EMB Agar নির্বাচনী এবং ডিফারেনশিয়াল মাঝারি গ্রাম নেতিবাচক bacilli কঠিন সংস্কৃতি বিচ্ছিন্নতা, বিশেষত Enterobacteriaceae এবং অন্যান্য গ্রাম নেতিবাচক undemanding ব্যাকটেরিয়া জন্য ব্যবহৃত হয়। এটি ইওএম সংক্ষিপ্ত বিবরণ দ্বারাও পরিচিত, এটি ইওসিন-মিথিলিন নীলকে বোঝায়।
এই মাধ্যমটি 1916 সালে হল্ট-হ্যারিস এবং টিগু দ্বারা তৈরি করা হয়েছিল। এতে পেপটোন, ল্যাকটোজ, সুক্রোজ, ডিপোটাসিয়াম ফসফেট, আগর, ইওসিন, মিথিলিন নীল এবং জল রয়েছে। এটি ম্যাককনকি আগর এর সাথে খুব মিল, বিশেষত লেভিনের সংশোধিত ইএমবি আগর ব্যবহার করার সময়, এতে সুক্রোজ নেই।
ইএমবি আগরে এসেরিচিয়া কলির ধাতব গ্লস উত্স: উইকিমিডিয়া কমন্স থেকে কারমেন মোরেনো গঞ্জালেজ
বাস্তবে, প্রতিটি পরীক্ষাগার সিদ্ধান্ত নেয় যে তারা এক বা অন্যের সাথে কাজ করবে কিনা, যেহেতু তারা একই ফাংশনটি সম্পাদন করে, যদিও জৈব-রাসায়নিকভাবে এটি আলাদা।
এমনকি প্রোটিয়াস বংশধর দ্বারা উত্পাদিত উত্পাদনের ক্ষেত্রে এটি ক্লাসিক ম্যাককনকি আগরের মতো একই ত্রুটি রয়েছে back অতএব, এই ঘটনাটি এড়াতে, আগরের ঘনত্ব 5% পর্যন্ত বাড়ানো যেতে পারে।
ভিত্তি
নির্বাচক
ইএমবি আগর সূক্ষ্মভাবে নির্বাচনী কারণ এটিতে অ্যানিলিন রঞ্জক (ইওসিন এবং মিথিলিন নীল) থাকে যা বেশিরভাগ গ্রাম পজিটিভ ব্যাকটিরিয়া এবং কিছু উত্তেজনাপূর্ণ গ্রাম নেতিবাচক রডগুলির বৃদ্ধি রোধ করে, বাধা হিসাবে কাজ করে।
যাইহোক, এই আগরটির একটি অসুবিধা রয়েছে যে কিছু গ্রাম পজিটিভ ব্যাকটিরিয়া প্রতিরোধকারী পদার্থগুলির উপস্থিতি প্রতিরোধ করতে পারে এবং এন্টারোকোকাস ফ্যাকালিস এবং কিছু স্ট্যাফিলোকক্কাসের মতো ছোট বর্ণহীন পাঙ্কেট কলোনী হিসাবে বৃদ্ধি পেতে পারে।
কিছু খামিরগুলিও বেড়ে উঠতে পারে, যেমন ক্যান্ডিদা অ্যালবিকানস কমপ্লেক্স, যা খুব ছোট গোলাপী উপনিবেশ দেয়। নমুনা গভীর বীজযুক্ত থাকলে এই খামির থেকে ক্ল্যামাইডোস্পোরগুলি এমনকি বিকাশ করতে পারে।
পার্থক্যমুলক
অন্যদিকে, ইএমবি আগরও একটি ডিফারেন্সিয়াল মিডিয়াম, যেহেতু এই বর্ণগুলি একসাথে (ইওসিন এবং মিথিলিন নীল) অম্লীয় পিএইচ এ প্রিপিকেট গঠনের সম্পত্তি রাখে, তাই তারা এর উত্পাদনের সূচক হিসাবে কাজ করে।
সুতরাং, দুর্বলভাবে ল্যাকটোজ বা সুক্রোজ ফেরেন্টিং ব্যাকটিরিয়া 24 থেকে 48 ঘন্টার মধ্যে বেগুনি কলোনী তৈরি করে। উদাহরণস্বরূপ, জেনেরা ক্লিবিসেলা, এন্টারোব্যাক্টর এবং সেরটিয়া।
যে সমস্ত ব্যাকটিরিয়া ল্যাকটোজকে দৃ strongly়ভাবে উত্তেজিত করে, যেমন ইসেরিচিয়া কোলি বা সুক্রোজ, যেমন ইয়েরসিনিয়া এন্টারোকোলিটিকা বা প্রোটিয়াস পেনেরি, তারা সবুজ-কালো রঙের বৃষ্টিপাত তৈরি করে এবং এই প্রজাতিগুলিতে একটি বৈশিষ্ট্যযুক্ত ধাতব আলোকরশ্মির উপস্থিতি দেয়।
এটি লক্ষ করা উচিত যে যদি ইএমবি লেভাইন মিডিয়াম (সুক্রোজ ছাড়াই) ব্যবহার করা হয় তবে ইয়ারসিনিয়া এন্টারকোলোটিটিকা এবং প্রোটিয়াস পেনেরি সুস্পষ্ট উপনিবেশ তৈরি করবে।
ল্যাকটোজ বা সুক্রোজ গ্রাহিত করে না এমন ব্যাকটিরিয়া পেপটোনগুলির উপস্থিতি দ্বারা পুষ্ট হয় যা ব্যাকটিরিয়া বৃদ্ধির জন্য অ্যামিনো অ্যাসিড এবং নাইট্রোজেন সরবরাহ করে এবং সুস্পষ্ট উপনিবেশ তৈরি করে। উদাহরণস্বরূপ, সালমানেলা এবং শিগেলা জেনারটি অন্যদের মধ্যে রয়েছে।
তেমনি, এটিও লক্ষ করা জরুরী যে অ্যাকিনেটোব্যাক্টর জেনাস ল্যাভেন্ডার-নীল উপনিবেশ উপস্থাপন করতে পারে যদিও এটি ল্যাকটোজ ফেরামেন্টার বা সুক্রোজ নয়, তবে তার কোষের দেয়ালে মিথিলিন নীল ঠিক করার সম্পত্তি রয়েছে। এটি অন্যান্য জারণ ব্যাকটিরিয়াগুলির সাথেও ঘটতে পারে।
প্রস্তুতি
মূল ডিহাইড্রেটেড মাঝারিটি হালকা বেইজ রঙে।
এই সংস্কৃতি মাঝারিটি তৈরি করতে, ডিহাইড্রেটেড মিডিয়ামের 36 গ্রাম ওজন করতে হবে এবং এক লিটার পাতিত জলযুক্ত ফ্লাস্কে স্থগিত করতে হবে।
মিশ্রণটি 5 মিনিটের জন্য বিশ্রাম দেওয়ার পরে, ফ্লাস্কটি একটি তাপ উত্সে নিয়ে যান, জোরালোভাবে এবং অবিচ্ছিন্নভাবে মিশ্রিত হওয়া পর্যন্ত এটি সিদ্ধ হয় এবং পুরোপুরি দ্রবীভূত হয়।
এরপরে, ইতিমধ্যে দ্রবীভূত সংস্কৃতি মাধ্যমটি 15 মিনিটের জন্য 121 ° C এ অটোক্লেভ ব্যবহার করে জীবাণুমুক্ত করতে হবে।
সময় শেষে, এটি অটোক্লেভ থেকে সরানো হয় এবং সংক্ষিপ্তভাবে দাঁড়িয়ে থাকে। তারপরে, এখনও উষ্ণ (45-50 ° C), প্রতিটি জীবাণুমুক্ত পেট্রি থালায় 15-20 মিলি আগর পরিবেশন করা হয়। মাঝারিটি লিটমাস নীল হওয়া উচিত।
পরিবেশন করার পরে প্লেটগুলি আগরটি কিছুটা ঠাণ্ডা না হওয়া পর্যন্ত কিছুটা অনাবৃত হয়ে যায়। এরপরে এগুলি আচ্ছাদিত হয় এবং সম্পূর্ণরূপে দৃify় হওয়ার অনুমতি দেয়। পরবর্তীকালে, এগুলি উল্টানো প্লেটধারীদের মধ্যে সাজানো হয় এবং ব্যবহার না করা পর্যন্ত একটি ফ্রিজে (8 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেড) সংরক্ষণ করা হয়।
এই পদ্ধতিটি সংশ্লেষ এড়ানোর জন্য একটি ল্যামিনার ফ্লো হুড বা বনসন বার্নারের সামনে অগ্রাধিকার দেওয়া হয়।
এটা মনে রাখা জরুরী যে প্রতিটি বাণিজ্যিক ঘর সংস্কৃতির মাধ্যম প্রস্তুত করতে ওজন করার পরিমাণটি নির্দেশ করবে।
মাধ্যমের চূড়ান্ত পিএইচ অবশ্যই 7.2 ± 0.2 হতে হবে
অ্যাপ্লিকেশন
এই মাধ্যমটি প্রস্রাব এবং মল বপনে বা যে কোনও ধরণের ক্লিনিকাল নমুনা বপন করতে ব্যবহৃত হয়, বিশেষত যদি অ-উত্সাহী গ্রাম নেতিবাচক ব্যাসিলির উপস্থিতি সন্দেহ হয় যেমন এন্টারোব্যাক্টেরিয়া পরিবার সম্পর্কিত ব্যাসিলি, যা এই মাধ্যমটিতে খুব ভালভাবে বৃদ্ধি পায় grow
শিগেলা এবং সালমোনেলা জেনারার এন্টারোপ্যাথোজেনিক ব্যাকটিরিয়াগুলি তাদের বর্ণহীন বা সামান্য অ্যাম্বার কলোনী দ্বারা পৃথক করা হয়।
অন্যান্য অ-ল্যাকটোজ ফেরেন্টিং ব্যাসিলি যেমন এ্যারোমোনাস, সিউডোমোনাস, অ্যাকিনেটোব্যাক্টর এবং অন্যান্যদের মধ্যেও বৃদ্ধি পায়।
তেমনি, খাদ্য ও জলের অণুজীববিজ্ঞান বিশ্লেষণে এই মাধ্যমটি খুব কার্যকর, কারণ কলিফর্মগুলির নির্ধারণের সম্পূর্ণ নিশ্চিতকরণ পর্বের জন্য এটি আদর্শ, যেহেতু টার্বিড ইসি ব্রোথগুলি থেকে ই কোলির উপস্থিতি সংক্ষিপ্তকরণের জন্য is সর্বাধিক সম্ভাব্য নম্বর প্রযুক্তি (এমপিএন)।
QA তে
নতুনভাবে প্রস্তুত সংস্কৃতি মাধ্যমটি ভালভাবে কাজ করছে কিনা তা যাচাই করতে, কলোনিগুলির বৈশিষ্ট্যগুলি পর্যবেক্ষণ করতে এবং প্রত্যাশার ভিত্তিতে তারা যাচাই করে তা যাচাই করতে নিয়ন্ত্রণ স্ট্রেনগুলি রোপণ করা যেতে পারে।
এটির জন্য এটিসিসির স্ট্রেন বা ই-কোলি, এন্টারোব্যাক্টর এয়ারোজিনস, ক্লেবিসিলা এসপি, সালমনেল্লা টাইফিমিউরিয়াম, শিগেলা ফ্লেক্সনারি, সিউডোমোনাস আরুগিনোসা এবং কিছু গ্রাম পজিটিভ ব্যাকটিরিয়া, যেমন এস অরিয়াস ব্যবহার করা যেতে পারে।
ই কলি একটি সবুজ ধাতব দীপ্তি সহ ভাল বিকাশযুক্ত নীল-কালো উপনিবেশ তৈরি করবে বলে আশা করা হচ্ছে। অন্যদিকে, এন্টারোব্যাক্টর এয়ারোজেনস এবং ক্লিবিসেলা এসপি ভাল বিকাশযুক্ত নীল-কালো মিউকাস কলোনী দেয়।
অন্যদিকে, সালমোনেলা টাইফিমিউরিয়াম এবং শিগেলা ফ্লেক্সনারির অবশ্যই অবশ্যই বৃহৎ উপনিবেশ তৈরি করতে হবে, বর্ণহীন বা সামান্য অ্যাম্বার রঙের সাথে।
অবশেষে, সিউডোমোনাস অ্যারুগিনোসা জেনাসটি অনিয়মিত আকারের বর্ণহীন কলোনী হিসাবে বৃদ্ধি পায়, যখন গ্রাম পজিটিভ ব্যাকটিরিয়া খুব ছোট উপনিবেশের সাথে পুরোপুরি বাধা বা বিরলভাবে বৃদ্ধি পেতে হবে।
সর্বশেষ ভাবনা
কখনও কখনও নির্বীজনিত কারণে মাঝারি কমলা রঙ দেখিয়ে মিথিলিন নীলকে হ্রাস করতে হয়। মিথিলিন নীলটিকে বেগুনি রঙের জারণ এবং পুনরুদ্ধার করার জন্য, রঙটি পুনরুদ্ধার হওয়া অবধি হালকাভাবে মিশ্রিত করতে হবে।
এছাড়াও, জীবাণুমুক্ত করার পরে রঞ্জক বৃষ্টিপাত হতে পারে, তাই পেট্রি খাবারগুলি পরিবেশন করার আগে এটি ভালভাবে মিশ্রিত করা উচিত।
তথ্যসূত্র
- কামাচো এ, গাইলস এম, অর্টগেন এ, পালাও এম, সেরানানো বি এবং ভেলজকেজ ও। ২০০৯. খাবারের মাইক্রোবায়োলজিকাল বিশ্লেষণের কৌশলগুলি iques দ্বিতীয় সংস্করণ। রসায়ন অনুষদ, ইউএনএএম। মক্সিকো।
- পেরানুর পোল্ট্রি ফার্ম থেকে ব্রয়লার মুরগী থেকে বিচ্ছিন্নভাবে সম্ভাব্য প্যাথোজেনিক এসচেরিচিয়া কোলি স্ট্রেনগুলির বৈশিষ্ট্য এবং বিতরণ ক্যারানজা সি, লেন আর, ফ্যালাকন এন। রেভ। তদন্ত। চিকিত্সা। পেরু 2012 23 (2): 209-219। উপলভ্য: scielo.org।
- পরীক্ষাগারগুলি কনডা এসএ ইওসিন এবং মেথিলিন ব্লু আগর। 2010. এ উপলব্ধ: condalab.com
- ব্রিটানিয়া ল্যাবরেটরিজ। লেভাইন ইএমবি (ইওসিন এবং মেথিলিন ব্লু সহ) ২০১১.এটি উপলভ্য: ব্রিটেনিয়াবল.কম
- বিডি ল্যাবরেটরিজ। বিডি ইএমবি আগর (ইওসিন মেথিলিন ব্লু আগর), সংশোধিত। 2013. উপলভ্য: বিডি.কম
- কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। (৫ ম সংস্করণ) আর্জেন্টিনা, সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ
- ফোর্বস বি, সাহম ডি, ওয়েসফেল্ড এ। ২০০৯. বেইলি এবং স্কট মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 12 এড। আর্জেন্টিনা। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ