মেলার হিন্টন আগর: ভিত্তি, প্রস্তুতি এবং ব্যবহার - জীববিদ্যা - 2025

মুলার Hinton আগার নির্বাচনী, কঠিন পুষ্টির মাঝারি, Agar মাংস আধান, peptone অ্যাসিড ছানাজাতীয় উপাদান, মাড় গঠিত এবং পাতিত জল থাকে। এই মাধ্যমটি বেশিরভাগ দ্রুত বর্ধমান ব্যাকটিরিয়ার জন্য দুর্দান্ত মাইক্রোবায়াল বৃদ্ধির অনুমতি দেয়।

এটি মূলত জন হাওয়ার্ড মেলার এবং জেন হিন্টন দ্বারা তৈরি করা হয়েছিল পুষ্টিগতভাবে চাহিদাযুক্ত ব্যাকটিরিয়া যেমন নাইজেরিয়া গনোরিয়া এবং নাইসেরিয়া মেনজিংটিডিসকে আলাদা করতে। তবে এর বৈশিষ্ট্যগুলির কারণে এটি অ্যান্টিবায়োটিকের প্রতি সংবেদনশীলতার অধ্যয়নের জন্য আদর্শ হিসাবে প্রমাণিত হয়েছিল, এটি নির্ভরযোগ্য এবং পুনরুত্পাদনযোগ্য ফলাফল সরবরাহ করে।

অ্যান্টিবায়োগ্রামগুলি (মেলার হিন্টন আগর)। সূত্র: এন.উইকিপিডিয়াতে গ্রাহাম দাড়ি

সুতরাং, মিরেলার হিন্টন আগর হ'ল ক্লিনিকাল এবং ল্যাবরেটরি স্ট্যান্ডার্ড ইনস্টিটিউট (সিএলএসআই) এবং অ্যান্টিমাইক্রোবায়াল সংবেদনশীলতা পরীক্ষা সম্পর্কিত ইউরোপীয় কমিটি কর্তৃক গৃহীত সংস্কৃতি মাধ্যম, কার্বি ডিস্ক বিস্তারের পদ্ধতি দ্বারা অ্যান্টিমাইক্রোবায়াল সংবেদনশীলতা পরীক্ষার সম্পাদনের জন্য এবং বাউইর।

ভিত্তি

অ-নির্বাচনমূলক পুষ্টিকর মাধ্যম হওয়ায় এটি বেশিরভাগ প্যাথোজেনিক ব্যাকটিরিয়ার বিকাশের জন্য দুর্দান্ত।

অন্যদিকে, এর সাধারণ রচনাটি তার উপর পদার্থগুলি সহজেই ছড়িয়ে দেয়, ডিস্ক বিস্তারের পদ্ধতি দ্বারা সংবেদনশীলতা পরীক্ষার জন্য প্রয়োজনীয় বৈশিষ্ট্য।

এর আর একটি বৈশিষ্ট্য হ'ল এতে স্বল্প পরিমাণে ইনহিবিটার রয়েছে, যা সালফোনামাইডস, ট্রাইমেথোপ্রিম এবং টেট্রাসাইক্লিনগুলি কার্যকরভাবে মূল্যায়ন করতে দেয়।

যাইহোক, এটি মনে রাখা উচিত যে মাঝারিটির যথাযথ কার্যকারিতা নিশ্চিত করতে অবশ্যই কিছু শর্ত পূরণ করতে হবে:

পিএইচ, সামনের গভীরতা এবং থাইমাইন, থাইমিডিন, সিএ ⁺⁺, এমজি ⁺⁺ এবং জেডএন ⁺⁺ এর উপযুক্ত ঘনত্বের সমন্বয় ।

আপনাকে এটিও জানতে হবে যে পদ্ধতিটি মানকৃত এবং তাই সমস্ত পরামিতিগুলি পূরণ করতে হবে, যেমন:

ইনোকুলামের ঘনত্ব, অ্যান্টিবায়োটিক ডিস্কগুলির ঘনত্ব এবং সংরক্ষণ, আগরটিতে উপযুক্ত সংখ্যক ডিস্কের স্থাপনা, একটি ডিস্কের সাথে অন্য একটি ডিস্কের মধ্যে দূরত্ব, নির্দিষ্ট অ্যান্টিবায়োটিকের কৌশলগত অবস্থান, বায়ুমণ্ডল, তাপমাত্রা এবং সময় সুপ্তাবস্থা।

প্রস্তুতি

ডিহাইড্রেটেড মেলার হিন্টন মিডিয়ামের 37 গ্রাম ওজন এবং 1 লিটার পাতিত পানিতে দ্রবীভূত করুন। দ্রবীভূতকরণে সহায়তা করার জন্য মাঝারিটি উত্তপ্ত করুন। 1 মিনিট সিদ্ধ করুন।

15 মিনিটের জন্য 121 ডিগ্রি সেলসিয়াসে নির্বীজন করতে অটোক্লেভ। অটোক্লেভ থেকে অপসারণ করার সময়, শীতল হওয়ার জন্য ফ্লাস্কটি 50 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে একটি জলে স্নানের মধ্যে রাখতে হবে। 25 থেকে 30 মিলি জীবাণুমুক্ত 10 সেমি ব্যাস পেট্রি থালা মধ্যে ourালা।

প্লেটগুলির গড় বেধ 4 মিমি (আদর্শ) হওয়া উচিত, 3-5 মিমি ব্যাপ্তি হতে পারে।

যদি মেলার হিন্টন আগরকে বেস হিসাবে ব্যবহার করে রক্ত ​​আগর প্রস্তুত করতে ইচ্ছুক হয় তবে প্লেটে পরিবেশন করার আগে 5% জীবাণুনাশক এবং ডিফিব্রিনেটেড মেষশাবকের রক্ত ​​.ালুন।

মাধ্যমের চূড়ান্ত পিএইচ 7.2 থেকে 7.4 এর মধ্যে হওয়া উচিত।

ব্যবহার না করা অবধি ফ্রিজে বিনিয়োগ এবং সঞ্চয় করুন। প্লেটটি ব্যবহারের আগে ঘরের তাপমাত্রায় আসার অনুমতি দিন।

প্রস্তুত মাধ্যমের রঙ হালকা বেইজ।

অ্যাপ্লিকেশন

এটি বেশিরভাগ দ্রুত বর্ধমান অ-চাহিদাজনিত রোগজীবাণুগুলির জন্য অ্যান্টিবায়োগ্রাম বা অ্যান্টিবায়োটিক সংবেদনশীলতা পরীক্ষা করতে ব্যবহৃত হয়।

যদি আগর রক্তের সাথে পরিপূরক হয় তবে এটি অণুজীবের চাহিদা যেমন অ্যান্টিবায়োগ্রাফ চালাতে ব্যবহার করা হয় যেমন: স্ট্রেপ্টোকোকাস নিউমোনিয়া, হেমোফিলাস এসপি, নাইসেরিয়া মেনিনজিটিডিস, অন্যদের মধ্যে। এটি লেজিওনেলা নিউমোফিলা বিচ্ছিন্ন করার জন্যও ব্যবহৃত হয়েছে।

অ্যান্টিবায়োগ্রাম কৌশল

অ্যান্টিবায়োগ্রোল করার আগে 1.5 x 10 ⁸ কোষের সমতুল্য একটি ব্যাকটেরিয়া দ্রবণ প্রস্তুত করতে হবে ।

এর জন্য, খাঁটি সংস্কৃতির 3 থেকে 4 টি কলোনী নেওয়া হয় এবং সয়াবিন ট্রাইপটিক্যাস ব্রোথ বা মেলার হিন্টন ব্রোথে 2 থেকে 6 ঘন্টা পর্যন্ত সেবন করা হয় এবং ঘনত্বকে জীবাণুমুক্ত স্যালাইনের দ্রবণ দিয়ে সামঞ্জস্য করা হয়, এটি একটি ম্যাক ফারল্যান্ড স্ট্যান্ডার্ডের সাথে তুলনা করে 0.5%।

যদি তারা অণুজীবের দাবি করে তবে কলোনীগুলি 0.5% ম্যাক ফারল্যান্ডের ঘনত্ব পর্যন্ত সরাসরি স্থগিত করা যেতে পারে। পরবর্তীকালে, মেলার হিন্টন প্লেট প্রস্তুত জীবাণুযুক্ত দ্রবণে জড়িত একটি সোয়াব দিয়ে বীজযুক্ত হয়।

এটি করার জন্য, সোয়াব দ্রবণে নিমজ্জিত হয় এবং তারপরে নলের দেয়ালের বিরুদ্ধে চাপ দিয়ে অতিরিক্ত তরল সরানো হয়। তত্ক্ষণাত্ পরে, সোয়াবটি পুরো পৃষ্ঠের উপর দিয়ে যায়, কোনও জায়গাই বাছাই না করে প্লেটটি কিছুটা আবর্তিত হয় এবং এটি আবার বীজ হয়। অপারেশন আরও 2 বার পুনরাবৃত্তি হয়।

10 মিনিটের জন্য দাঁড়াতে দিন এবং তারপরে একটি 24 মিমি ব্যবধান রেখে একটি জীবাণুবাহী ফোর্সস সহ অ্যান্টিবায়োটিক ডিস্কগুলি প্রবেশ করান। আগরটিতে প্রতিটি ডিস্ক স্থাপনের পরে, প্রতিটি ডিস্কটি ফোর্পসের সাহায্যে হালকাভাবে চাপুন যাতে তারা ভালভাবে মেনে চলে ensure

প্রক্রিয়া শেষ হয়ে গেলে, প্লেটটি উল্টানো হয় এবং 35 থেকে 33 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেড এয়ারোবায়োসিসে 16 থেকে 18 ঘন্টার জন্য উত্সর্গ করা হয়। যদি এটি একটি দাবি করা মাইক্রো অর্গানিজম হয় তবে এটি মাইক্রোইরোফিলিয়ার যোগ্যতা অর্জন করতে পারে এবং অ্যান্টিবায়োগ্রে যদি অক্সাসিলিন ডিস্ক থাকে তবে এটি 24 ঘন্টা পরে পড়া উচিত।

প্রতিটি হলোর ব্যাস পরিমাপ করতে একটি শাসক ব্যবহৃত হয়। ফলাফলগুলি মিমি রেকর্ড করা উচিত। পরবর্তীকালে, প্রাপ্ত মানগুলি বর্তমান সিএলএসআই ম্যানুয়াল দ্বারা প্রকাশিত কাটঅফ পয়েন্টগুলির সারণীর সাথে সম্পর্কিত হয়।

বাধা হলোর পরিমাপ। সূত্র: ইউএসসিডিসিপি, পিক্সনিও ডট কম

সংবেদনশীল (এস), অন্তর্বর্তী (আই), বা প্রতিরোধী (আর) হিসাবে হিসাবে রিপোর্ট হতে পারে হিসাবে রিপোর্ট করুন।

অ্যান্টিবায়োটিকগুলি বিচ্ছিন্ন মাইক্রো অর্গানিজম এবং সংক্রমণের ধরণ অনুসারে নির্বাচন করা হয়।

কখনও কখনও প্রতিরোধের ফিনোটাইপিক নিদর্শনগুলি প্রকাশ করার জন্য অ্যান্টিবায়োটিকের কৌশলগত স্থান অবশ্যই মাথায় রাখতে হবে।

মেলার হিন্টন আগরে কৌশলগত ডিস্ক স্থাপন ment

এন্টারোব্যাকটিরিয়ার জন্য, ক্লাভুল্যানিক অ্যাসিড ডিস্কটি তৃতীয় এবং চতুর্থ প্রজন্মের সিফালোস্পোরিনের বিপরীতে স্থাপন করা উচিত। একটি ডিমের আকারের সম্প্রসারণ নির্দেশ করে যে স্ট্রেনটি বর্ধিত বর্ণালী বিটা-ল্যাকটামেসেস (ইএসবিএল) উত্পাদনকারী। এর অর্থ হ'ল রোগীকে কোনও সিফালোস্পোরিন দিয়ে চিকিত্সা করা উচিত নয়।

ইসেরিচিয়া কোলি স্ট্রেনে প্রসারিত-বর্ণালী বিটা-ল্যাকটামেস (ইএসবিএল) উত্পাদনের ফেনোটাইপিক এক্সপ্রেশন। সূত্র: লেখক এমএসসি তোলা ছবি। মেরিলসা গিল

স্টাফিলোকক্কাসে ক্লিন্ডামাইসিন ডিস্কের (ডি-টেস্ট) সামনে এরিথ্রোমাইসিন বা অ্যাজিথ্রোমাইসিন ডিস্ক স্থাপন করা গুরুত্বপূর্ণ।

এরিথ্রোমাইসিনে একটি প্রতিরোধী হলো এবং ক্লাইন্ডামাইসিন হ্যালোতে সমতলতা ইঙ্গিত দেয় যে স্ট্রেন স্ট্রেইন ইনডুসিভ ক্লিন্ডামাইসিন রেজিস্ট্যান্স (আইসিআর) ধারণ করে। এর অর্থ হ'ল একটি ক্লিন্ডামাইসিন চিকিত্সা কার্যকর হবে না।

এন্টারোব্যাক্টেরিয়াসি এবং কিছু নন-ফার্মেন্টিং গ্রাম নেতিবাচক রডগুলিতে, তাজোব্যাক্টান সেল্টাজিডাইম, সিফোক্সিটিন, বা পাইপরাসিলিন ডিস্কগুলিতে 27 মিমি দূরত্বে একটি ইপিপেনেম ডিস্কের বিপরীতে মুখোমুখি হয় ind

ইমিপেনিমের মুখোমুখি ডিস্কগুলির একটিতে একটি সমতল হ্যালো ইনডুসিবেল এএমপি সি উপস্থিতি নির্দেশ করে

গঠনমূলক সি-এএমপি অনুসন্ধানের জন্য, 500 মিমি ক্লোক্সাসিলিন ডিস্কটি 25 মিমি দূরত্বে সেল্টাজিডাইম (30 µg) এবং সিফোট্যাক্সিম (30 µg) এর সাথে সম্মুখীন হয়। যে কোনও সিফালোস্পোরিনের একটি প্রশস্ত হালোটি ইতিবাচকতা নির্দেশ করে।

ক্লোক্সাসিলিন ডিস্কটি 18 মিমি দূরত্বের সাথে ফেনাইল বোরিক অ্যাসিড (400 µg) দ্বারা গর্ভে হোয়াটম্যান নং 6 ফিল্টার পেপারের 9 মিমি ডিস্ক দ্বারা প্রতিস্থাপন করা যেতে পারে। এটি আগেরটির মতোই ব্যাখ্যা করা হয়।

পরিশেষে, বিশেষত সিউডোমোনাস অ্যারুগিনোসায় ধাতববেটালেক্টামেসের উত্পাদন তদন্তের জন্য, ইথিলিন্ডাইমিনিটেট্যাসেটিক অ্যাসিড (EDTA 750)g) এর 10 µl এবং থায়োগ্লাইক্লিক অ্যাসিড (এসএমএ 300 µg) দ্বারা জন্মানো একটি ডিস্ক ব্যবহৃত হয়, যা ইপিপেনেম এবং মাইরোপিনেমের সাথে মুখোমুখি হয় 15 মিমি দূরত্বে।

যদি ইডিটিএ / এসএমএ ডিস্কের দিকে ইমিপেনেম বা মাইরোপেনিয়াম হলগুলি প্রশস্ত করা হয় তবে পরীক্ষাটি ইতিবাচক। এই ফলাফলটি অবশ্যই সংশোধিত হজ পরীক্ষার মাধ্যমে নিশ্চিত করতে হবে।

এই পদ্ধতিতে মেলার হিন্টন প্লেটে একটি Escherichia কলি এটিটিসিসি 25922 স্ট্রেন ইনোকুলেটেশন নিয়ে গঠিত। প্লেটের কেন্দ্রে একটি ইমিপেনেম ডিস্ক স্থাপন করা হয় এবং তারপরে ডিস্ক থেকে পেরিফেরি পর্যন্ত সন্দেহভাজন পি। অ্যারুগিনোসা স্ট্রেন দিয়ে একটি স্ট্রাইক তৈরি করা হয়। প্রতি প্লেট পর্যন্ত 4 টি স্ট্রেন পরীক্ষা করা যেতে পারে।

প্রসারিত চিহ্নের চারপাশে ইমিপেনিম হলোর বিকৃতি করার অঞ্চল থাকলে পরীক্ষাটি ইতিবাচক হবে।

ভ্রান্ত ফলাফলের কারণ

- দুর্বলভাবে সংরক্ষণ করা অ্যান্টিবায়োটিক ডিস্কগুলি মিথ্যা প্রতিরোধের উত্পাদন করতে পারে। উদাহরণস্বরূপ, অক্সাসিলিন ডিস্ক তাপমাত্রায় পরিবর্তনের জন্য খুব দুর্বল।

- নির্দেশিত নীচের মাধ্যমের একটি পিএইচ (অ্যাসিড) এমিনোগ্লাইকোসাইড এবং ম্যাক্রোলাইডগুলিতে ছোট মিথ্যা (মিথ্যা প্রতিরোধের ঝুঁকি), এবং পেনিসিলিন, টেট্রাসাইক্লিন এবং নভোবায়সিন (মিথ্যা সংবেদনশীলতার ঝুঁকি) এর বৃহত্তর হ্লোস উত্পাদন করে।

-যদি পিএইচ উপরে নির্দেশিত (ক্ষারীয়) উপরে থাকে তবে উপরে বর্ণিত প্রভাবগুলি বিপরীত হয়।

- উচ্চ থাইমাইন এবং থাইমিডিন ঘনত্বের সাথে মিডিয়ার একটি প্রভাব রয়েছে সালফোনামাইডস এবং ট্রাইমেথোপ্রিমের বাধা হ্যালোকে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করে।

- ক্যালসিয়াম এবং ম্যাগনেসিয়ামের উচ্চ ঘনত্ব সিউডোমোনাস অ্যারুগিনোসার স্ট্রেনের বিরুদ্ধে অ্যামিনোগ্লাইকোসাইডস, পলিমিক্সিন বি এবং টেট্রাসাইক্লিনগুলির মিথ্যা প্রতিরোধের উত্পাদন করে।

- ক্যালসিয়াম এবং ম্যাগনেসিয়ামের কম ঘনত্ব সিউডোমোনাস অ্যারুগিনোসার স্ট্রেনের বিরুদ্ধে অ্যামিনোগ্লাইকোসাইডস, পলিমিক্সিন বি এবং টেট্রাসাইক্লিনগুলির মিথ্যা সংবেদনশীলতা তৈরি করে।

- দস্তার উপস্থিতি কার্বাপেনেম ডিস্কগুলির ফলাফলগুলিকে প্রভাবিত করে (ইমিপেনেম, মাইরোপেনিয়াম এবং ইরটাপেনেম)।

- 3 মিমি নীচের মাঝারি দৈর্ঘ্যের বেধটি মিথ্যা সংবেদনশীলতা ফলাফল আনবে, যখন 5 এর উপরে বেধটি মিথ্যা প্রতিরোধের উত্পাদন করবে।

- অ্যান্টিবায়োগ্রামে ডিস্কের সংহতকরণটি বিকৃত হালস দেবে, যেহেতু অ্যান্টিবায়োটিকের স্রাব তাত্ক্ষণিক হয়।

- খুব দুর্বল ইনোকুলামগুলি ফলাফলগুলিকে প্রভাবিত করে, যেহেতু আগরগুলিতে অভিন্ন বা সঙ্গম বিকাশ হবে না, বাধা হ্যালোস পরিমাপ করতে সক্ষম হওয়া একটি প্রয়োজনীয় শর্ত ছাড়াও হলগুলি স্বাভাবিকের চেয়ে বড় দিতে পারে।

-সামান্য লোড ইনোকুলা হ্যালসকে স্বাভাবিকের চেয়ে কম দিতে পারে।

-ডিস্কের মধ্যে দূরত্বকে সম্মান করে না কোনও হলো অন্যর সাথে ওভারল্যাপ করে এবং সেগুলি সঠিকভাবে পড়া যায় না।

-সিও ₂ দিয়ে সজ্জিত করার ফলে টেট্রাসাইক্লিন এবং মেথিসিলিন ডিস্কের হলগুলির আকার বাড়বে।

- 35 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডের নিচে তাপমাত্রায় ছড়িয়ে পড়লে বৃহত্তর হ্লোস উত্পাদন হয়।

রক্তের সংশ্লেষ সালফার হালোর আকার হ্রাস করে।

সীমাবদ্ধতা

অ্যান্টিবায়োটিকের সংবেদনশীলতা অ্যান্টিবায়োগ্রামে একটি মাইক্রো অর্গানিজম (ইন ভিট্রো) এর বিরুদ্ধে প্রদর্শন করা কোনও গ্যারান্টি নয় যে এটি ভিভোতে কাজ করবে।

QA তে

মাঝারিটিতে পর্যাপ্ত পরিমাণ থাইমিন রয়েছে কিনা তা জানতে, এন্টারোকোকাস ফ্যাকালিস এটিসিসি 29212 এর একটি স্ট্রেন লাগাতে হবে এবং ট্রাইমেথোপ্রিম সালফামেথক্সাজল (এসএক্সটি) এর সংবেদনশীলতা পরীক্ষা করতে হবে, এটি সন্তোষজনক হওয়ার জন্য অবশ্যই একটি হলো দিতে হবে।

তথ্যসূত্র

1. "মুলার-হিন্টন আগর।" উইকিপিডিয়া, মুক্ত বিশ্বকোষ থেকে. 16 নভেম্বর 2018, 12:23 ইউটিসি। 27 জানুয়ারী 2019, 04:22
2. ফোর্বস বি, সাহম ডি, ওয়েসফেল্ড এ (২০০৯)। বেইলি এবং স্কট মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 12 এড। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
3. কনা ই। আগর বিস্তার পরীক্ষা দ্বারা একটি ভাল সংবেদনশীলতা অধ্যয়নের জন্য শর্তাদি। রেভ চিল ইনফ্যাক্ট, 2002; 19 (2): 77-81
4. ডিফ্কো ফ্রান্সিসকো সোরিয়া মেলগিজো পরীক্ষাগার। 5% ভেড়া রক্তের সাথে মেলার হিন্টন আগর। ২০০৯.এটি উপলভ্য:
5. বিডি মেলার হিন্টন দ্বিতীয় আগর ল্যাবরেটরি। 2017.Av উপলভ্য:। বিডি.কম
6. ব্রিটানিয়া ল্যাবরেটরিজ। মেলার হিন্টন আগর। 2015. উপলভ্য: ব্রিটিয়ানাল্যাব.কম
7. কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 5 তম সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
8. মার্টিনিজ-রোজাস ডি। এমপিসি-টাইপ বেটাল্যাকটামেসেস: ফেনোটাইপিক সনাক্তকরণের জন্য সাধারণতা এবং পদ্ধতি। রেভ। সাক। ভেন। Microbiol। 2009; 29 (2): 78-83। উপলভ্য: scielo.org।
9. পেরোজো এ, ক্যাস্টেলানো এম, লিং ই, অ্যারাইজ এন। সিউডোমোনাস অ্যারুগিনোসার ক্লিনিকাল বিচ্ছিন্নতায় ধাতববেটাল্যাকটামেসেস সনাক্তকরণ hen কসমেরা, ২০১২; 40 (2): 113-121। উপলভ্য: scielo.org।