আগর শ্রীঃ ভিত্তি, প্রস্তুতি এবং ব্যবহার - জীববিদ্যা - 2025

Agar শ্রীযুক্তা বিশেষত মহাজাতি Lactobacillus এর নির্বাচনী কঠিন মাঝারি অন্তরণ এবং ল্যাকটিক অ্যাসিড ব্যাকটেরিয়া শুমার জন্য ব্যবহৃত সংস্কৃতি। এই আগরটি একই নাম সহ 1960 সালে ম্যান, রোগোসা এবং শার্প দ্বারা তৈরি করা হয়েছিল, তবে এটির জটিলতার কারণে এমআরএস সংক্ষিপ্ত শব্দটি প্রায়শই ব্যবহৃত হয়।

এটি প্রোটোজ পেপটোন, মাংসের নির্যাস, খামিরের নির্যাস, গ্লুকোজ, শরবিতান মনোোলিয়েট, ডিপোটাসিয়াম ফসফেট, সোডিয়াম অ্যাসিটেট, অ্যামোনিয়াম সাইট্রেট, ম্যাগনেসিয়াম সালফেট, ম্যাঙ্গানিজ সালফেট এবং আগর সমন্বয়ে গঠিত।

ম্যান রোগোসা এবং শার্প আগর (এমআরএস) ল্যাক্টোব্যাকিলাস এসপি সহ প্রবীণ। উত্স: লেখকরা এই নিবন্ধটির জন্য দান করেছেন: ছবি তদন্তের সময় বায়েজ ই, গনজালেজ জি, হার্নান্দিজ জি, ল্যাপেজ ই, মেগা এম। শিরোনাম শিরোনাম: ল্যাকটিক অ্যাসিড ব্যাকটিরিয়া এবং বিফিডোব্যাকটিরিয়ার মূল্যায়ন স্তনের দুধ এবং শিশু মলগুলিতে প্রোবায়োটিক সম্ভাবনা সহ ।

এই রচনাটি ক্লিনিকাল নমুনাগুলি যেমন মল, যোনি স্রাব, মৌখিক নমুনা এবং মায়ের দুধের পাশাপাশি দুগ্ধ এবং মাংস জাতীয় খাবার থেকে ল্যাকটিক অ্যাসিড ব্যাকটেরিয়াগুলির যথাযথ বিকাশের অনুমতি দেয়।

এটি ক্লিনিকাল পরীক্ষাগারগুলিতে নিয়মিত ব্যবহৃত হয় না, কারণ ল্যাকটিক অ্যাসিড ব্যাকটিরিয়া রোগ প্রসেসের সাথে খুব কমই জড়িত। তবে ফুড মাইক্রোবায়োলজির ক্ষেত্রে এমআরএস আগর ব্যবহার বেশি হয়।

অন্যদিকে, এই মাধ্যমটি কিছু গবেষণা কেন্দ্র ব্যবহার করে যার উদ্দেশ্য ল্যাকটিক অ্যাসিড ব্যাকটেরিয়াগুলির অধ্যয়ন।

ভিত্তি

ম্যান, রোগোসা এবং শার্প আগর মোটামুটি জটিল রচনা রয়েছে। এর প্রতিটি উপাদানগুলির ক্রিয়াকলাপ ভেঙে তার ভিত্তিটি ব্যাখ্যা করা যেতে পারে।

প্রোটোজ পেপটোন, মাংসের নির্যাস, খামিরের নির্যাস এবং গ্লুকোজ হ'ল পুষ্টি যা ব্যাকটিরিয়া বৃদ্ধির জন্য প্রয়োজনীয় কার্বন, নাইট্রোজেন, ভিটামিন এবং খনিজগুলির উত্স সরবরাহ করে। তদুপরি, বেশিরভাগ সংস্কৃতি মিডিয়ায় গ্লুকোজ হ'ল সর্বজনীন শক্তি উত্স।

অন্যদিকে, ল্যাকটিক অ্যাসিড ব্যাকটেরিয়াগুলির বৃদ্ধির পক্ষে, ল্যাক্টোব্যাকিলাস এবং সম্পর্কিত ব্যাকটিরিয়া বিপাকের জন্য প্রয়োজনীয় কোফ্যাক্টরস (কেশনস) উপস্থিতি প্রয়োজনীয়; এই যৌগগুলি হ'ল সোডিয়াম, ম্যাগনেসিয়াম এবং ম্যাঙ্গানিজ লবণ।

অনুরূপভাবে, সরবিটান মনোোলিয়েট বা পলিসরবেট 80 ফ্যাটি অ্যাসিডগুলির একটি গুরুত্বপূর্ণ উত্স কারণ তারা পুষ্টি হিসাবে শোষিত হয়।

তদতিরিক্ত, শরবিতান মনোলিয়েট এবং অ্যামোনিয়াম সাইট্রেট অ্যাক্ট সহকারে উদ্ভিদের বিকাশকে বাধা দেয়, বিশেষত গ্রাম নেগেটিভ ব্যাকটিরিয়া, এই আগরের নির্বাচনী চরিত্র সরবরাহ করে।

অবশেষে, আগর-আগর হ'ল এটি মাঝারিটির সাথে দৃ cons় ধারাবাহিকতা সরবরাহ করে।

ম্যান রোগোসা শার্প আগর এর অন্যান্য রূপ রয়েছে; এর মধ্যে একটি সিস্টাইন (এমআরএসসি) দ্বারা পরিপূরক, অন্যান্য জীবাণুগুলির মধ্যে বিফিডোব্যাকটিরিয়া বিচ্ছিন্নকরণের জন্য খুব দরকারী। অন্যদিকে, এমআরএস মাঝারিটি নিউমাইসিন, প্যারোমাইসিন, নালিডিক্সিক অ্যাসিড এবং লিথিয়াম ক্লোরাইডের সাথে পরিপূরক রয়েছে, যা দুগ্ধজাত পণ্যগুলিতে বিফিডোব্যাকটিরিয়ার নির্বাচিত গণনার জন্য বিশেষ।

প্রস্তুতি

ডিহাইড্রেটেড মিডিয়ামের 68.25 গ্রাম ওজন এবং এক লিটার পাতিত পানিতে দ্রবীভূত করুন। 5 মিনিট দাঁড়ানো। সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত করতে, তাপ উত্সের দিকে ঘুরুন, ঘন ঘন নাড়ুন এবং 1 থেকে 2 মিনিটের জন্য সিদ্ধ করুন। 15 মিনিটের জন্য 121 ডিগ্রি সেলসিয়াসে একটি অটোক্লেভে জীবাণুমুক্ত করুন।

অটোক্লেভটি ছেড়ে যাওয়ার সময়, জীবাণুমুক্ত পেট্রি থালাগুলিতে গরম থাকা অবস্থায় কয়েক মিনিটের জন্য দাঁড়ানো এবং বিতরণ করার অনুমতি দিন।

প্লেটগুলিকে দৃify়তর এবং উল্টে ফেলার অনুমতি দিন, প্লেট র্যাকগুলিতে অর্ডার করুন এবং ব্যবহার না হওয়া পর্যন্ত ফ্রিজে রাখুন। প্লেটগুলি ব্যবহারের আগে ঘরের তাপমাত্রায় উষ্ণ হতে দিন।

মাধ্যমের পিএইচ 6.4 ± 0.2 হতে হবে। কিছু বাণিজ্যিক বাড়ি 5.5 থেকে 5.9 এর মধ্যে পিএইচ প্রস্তাব দেয়।

ডিহাইড্রেটেড মাঝারিটি বেইজ রঙে এবং প্রস্তুত হয় গা dark় অ্যাম্বার।

ডিহাইড্রেটেড মিডিয়াম এবং প্রস্তুত প্লেট উভয়ই 2-8 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সংরক্ষণ করা উচিত

অ্যাপ্লিকেশন

এমআরএস আগর প্লেটগুলি পৃষ্ঠ-বীজযুক্ত হতে পারে (ক্লান্তি বা ড্রিগালস্কি স্প্যাটুলা)। এটি গভীরতার সাথে বপন করা যায়। 24 থেকে 72 ঘন্টা ধরে প্লেটগুলি মাইক্রোইয়েরোফিলিসিটি (4% O ₂ এবং 5-10% CO ₂) এ 37 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় আবদ্ধ করা উচিত ।

বপন পদ্ধতি অনুসরণ করা উদ্দেশ্য (বিচ্ছিন্নতা বা গণনা) অনুসারে চয়ন করা হয়।

উপনিবেশের বৈশিষ্ট্য

ল্যাক্টোবিলিলাসের অনুমানিক উপনিবেশগুলি সাদা রঙের হয়ে যায় এবং এই আগরটিতে মিউকয়েড বা ক্রিমযুক্ত চেহারা থাকে। তাদের অবশ্যই পরবর্তীকালে সনাক্ত করা উচিত।

ল্যাকটিক অ্যাসিড ব্যাকটেরিয়াগুলির বিচ্ছিন্নতা

এই জন্য, পৃষ্ঠের বীজ ব্যবহৃত হয়। নমুনাগুলি বপন করতে হবে পূর্বের পদ্ধতিটি require

বুকের দুধের নমুনাগুলির ক্ষেত্রে, চর্বিযুক্ত স্তরটি সরাতে, 10 মিনিটের জন্য 14,000 আরপিএম এ নমুনার 1 মিলি সেন্ট্রিফিউজ করার পরামর্শ দেওয়া হয়। 900 µl ফেলে দেওয়া হয়, এবং অবশিষ্ট 100 µl পলল স্থগিত করা হয় এবং এমআরএস আগর পৃষ্ঠের উপরে pouredেলে দেওয়া হয়।এরপরে এটি ড্রিগালস্কি স্পটুলার সাথে সমানভাবে বিতরণ করা উচিত।

স্টুলের নমুনাগুলির ক্ষেত্রে, এক (1) গ্রাম মল ওজন এবং 0.1% জীবাণুমুক্ত পেপটোন জলের 9 মিলি মিশ্রিত করা হয়, এটি 1-10 মিশ্রণের সাথে মিলিত হয়। তারপরে 10 ^-4 এর একটি চূড়ান্ত পাতন না পাওয়া পর্যন্ত সিরিয়াল শৃঙ্খলাগুলি তৈরি করা ^হয় ।

অবশেষে, 10 ^-2, 10 ^-3 এবং 10 ^-4 টি মিশ্রণের 100 µl নেওয়া হয় এবং প্রতিটি মিশ্রণ এমআরএস আগর উপর বদ্ধ হয়, একটি ড্রিগালস্কি স্পটুলা দিয়ে সমানভাবে বিতরণ করা হয়।

ল্যাকটিক অ্যাসিড ব্যাকটেরিয়া গণনা

এক্ষেত্রে গভীরভাবে বপন করা হয়।

বুকের দুধের নমুনাগুলির জন্য, 1 এমএল নেওয়া হয় এবং একটি জীবাণু শঙ্কুযুক্ত প্লাস্টিকের নলটিতে স্থাপন করা হয়। এমআরএস আগরটি 40 মিলিয়ন মিলিটারের চূড়ান্ত পরিমাণে 40 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডের আনুমানিক তাপমাত্রায় যুক্ত হয়, যা একজাতীয় মিশ্রণ গ্রহণ করে। পরবর্তীকালে, এটি জীবাণুমুক্ত পেট্রি খাবারগুলিতে অভিন্ন পদ্ধতিতে pouredেলে দেওয়া হয় এবং পলিমারাইজেশন পর্যন্ত দাঁড়ানোর অনুমতি দেওয়া হয়।

মলের নমুনাগুলির জন্য, পূর্বে বর্ণিত হিসাবে ডিলিউশনগুলি তৈরি করা হয়। প্রতিটি দুর্বলতার 1 মিলি পান এবং এটি নির্বীজন শঙ্কু প্লাস্টিকের টিউবগুলিতে রাখুন। গলিত এমআরএস আগরটি 25 মিলিটার পরিমাণে যুক্ত হয়।

প্রতিটি হ্রাসের মিশ্রণটি জীবাণুমুক্ত পেট্রি থালাগুলিতে সমানভাবে pouredেলে দেওয়া হয়। অবশেষে, এটি পলিমারাইজেশন হওয়া পর্যন্ত বিশ্রামে রাখা হয়েছে।

ম্যান রোগোসা এবং শার্প (এমআরএস) আগরটিতে কলোনী গণনা। উত্স: এই নিবন্ধটির জন্য দান করা ছবি। লেখক: বেইজ ই, গনজালেজ জি, হার্নান্দেজ জি, ল্যাপেজ ই, মেগা এম। গবেষণার সময় তোলা ছবি শিরোনাম: স্তন দুধ এবং শিশুর মলগুলিতে প্রোবায়োটিক সম্ভাবনা সহ ল্যাকটিক অ্যাসিড ব্যাকটেরিয়া এবং বিফিডোব্যাকটিরিয়ার মূল্যায়ন।

গবেষণা স্তর

ল্যাকটিক অ্যাসিড ব্যাকটেরিয়াগুলির প্রতিদিন অধ্যয়ন আরও আগ্রহ অর্জন করছে; গবেষকরা বিশেষত নতুন ব্যবহার ও অন্যান্য ব্যবহারের সাথে দুগ্ধজাত পণ্যের উত্পাদন মানককরণের জন্য স্টার্টার ফার্মেন্ট হিসাবে তাদের সম্ভাবনা সম্পর্কে শিখেন।

এই অর্থে, আলভারাদো এট আল। (২০০)) এমআরএস আগর ব্যবহার করে একটি গবেষণা চালানোর জন্য যা তারা বিচ্ছিন্ন, চিহ্নিত এবং বৈশিষ্ট্যযুক্ত ল্যাকটিক অ্যাসিড ব্যাকটেরিয়া একটি কারিগরী ভেনেজুয়েলা অ্যান্ডিয়ান ধূমপান করা পনির উপস্থিতিতে উপস্থিত করেছিল।

পনিরটিতে তারা ল্যাক্টোকোকাস এবং ল্যাক্টোব্যাকিলাস জেনারার ব্যাকটেরিয়ার উপস্থিতি খুঁজে পেয়েছিল এবং উপসংহারে পৌঁছেছিল যে বিচ্ছিন্ন স্ট্রেনের মিশ্রণগুলি পেস্টুরাইজড মিল্ক থেকে চিজ তৈরিতে স্টার্টার স্ট্রেন হিসাবে উপযুক্ত।

অন্যদিকে, সানচেজ এবং অন্যান্য। (2017) পিগলেটগুলির হজমে ট্র্যাক্টের ল্যাকটিক অ্যাসিড ব্যাকটেরিয়াগুলির উপস্থিতি তদন্ত করতে এমআরএস আগর ব্যবহার করেছিলেন, যাতে স্বাস্থ্যকর শূকরগুলির উত্পাদনশীলতা বাড়ায় এমন দেশীয় প্রোবায়োটিক হিসাবে তাদের ব্যবহার করতে।

এই মাধ্যমের সাহায্যে তারা চারটি প্রজাতি বিচ্ছিন্ন করতে পেরেছিল: ল্যাক্টোব্যাসিলাস জনসনি, ল্যাক্টোব্যাকিলাস ব্রাভিস, এন্টারোকোকাস হিরা এবং পেডিয়োকোকাস পেন্টোসেসিয়াস।

তেমনিভাবে, বয়েজ এট আল। (2019) ল্যাকটিক অ্যাসিড ব্যাকটেরিয়া (এলএবি) এবং বিফিডোব্যাকটিরিয়ার মূল্যায়ন করতে এমআরএস আগর ব্যবহার করেছেন স্তনের দুধ এবং শিশুর মলগুলিতে প্রোবায়োটিক সম্ভাবনা রয়েছে।

তারা মায়ের দুধে 11 বিএএল এবং 3 বিফিডোব্যাকটিরিয়া এসপি এবং 8 বিএল এবং 2 বিফিডোব্যাকটিরিয়া এসপি বিচ্ছিন্ন করতে সক্ষম হন। মল। সবগুলি নির্দিষ্ট পরামিতিগুলির সাথে মিলিত যা তাদের প্রোবায়োটিক ক্রিয়াকলাপের ব্যাকটেরিয়া হিসাবে প্রমাণ করে।

লেখকরা উপসংহারে এসেছেন যে কেবলমাত্র বুকের দুধ খাওয়ানো শিশুদের বুকের দুধ এবং মল দুটোই প্রোবায়োটিক ব্যাকটেরিয়ার প্রাকৃতিক উত্স হিসাবে কাজ করে।

QA তে

এমআরএস আগরের গুণাগুণটি মূল্যায়নের জন্য, স্ট্রেনগুলি নিয়ন্ত্রণ করুন:

ল্যাক্টোবিলিস ফেরমেন্টাম এটিটিসি 9338, ল্যাকটোবিলিস কেসিটি এটিসি 393, বিফিডোব্যাক্টেরিয়াম বিফিডাম এটিসিসি 11863, ল্যাক্টোব্যাকিলাস প্লান্টেরাম এমকেটিএ 8014, ল্যাক্টোব্যাকিলাস ল্যাকটিস এমকেটিএ 19435, পেডিওকোকাস ড্যামনোসাস এমকেটিএ 29358 এবং ইসেরিচিলিয়া কোরিসি।

প্রত্যাশিত ফলাফলগুলি প্রথম 6 ব্যাকটিরিয়ার সন্তোষজনক বৃদ্ধি, যখন ই কোলি এবং ব্য্যাসিলাস সেরিয়াসকে পুরোপুরি বাধা দিতে হবে।

তথ্যসূত্র

1. আলভারাডো সি, চ্যাকেন জেড, ওটোনিয়েল জে, গেরেরো বি, ল্যাপেজ জি। বিচ্ছিন্নতা, ভেনিজুয়েলার ধূমপায়ী আন্দিয়ান আর্টিসান পনির থেকে ল্যাকটিক অ্যাসিড ব্যাকটিরিয়ার সনাক্তকরণ এবং বৈশিষ্ট্য। স্টার্টার কালচার হিসাবে এর ব্যবহার। Cient। (মারাকাইবো) 2007; 17 (3): 301-308। উপলভ্য: scielo.org।
2. সানচেজ এইচ, ফ্যাবিয়ান এফ, ওচোয়া জি, পিগলেটের হজম সংক্রমণ থেকে ল্যাকটিক অ্যাসিড ব্যাকটিরিয়ার আলফারো বিচ্ছিন্নতা। রেভ। তদন্ত। চিকিত্সা। পেরু 2017; 28 (3): 730-736। উপলভ্য: scielo.org।
3. আয়েভেদো পৌরসভা, মিরান্ডা 2017 সালে স্তনের দুধের প্রবায়োটিক সম্ভাবনা এবং মাইরাডা 2017 সালে স্নাতকোত্তর অ্যাসিড ব্যাকটিরিয়া এবং বিফিডোব্যাকটিরিয়ার মূল্যায়ন, বয়েজ ই, গঞ্জলেজ জি, হার্নান্দিজ জি, ল্যাপেজ ই, মেগা এম। Bioanalysis। ক্যারাবোো, ভেনিজুয়েলা বিশ্ববিদ্যালয়।
4. ব্রিটানিয়া ল্যাবরেটরি। এমআরএস আগর। 2015. উপলভ্য: ব্রিটিয়ানাল্যাব.কম
5. উইকিপিডিয়া অবদানকারী। এমআরএস আগর। উইকিপিডিয়া, মুক্ত বিশ্বকোষ থেকে. জানুয়ারী 10, 2018, 19:44 ইউটিসি। উপলভ্য: উইকিপিডিয়া.org 17 ফেব্রুয়ারী, 2019 অ্যাক্সেস করা হয়েছে।
6. দুগ্ধজাত পণ্যগুলিতে বিফিডোব্যাকটিরিয়ার বিচ্ছিন্নকরণ ও গণনার জন্য রায় ডি মিডিয়া। ইন্ট জে ফুড মাইক্রোবায়ল, 200128; 69 (3): 167-82।