2014 ভলিউম 3. এ উপলব্ধ: anmat.gov.ar
2. ল্যাবরেটরিওস ডিফ্কো ফ্রান্সিসকো সোরিয়া মেলগিজো, এসএ প্লেট কাউন্ট আগর। ২০০৯.এটি উপলভ্য:
3. কনডা প্রোনাডিস ল্যাবরেটরিজ। এপিএইচএ এবং আইএসও 4833 অনুসারে স্ট্যান্ডার্ড পদ্ধতি আগর (পিসিএ) Available
4. ব্রিটানিয়া ল্যাবরেটরিজ। আগর প্লেট গণনা। 2015. উপলভ্য: ব্রিটিয়ানাল্যাব.কম
5. কামাচো এ, গাইলস এম, অর্টগেন এ, পালাও এম, সেরানানো বি এবং ভেলজকেজ ও। ২০০৯. খাবারের মাইক্রোবায়োলজিকাল বিশ্লেষণের কৌশলগুলি iques দ্বিতীয় সংস্করণ। রসায়ন অনুষদ, ইউএনএএম। মক্সিকো। উপলভ্য: Depa.fquim.unam