ইন্দো Agar বা ইন্দো মাঝারি একটি কঠিন মাঝারি, ডিফারেনশিয়াল এবং নির্বাচনশীলতা সংস্কৃতির কিছু ডিগ্রী সঙ্গে হল। অরি-ফার্মেন্টিং ব্যাকটিরিয়া থেকে ল্যাকটোজ-ফার্মেন্টিংয়ের পার্থক্য করার জন্য মূল সূত্রটি 1904 সালে এন্ডো তৈরি করেছিলেন। প্রথমদিকে এটি সালমোনেলা টাইফির বিচ্ছিন্নকরণের জন্য তৈরি করা হয়েছিল তবে পরে মাধ্যমের উদ্দেশ্যটি কলিফর্মগুলির সন্ধানে পরিণত হয়েছিল।
এন্ডো আগর নীতিটি রয়ে গেছে তবে বছরের পর বছর ধরে এর গঠনে অগণিত পরিবর্তন হয়েছে। বর্তমানে, মাধ্যমটি পশুর টিস্যু, ল্যাকটোজ, ডিপোটাসিয়াম হাইড্রোজেন ফসফেট, সোডিয়াম সালফাইট, বেসিক ফুচসিন এবং আগরের পেপটিক ডাইজেস্ট দ্বারা গঠিত।
একটি: ভার্জিন এন্ডো আগর বি: বীজ বীজ এন্ডো আগর, আগরের মাঝামাঝি সময়ে আপনি একটি E. কলি স্ট্রেনের ধাতব চকচকে লক্ষ্য করতে পারেন। উত্স: A: Strolch1983 / B: LenkaM M
মাধ্যমের মূল ব্যবহারটি এন্টারোব্যাকটেরিয়া পরিবার এবং অন্যান্য ঘনিষ্ঠ পরিবারগুলির সাথে সম্পর্কিত গ্রাম নেতিবাচক ব্যাসিলির বিচ্ছিন্নতা এবং পার্থক্যের সাথে যুক্ত হয়েছে।
দীর্ঘদিন ধরে এটি জল, দুগ্ধ এবং খাবারের নমুনায় কলিফর্ম সনাক্তকরণে ব্যবহৃত হয়েছিল, তবে আজ এই মাধ্যমের ব্যবহার অন্যরা অনুরূপ কার্যাবলী সহ বাস্তুচ্যুত হয়েছে। তবে কিছু মাইক্রোবায়োলজি পরীক্ষাগার ক্লিনিকাল উত্সের নমুনাগুলি থেকে এন্টারোব্যাকটেরিয়া বিচ্ছিন্ন করার জন্য এই আগর ব্যবহার করে।
ভিত্তি
এন্ডো আগরে পেপটোন রয়েছে যা অ্যামিনোডিং অণুজীবের বৃদ্ধির জন্য প্রয়োজনীয় অ্যামিনো অ্যাসিড, নাইট্রোজেন, কার্বন এবং শক্তির উত্স হিসাবে কাজ করে।
অন্যদিকে, আগরের সামান্য নির্বাচনী চরিত্রটি সোডিয়াম সালফাইট এবং বেসিক ফুচসিন সংযোজন দ্বারা সরবরাহ করা হয়; উভয় উপাদানই বেশিরভাগ গ্রাম পজিটিভ ব্যাকটিরিয়ার বৃদ্ধি আংশিক বা সম্পূর্ণ বাধা দেয়।
পার্থক্যযুক্ত চরিত্রটি ফেরমেন্টেবল কার্বোহাইড্রেটের উপস্থিতি দ্বারা প্রদত্ত হয়, যা এই ক্ষেত্রে ল্যাকটোজ এবং বেসিক ফুচসিন, যা পিএইচ সূচক হিসাবেও কাজ করে।
গ্রামে নেগেটিভ ব্যাকটিরিয়াগুলি যা এই আগরে বেড়ে ওঠে এবং ল্যাকটোজের গাঁজন করতে সক্ষম, তারা শক্তিশালী গোলাপী উপনিবেশ তৈরি করবে; ইশেরিচিয়া কোলির প্যাথোগোমোমনিক হওয়ায় একটি গাides় লাল সবুজ বর্ণের ধাতব দীপ্তি সহ গা red় লাল উপনিবেশ গঠন। এটি কার্বোহাইড্রেট ফারমেন্টেশন থেকে অ্যাসিডের উচ্চ উত্পাদন কারণে হয়।
এটি লক্ষ করা উচিত যে উপনিবেশগুলির চারপাশের মাঝারিটি একটি শক্তিশালী গোলাপী রঙে পরিণত হয়। যেখানে অ-ল্যাকটোজ ফেরেন্টিং গ্রাম নেতিবাচক রডগুলি মাঝারি বা বর্ণহীন বর্ণের মতো ফ্যাকাশে গোলাপী কলোনি তৈরি করে।
ডিপোটাসিয়াম হাইড্রোজেন ফসফেট মাঝারিটির পিএইচকে ভারসাম্য দেয় এবং আগর এমন উপাদান যা দৃ the় ধারাবাহিকতা সরবরাহ করে।
প্রস্তুতি
এন্ডো আগর
ডিহাইড্রেটেড মিডিয়ামের 41.5 গ্রাম ওজন এবং 1 লিটার পাতিত পানিতে দ্রবীভূত করুন। মাঝারিটি সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত না হওয়া পর্যন্ত মিশ্রণটি ঘন ঘন আলোড়ন দিয়ে গরম করুন। 15 মিনিটের জন্য 15 এলবি চাপে, 121 ডিগ্রি সেলসিয়াসে একটি অটোক্লেভে জীবাণুমুক্ত করুন।
অটোক্লেভ থেকে অপসারণ করার সময়, প্রায় 45-50 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় শীতল হতে দিন, পরিবেশন করার আগে মিশ্রণটি একত্রিত করার জন্য ঝাঁকুনি দিন। জীবাণুমুক্ত পেট্রি থালা মধ্যে 20 মিলি.ালা।
রেফ্রিজারেটরে সংরক্ষণের আগে প্লেটগুলিকে দৃify়তর, উল্টানো এবং একটি প্ল্যাকেরোতে বা অন্ধকার কাগজ দিয়ে মোড়ানো মঞ্জুরি দিন। এটি সরাসরি আলো থেকে প্রস্তুত মাধ্যমকে রক্ষা করা খুব গুরুত্বপূর্ণ। আপনার প্রয়োজনের সঠিক পরিমাণ প্রস্তুত করা একটি সেরা অনুশীলন।
যদি একটি ফ্রিজে সংরক্ষণ করা হয়, প্লেটগুলি ব্যবহারের আগে উত্তপ্ত হতে দেওয়া উচিত।
মাঝারিটির পিএইচ 7.2 থেকে 7.6 এর মধ্যে হওয়া উচিত এবং প্রস্তুত মাধ্যমের রঙ ফ্যাকাশে গোলাপী।
এম-এন্ডো আগর ভেরিয়েন্ট
এন্ডো আগর (এম-এন্ডো) এর আরেকটি সংস্করণ রয়েছে যা ম্যাকার্থি, ডেলা এবং গ্রাসোর সূত্র অনুসরণ করে, এতে আরও যৌগিক থাকে এবং প্রস্তুতির আকারে পরিবর্তিত হয়।
এই রূপটিতে রয়েছে: ল্যাকটোজ, ট্রিপটোজ, কেসিনের এনজাইমেটিক ডাইজেস্ট, প্রাণীর টিস্যুগুলির এনজাইমেটিক ডাইজেস্ট, সোডিয়াম ক্লোরাইড, ডিবাসিক পটাসিয়াম ফসফেট, সোডিয়াম সালফাইট, ইস্ট এক্সট্র্যাক্ট, মনোব্যাসিক পটাসিয়াম ফসফেট, বেসিক ফুচিন, সোডিয়াম ডিঅক্সায়োলট, লরিল সালফেট সোডিয়াম এবং আগর
এই ক্ষেত্রে, ডিহাইড্রেটেড মিডিয়ামের 51 গ্রাম ওজন হয় এবং 1 লিটার পাতিত পানিতে 20 মিলি ইথানল থাকে suspended
মাঝারিটি সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত হওয়া পর্যন্ত নাড়াচাড়া করার সময় কিছুটা গরম করুন। এটি অত্যধিক গরম করা উচিত নয় এবং অটোোক্লেভ করা উচিত নয়। মিশ্রণটি সমজাতীয় হয়ে গেলে, জীবাণুমুক্ত পেট্রি খাবারে পরিবেশন করুন এবং দৃ solid় করতে দিন।
ব্যবহার
কিছু দেশে, এটি এখনও খাদ্য এবং জলের নমুনায় মোট এবং মলদ্বার কলিফর্মগুলি গণনা করতে ব্যবহৃত হয়, বিশেষত ফেচাল দূষণের প্রধান সূচক হিসাবে এসচেরিচিয়া কোলির উপস্থিতি।
আমেরিকান জনস্বাস্থ্য সমিতি (এপিএইচএ) দ্বারা জীবাণুমুক্তকরণ এবং বর্জ্য জল চিকিত্সা কর্মসূচির উপর নজরদারি ও নিয়ন্ত্রণের পাশাপাশি পানীয় জলের গুণমানের মূল্যায়নের জন্য এম-এন্ডো আগরকে সুপারিশ করা হয়।
সর্বাধিক ব্যবহৃত পদ্ধতি হ'ল ঝিল্লি পরিস্রাবণ, 2 থেকে 4 ঘন্টা লরিল সালফেট ব্রোথের সাথে নমুনা সমৃদ্ধ করার পরে।
মেঘাচ্ছন্ন ইসি ব্রোথগুলি থেকে ই কোলির উপস্থিতি সংশোধন করার জন্য সম্পূর্ণ নিশ্চিতকরণের পর্যায়ে সর্বাধিক সম্ভাব্য সংখ্যা কৌশল (এমপিএন) দ্বারা খাদ্য এবং জলের জীবাণুবিজ্ঞান বিশ্লেষণে এটি ইএমবি আগরের বিকল্প হিসাবেও ব্যবহার করা যেতে পারে।
QA তে
প্রস্তুত এন্ডো আগার ব্যাচের মান নির্ধারণের জন্য জ্ঞাত বা শংসাপত্রযুক্ত নিয়ন্ত্রণ স্ট্রেনগুলি বপন করা হয়।
এই উদ্দেশ্যে যে স্ট্রেনগুলি ব্যবহার করা যেতে পারে সেগুলির মধ্যে রয়েছে: এসেরিচিয়া কোলি এটিসিসি 25922, এসচেরিচিয়া কোলি এটিসিসি 11775, এন্টারোব্যাক্টর ক্লোসকেস এটিসিসি 13047, ক্লেবিসিলা নিউমোনিয়া এটিসিসি 13883, সালমনেল্লা টাইফিমুরিয়াম এটিসিসি 1407, প্রিটসিসি 111133 প্রোটোকস ।
স্ট্রেনগুলি ক্লান্তি দ্বারা বীজযুক্ত হয় এবং এয়ারোবায়োসিসে 24 ঘন্টা 37 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেড হয় inc
প্রত্যাশিত ফলাফলগুলি হ'ল:
- ইসেরিচিয়া কোলির জন্য: ধাতব দীপ্তি সহ শক্তিশালী লাল উপনিবেশ।
- ই ক্লোকা এবং কে নিউমোনিয়ের জন্য উপনিবেশগুলি গোলাপী মিউকয়েড হওয়া উচিত।
- এস টাইফিমুরিয়াম, এস ফ্লেক্সনারী এবং পি। মীরাবিলিসের ক্ষেত্রে, উপনিবেশগুলি সাধারণত ফ্যাকাশে গোলাপী বা বর্ণহীন।
- অবশেষে, ই। ফ্যাকালিস আংশিকভাবে বাধাগ্রস্ত হবে বলে আশা করা হচ্ছে, সুতরাং এর বৃদ্ধি অবশ্যই খুব ছোট, শক্তিশালী গোলাপী উপনিবেশের সাথে কম হতে হবে।
সীমাবদ্ধতা
- ইন্ডো মিডিয়ামটিতে নিম্ন নির্বাচনী শক্তি রয়েছে, সুতরাং, স্টাফিলোকক্কাস, এন্টারোকোকাস এবং এমনকি ইয়েস্টের মতো কিছু গ্রাম পজিটিভ অণুজীবগুলিও বৃদ্ধি পেতে পারে।
- এন্টারোব্যাক্টেরিয়াসি পরিবারে অন্তর্ভুক্ত অন্য কোনও ব্য্যাসিলি এই মিডিয়ামে যেমন সিউডোমোনাস এসপি এবং এরোমোনাস এসপি বিকাশ করতে পারে। এই স্ট্রেনের বৈশিষ্ট্যগুলি বর্ণহীন অনিয়মিত কলোনী।
এই প্রস্তুত মাধ্যমটি আলোর প্রতি খুব সংবেদনশীল, তাই এটির দীর্ঘায়িত এক্সপোজারটি সূচক সিস্টেমকে অবনতি করে, অপরিবর্তনীয়ভাবে মাঝারিটিকে ক্ষতিগ্রস্থ করে।
- মাধ্যমের উপাদানগুলি কার্সিনোজেনিক হিসাবে বিবেচিত হয়, তাই সরাসরি যোগাযোগ এড়ানো উচিত should
- ডিহাইড্রেটেড মাধ্যমটি খুব হাইড্রোস্কোপিক এবং ঘরের তাপমাত্রায় অবশ্যই এটির মূল পাত্রে রাখতে হবে, শক্তভাবে বন্ধ এবং শুকনো পরিবেশে।
তথ্যসূত্র
- বিডি ল্যাবরেটরিজ। এন্ডো আগর। 2013. উপলভ্য: বিডি.কম
- নিওজন ল্যাবরেটরিজ এম এন্ডো আগর। এখানে পাওয়া যায়: Foodafety.neogen.com
- এন্ডো আগর। উইকিপিডিয়া, মুক্ত বিশ্বকোষ থেকে. 7 সেপ্টেম্বর 2017, 08:27 ইউটিসি। 28 ফেব্রুয়ারী 2019, 22:55। উপলভ্য: en.wikedia।
- মার্ককে ল্যাবরেটরি। এন্ডো আগর। 2019. উপলভ্য: Merckmillipore.com
- টেকনিক্যাল শিট ল্যাবরেটরিজ। এম-ইন্দো আগর এলইএস। 2015. উপলভ্য: liofilchem.net