লিয়া (লাইসাইন আয়রন) আগর: ভিত্তি, প্রস্তুতি এবং ব্যবহার - জীববিদ্যা - 2025

Agar Lia (লাইসিন আয়রন) একটি বায়োকেমিক্যাল Enterobacteriaceae পরিবারের ব্যাকটেরিয়া সনাক্ত করতে ব্যবহার পরীক্ষা। এই মাধ্যমটি ফ্যালকো সূত্রের ভিত্তিতে এডওয়ার্ডস এবং ফিফ দ্বারা তৈরি করা হয়েছিল।

মূলত এই পরীক্ষাটি ছিল পেপটোনস, খামিরের নির্যাস, গ্লুকোজ, এল-লাইসিন, ব্রোমোক্রেসোল বেগুনি এবং পাতিত জলযুক্ত একটি ঝোল। এডওয়ার্ডস এবং ফিফ আগর-আগর, ফেরিক অ্যামোনিয়াম সাইট্রেট এবং সোডিয়াম থায়োসালফেট যুক্ত করেছিলেন।

লাইসাইন ডেকারবোক্লেসেশনের জন্য ইতিবাচক এবং নেতিবাচক পরীক্ষা। সূত্র: লেখক এমএসসি এর ফটো এবং ডায়াগ্রাম সম্পত্তি। মেরিলসা গিল

পরীক্ষায় মূলত এমাইনো অ্যাসিড এল-লাইসিনের কারবক্সিল গ্রুপের সাথে প্রতিক্রিয়া জানাতে সক্ষম এনজাইম লাইসাইন ডেকারবক্সিলাসের উপস্থিতি প্রদর্শন করে। এমাইনো অ্যাসিডের একটি নির্গমন এছাড়াও এনজাইম লাইসাইন ডায়ামিনেজের উপস্থিতির কারণে ঘটতে পারে।

অতিরিক্তভাবে, মাধ্যমের সংমিশ্রণ হাইড্রোজেন সালফাইড তৈরির জন্য কিছু ব্যাকটিরিয়াল জেনারার ক্ষমতা দেখায়। পরিশেষে, মাঝারিভাবে গ্যাসের প্রজন্মটি না তা পর্যবেক্ষণ করাও সম্ভব।

ভিত্তি

পেপটোনস এবং খামিরের নির্যাস

বেশিরভাগ সংস্কৃতি মিডিয়ার মতো লাইসাইন আয়রন আগরে এমন উপাদান রয়েছে যা ব্যাকটিরিয়া বৃদ্ধির জন্য প্রয়োজনীয় পুষ্টির উত্স সরবরাহ করে। এই উপাদানগুলি পেপটোন এবং ইস্ট এক্সট্র্যাক্ট দ্বারা প্রতিনিধিত্ব করা হয়।

গ্লুকোজ

তেমনি, এই আগরটিতে ফেরেন্টেবল কার্বোহাইড্রেট হিসাবে গ্লুকোজ রয়েছে। এন্টারোব্যাক্টেরিয়া পরিবারে সমস্ত ব্যাকটিরিয়া গ্লুকোজ গাঁজন হিসাবে পরিচিত।

এই পদক্ষেপটি গুরুত্বপূর্ণ, কারণ এটি মাঝারিটি এসিডাইজ করার জন্য দায়ী হবে, এনজাইম লাইসাইন ডেকারবক্সিলাস -If- এর স্তরটিতে কাজ করার জন্য এটি একটি প্রয়োজনীয় শর্ত।

কিছু ব্যাকটেরিয়াল জেনারায়, গ্লুকোজ ফ্রামেন্টেশনজনিত গ্যাস উত্পাদন লক্ষ্য করা যায়।

নলের মধ্যে আগর স্থানচ্যুত হওয়ার পরে, তার নীচে একটি খালি স্থান ছেড়ে দেওয়া বা মাঝারিটি দুটি বা আরও বেশি অংশে ভাঙ্গার মাধ্যমে গ্যাসটির প্রমাণ পাওয়া যায়।

এল-লাইসিন

লাইসাইন একবার ডিকারোবক্সিটলেটেড হয়ে গেলে, একটি ডায়ামিন (ক্যাডেভারিন) এবং কার্বন ডাই অক্সাইড গঠিত হয়।

কোনারজাইম পাইরিডক্সাল ফসফেটের উপস্থিতিতে ডেকারবক্সিলেশন ঘটে। এই প্রতিক্রিয়াটি অপরিবর্তনীয়।

PH নির্দেশক (ব্রোমোক্রেসোল বেগুনি)

বিভিন্ন প্রতিক্রিয়া দ্বারা মিডিয়ামে ঘটে যাওয়া সমস্ত পিএইচ পরিবর্তনগুলি বেগুনি ব্রোমোক্রেসোল পিএইচ সূচক দ্বারা সনাক্ত করা হয়।

এই অর্থে, যখন অ্যাসিডিফিকেশন হয় তখন মাঝারিটি হলুদ হয়ে যায় এবং যখন ক্ষার থাকে তখন মাঝারিটি মূল বেগুনি বা বেগুনি রঙে ফিরে আসে।

লাইসাইন ডিমিনেশন যখন লাইসাইন ডায়ামিনেজ এনজাইমের উপস্থিতির কারণে ঘটে তখন তলদেশে একটি লালচে বর্ণ তৈরি হয়, জেনেরা প্রোটিয়াস, প্রোভিডেনসিয়া এবং কিছু মরগানেলা প্রজাতির মধ্যে সাধারণত।

এটি এই কারণে ঘটেছিল যে নির্গমন প্রক্রিয়া চলাকালীন আলফা-কেটো-কার্বোনিক অ্যাসিড গঠিত হয়, যা অক্সিজেনের উপস্থিতিতে অ্যামোনিয়াম সিট্রেটের সাথে প্রতিক্রিয়া করে, যা বর্ণিত বর্ণের কারণ করে।

ফেরিক অ্যামোনিয়াম সাইট্রেট এবং সোডিয়াম থায়োসালফেট

অন্যদিকে, হাইড্রোজেন সালফাইড উত্পাদনকারী ব্যাকটেরিয়াগুলি সোডিয়াম থায়োসালফেট (সালফার উত্স) এবং ফেরিক অ্যামোনিয়াম সাইট্রেটের উপস্থিতি দ্বারা প্রমাণিত হবে, যা এইচ ₂ এস এর বিকাশকারী is

যে ব্যাকটিরিয়ায় এনজাইম থিওসালফেট রিডাক্টেজ রয়েছে তাদের মধ্যে সোডিয়াম থায়াসলফেট উপস্থিতিকে হ্রাস করে সালফাইট এবং হাইড্রোজেন সালফাইড (এইচ ₂ এস) গঠন করে কাজ করার ক্ষমতা রয়েছে ।

পরেরটি একটি বর্ণহীন গ্যাস, তবে লোহার লবণের সাথে প্রতিক্রিয়া জানালে এটি লৌহঘটিত ধাতব সালফাইড গঠন করে, যা একটি দ্রবীভূত যৌগ (দৃশ্যমান কালো বৃষ্টিপাত)।

তবে এই মাধ্যমের সাথে এইচ ₂ এস গঠনের ক্ষমতা খুব নির্ভরযোগ্য নয়, কারণ এইচ ₂ এস উত্পাদন করতে সক্ষম কিছু লাইসাইন ডেকারবক্সিলাস নেতিবাচক ব্যাকটিরিয়া কালো বৃষ্টিপাত তৈরি করবে না, কারণ মাঝারিটির অম্লতা হস্তক্ষেপ করে। অতএব, লোহা যুক্ত অন্যান্য মিডিয়াগুলির সাথে চেক করার পরামর্শ দেওয়া হচ্ছে।

পরীক্ষার ব্যাখ্যা

লাইসাইন ডেকারবক্সিলেশন

ইনকিউবেশন হওয়ার 24 ঘন্টা পরে টিউবগুলি পড়তে হবে, অন্যথায় প্রতিক্রিয়াটির ভুল ব্যাখ্যা করা এবং মিথ্যা নেতিবাচক প্রতিবেদন করার ঝুঁকি রয়েছে।

এটি অবশ্যই মনে রাখতে হবে যে প্রথম প্রতিক্রিয়া দেখা দেবে তা হ'ল গ্লুকোজের উত্তেজকতা, সুতরাং 10 থেকে 12 ঘন্টা পরে সমস্ত টিউব হলুদ হয়ে যাবে turn

যদি ইনকিউবেশন শেষে (24 ঘন্টা) বেগুনি বা বেগুনি রঙের পৃষ্ঠের একটি হলুদ ব্যাকগ্রাউন্ড পরিলক্ষিত হয় তবে প্রতিক্রিয়া নেতিবাচক। পৃষ্ঠের বেগুনি রঙ পেপটোন ব্যবহার করে মাঝারি ক্ষারীয়তার সাথে মিলে যায়।

একটি ইতিবাচক প্রতিক্রিয়া হ'ল নলটির নীচের অংশ এবং পৃষ্ঠটি সম্পূর্ণ বেগুনি রঙের হয়, এটি আসল রঙে ফিরে আসে।

সুতরাং, পরীক্ষার ইতিবাচকতা কে নির্ধারণ করে তা হ'ল মাধ্যমের ভিত্তি বা পটভূমি। রঙ সম্পর্কে সন্দেহ থাকলে, এটি একটি ইন-ইনকুলেশনড এলআইএ টিউবের সাথে তুলনা করা যেতে পারে।

লাইসিনের পরীক্ষা

লাইসাইন ডি্যামিনেশন দেখায় এমন একটি টিউবটিতে লালচে মেরুন পৃষ্ঠ এবং একটি হলুদ (অ্যাসিড) ব্যাকগ্রাউন্ড বা পুরো টিউব লালচে মেরুন থাকবে।

এই প্রতিক্রিয়াটি লাইজাইন ডেকারবক্সিল্যান্সনের জন্য নেতিবাচক হিসাবে ব্যাখ্যা করা হয় তবে লাইসাইন ডি্যামিনেশন জন্য ধনাত্মক।

এই প্রতিক্রিয়াটি বেজলে সংজ্ঞায়িত ও ব্যাখ্যা করা হয়।

হাইড্রোজেন সালফাইড উত্পাদন (এইচ

সমস্ত বা মাঝারি অংশে একটি কালো বৃষ্টিপাতের উপস্থিতি দ্বারা একটি ইতিবাচক প্রতিক্রিয়া পরিলক্ষিত হয়। সাধারণত বেভেল এবং বেসের প্রান্তের মধ্যে।

যদি টিউব জুড়ে বৃষ্টিপাত ঘটে, তবে এটি মাঝখানে ঘটে যাওয়া অন্যান্য প্রতিক্রিয়া প্রকাশ করবে না।

ফলাফল রেকর্ড

পরীক্ষার ব্যাখ্যার সময় ফলাফলগুলি নিম্নরূপ রেকর্ড করা হয়:

প্রথমে বেভেল পড়তে হবে, তারপরে নীচে বা ব্লক, তারপরে এইচ ₂ এস উত্পাদন এবং শেষ পর্যন্ত গ্যাসের উত্পাদন।

উদাহরণ: কে / এ + (-)। এর অর্থ:

• কে: ক্ষারীয় বেজেল (বেগুনি রঙ)
• উত্তর: অ্যাসিডিক পটভূমি (হলুদ), অর্থাত্ নেতিবাচক ডিকারোবক্সিলেশন প্রতিক্রিয়া এবং নেতিবাচক ডিমনেশন।
• +: হাইড্রোজেন সালফাইড উত্পাদন
• (-): গ্যাস ছাড়াই।

প্রস্তুতি

ডিহাইড্রেটেড আয়রন আগর লাইসাইন মাঝারি 35 গ্রাম ওজন এবং এটি এক লিটার পাত্রে পানিতে দ্রবীভূত করুন।

আগর সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত হওয়া পর্যন্ত উত্তাপ এটি করতে, এক ঘন্টার জন্য সিদ্ধ করুন, ঘন ঘন নাড়ুন। সুতির ক্যাপগুলি দিয়ে 13/100 টেস্ট টিউবে মাঝারি 4 মিলি বিতরণ করুন।

15 মিনিটের জন্য 121 ডিগ্রি সেলসিয়াসে একটি অটোক্লেভে জীবাণুমুক্ত করুন। অটোক্লেভ থেকে সরান এবং একটি কোণে দাঁড়ানোর অনুমতি দিন যাতে একটি গভীর বেস এবং একটি সংক্ষিপ্ত বেভেল থাকে।

একটি ফ্রিজে 2-8 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে স্টোর করুন ব্যাকটিরিয়া স্ট্রেন বপন করার আগে এটি গরম হতে দিন।

ডিহাইড্রেটেড মিডিয়ামের রঙ বেইজ এবং প্রস্তুত মিডিয়াম লালচে বেগুনি।

প্রস্তুত মাধ্যমের চূড়ান্ত পিএইচ 6.7 ± 0.2 হয়

মাঝারিটি পিএইচ 5.2 বা তার চেয়ে কম হলুদ হয়ে যায় এবং পিএইচ 6.5 বা তারপরে বেগুনি হয়।

অ্যাপ্লিকেশন

অন্যান্য জৈব-রাসায়নিক পরীক্ষার পাশাপাশি এই পরীক্ষাটি এন্টারোব্যাকটিরিসি পরিবারের ব্যাসিলি সনাক্তকরণের জন্য ব্যবহৃত হয়।

মাঝারিটি একটি সরল লুপ বা সুই দিয়ে বীজযুক্ত হয়, এক বা দুটি পাঙ্কচারগুলি নলের নীচে তৈরি করা হয়, এবং তারপরে মাঝারি পৃষ্ঠটি একটি জিগজ্যাগে স্কোর করা হয়।

বায়বায়োসিসে 35-30 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় 24 ঘন্টা ধরে রাখুন। যদি প্রয়োজন হয় তবে এটি আরও 24 ঘন্টার জন্য উত্সাহিত করা ছেড়ে যায়।

সালমনেল্লাস এসপি থেকে ল্যাকটোজ-নেতিবাচক সিট্রোব্যাক্টর প্রজাতিগুলির পার্থক্য করতে এটি মূলত কার্যকর।

উত্স: কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 5 তম সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।

তথ্যসূত্র

1. ম্যাক ফাদ্দিন জে। (2003)। ক্লিনিকাল গুরুত্বের ব্যাকটেরিয়া সনাক্তকরণের জন্য জৈব রাসায়নিক পরীক্ষা। তৃতীয় সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা। বুয়েনস আইরেস আর্জেন্টিনা।
2. ফোর্বস বি, সাহম ডি, ওয়েসফেল্ড এ (২০০৯)। বেইলি এবং স্কট মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 12 এড। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
3. কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 5 তম সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
4. ব্রিটানিয়া ল্যাবরেটরিজ। লাইসিন আয়রন আগর। 2015. উপলভ্য: ব্রিটিয়ানাল্যাব.কম
5. বিডি ল্যাবরেটরিজ। বিবিএল লাইসিন আয়রন আগর স্লেন্টস। 2007. বিডি.কম এ উপলব্ধ
6. ভালটেক ল্যাবরেটরিজ। মিডিয়াম এলআইএ ২০০৯.এটি উপলভ্য: andinamedica.com