TCBS Agar অত্যন্ত নির্বাচনী এবং ডিফারেনশিয়াল কঠিন সংস্কৃতির একটি মানে, অন্তরণ এবং মহাজাতি vibrio, বিশেষ করে vibrio cholerae, ভি parahaemolyticus অ্যান্ড ভি vulnificus এই ধরনের প্রধান প্যাথোজেনের হিসেবে ব্যাকটেরিয়া চাষের জন্য ব্যবহার করা হয়।
সংক্ষিপ্তসার টিসিবিএস এর অর্থ থিয়োসালফেট সিট্রেট বিলে সুক্রোজ। এই আগরটি ভিব্রিয়োসের একটি নির্বাচনী মাধ্যম হিসাবেও পরিচিত। আসল সূত্রটি নাকনিশি তৈরি করেছিলেন এবং পরে কোবায়াশি দ্বারা সংশোধন করেছিলেন।
বাণিজ্যিক টিসিবিএস মাঝারি এবং টিসিবিএস আগর প্লেট ভিবারিও কলের সাথে বীজযুক্ত। সূত্র: ছবি 1: লেখক এমএসসি তোলা। মেরিলিসা গিল / ছবি 2: মাইক্রোরাও, জেজেএমএমসি, দাভানগেরে, কর্ণাটক, ভারত
এটি ইস্ট এক্সট্রাক্ট, মাংসের পেপটোন, ট্রিপটিন, সোডিয়াম সাইট্রেট, সোডিয়াম থাইসালফেট, অক্স পিত্ত, সুক্রোজ, সোডিয়াম ক্লোরাইড, ফেরিক সাইট্রেট, ব্রোমোথিয়ামল নীল, থাইমল নীল এবং আগর সমন্বয়ে গঠিত।
এই রচনাটি জল, খাদ্য এবং মলের নমুনাগুলি থেকে ভিব্রিও প্রজাতির পর্যাপ্ত বিকাশের অনুমতি দেয়; ভিবিরিও হোলিসে ব্যতীত, যা এই মাধ্যমটিতে বৃদ্ধি পায় না। তদ্ব্যতীত, টিসিবিএস মাধ্যম অন্যান্য অনুষঙ্গী ব্যাকটিরিয়া, বিশেষত কলিফর্মগুলির বৃদ্ধি রোধ করতে সক্ষম।
ভিব্রিও জেনোসের কয়েকটি প্রজাতির দ্বারা সৃষ্ট গুরুতর গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল এবং অতিরিক্ত অন্ত্রের সমস্যার কারণে, এর নির্ণয়টি খুব গুরুত্বপূর্ণ। মানুষ প্রধানত সমুদ্র বা দূষিত জলাশয় থেকে কাঁচা বা আন্ডার রান্না করা খাবার খেয়ে আক্রান্ত হয়, তবে ক্ষত সংক্রমণের মাধ্যমেও হয়।
এ কারণে, ক্লিনিকাল ল্যাবরেটরিগুলিতে অবশ্যই তরল স্টলের নমুনাগুলির মল সংস্কৃতি অধ্যয়নের জন্য টিসিবিএস আগর অন্তর্ভুক্ত করা উচিত, বিশেষত ধানের পানির উপস্থিতি সহ। বিশেষত যদি রোগীর সমুদ্রের জলের সংস্পর্শে বা শেলফিস বা মাছ খাওয়ার কথা জানানো হয়।
ভিত্তি
ইস্ট এক্সট্রাক্ট, মাংসের পেপটোনস এবং ট্রিপটিন এই মাধ্যমের পুষ্টির উত্স। তবে, বেশিরভাগ ব্যাকটিরিয়ার জন্য টিসিবিএস আগর একটি অনিবার্য মাধ্যম।
সোডিয়াম সাইট্রেট এবং অক্স পিত্তের সংযোজন দ্বারা এটির উচ্চ নির্বাচনকে দেওয়া হয়; উভয়ই প্রতিরোধকারী এজেন্ট যা মাঝারিটিতে ক্ষারীয় পিএইচ সরবরাহ করে, সাথে সংযুক্ত উদ্ভিদের বৃদ্ধিকে সীমাবদ্ধ করে এবং অন্যান্য প্রজাতির মধ্যে ভি ভি কলেরির বৃদ্ধিকে সমর্থন করে। এটি লক্ষ করা উচিত যে Vibrio কলেরা অম্লতার জন্য খুব সংবেদনশীল।
তার অংশের জন্য, সোডিয়াম ক্লোরাইড খুব তাড়াতাড়ি মাঝারিটিকে ভারসাম্যপূর্ণ করে। তদ্ব্যতীত, এর ঘনত্ব যেমন বেশি, এটি হ্যালোফিলিক ব্যাকটিরিয়ার বৃদ্ধির পক্ষে, এটি একটি প্রতিরোধকারী এজেন্ট হিসাবেও কাজ করে।
সুক্রোজ হ'ল ফেরেন্টেবল চিনি যা ব্রোমোথিয়ামল নীল এবং থাইমল নীল পিএইচ সূচকগুলির সাথে একত্রে মাঝারিটিকে তার ডিফারেন্সিয়াল চরিত্র দেয়। এই কারণে, এই মাধ্যমের সাহায্যে নন-ফার্মেন্টিংয়ের থেকে সুক্রোজ ফেরেন্টিং স্ট্রেনের পার্থক্য করা সম্ভব।
সুক্রোজ ফেরেন্টিং স্ট্রেনের উপনিবেশগুলি হলুদ বর্ণের বিকাশ লাভ করে এবং অ্যাসিড উত্পাদনের কারণে মাঝারিটি সবুজ থেকে হলুদ হয়ে যায়। নন-ফেরিমেন্টারগুলি স্বচ্ছ বাড়ে এবং মাঝারিটি মূল বর্ণ (সবুজ) থেকে যায়।
তেমনি, এই মাধ্যমের মধ্যে সালফার উত্স হিসাবে সোডিয়াম থায়োসালফেট এবং উন্নয়নশীল এজেন্ট হিসাবে ফেরিক সিট্রেট রয়েছে। উভয়ই হাইড্রোজেন সালফাইড (বর্ণহীন গ্যাস) উত্পাদন করতে সক্ষম ব্যাকটিরিয়াকে দেখায়। এইচ 2 এস থায়োসালফেট থেকে গঠিত হয় এবং পরবর্তীকালে ফেরিক সিট্রেট দ্বারা একটি দৃশ্যমান কালো বৃষ্টিপাতের ফর্মগুলির সাথে প্রতিক্রিয়া জানানো হয়।
অবশেষে, আগরটি হ'ল মাঝারিটির সাথে দৃ cons় ধারাবাহিকতা সরবরাহ করে।
প্রস্তুতি
পানিশূন্য মাধ্যমের 89 গ্রাম ওজন এবং এক লিটার পাতিত পানিতে দ্রবীভূত করুন। গরম এবং ঘন ঘন আলোড়ন দিয়ে দ্রবীভূতকরণে সহায়তা করুন। মিশ্রণটি 2 মিনিট পর্যন্ত সিদ্ধ করা যেতে পারে।
এই মাধ্যমটি অটোক্লেভড নয়। দ্রবীভূত হওয়ার পরে, এটি সরাসরি নির্বীজন প্লেটে পরিবেশন করা হয়। যখন তারা দৃify় হয়, এগুলি প্লেটলেটগুলিতে একটি উল্টানো উপায়ে সাজানো হয় এবং ব্যবহার না করা পর্যন্ত একটি ফ্রিজে (2-8 ° C) স্টোরেজ করা হয়।
প্রস্তুতির পরে মাধ্যমটি অবশ্যই পিএইচ 8.6 ± 0.2 এ থাকবে।
ডিহাইড্রেটেড মিডিয়ামের রঙ হালকা বেইজ বা সবুজ-বেইজ এবং মাঝারিটির রঙ বন সবুজ বা নীল সবুজ।
নমুনাগুলি বীজ করার আগে প্লেটগুলি উষ্ণ হওয়ার অনুমতি দেওয়া গুরুত্বপূর্ণ।
ব্যবহার
Vibrios বিচ্ছিন্নতার জন্য সবচেয়ে সাধারণ নমুনা হ'ল ডায়রিয়া মল he
স্টুলের নমুনাগুলি, যদি তারা অবিলম্বে নির্বাচিত মাধ্যমটিতে বীজ বপন করা না যায় তবে কেরি ব্লেয়ার মিডিয়ামে পরিবহন করা উচিত।
সংস্কৃতির সংবেদনশীলতা বাড়াতে, মলগুলি পিপিএইচ জলের মাধ্যমে 8.4 পিএইচ-তে সমৃদ্ধকরণের মাধ্যম হিসাবে সর্বাধিক 8 ঘন্টার জন্য যেতে পারে, সেখান থেকে এটি টিসিবিএস মাধ্যমতে উপশ্রুত হয়।
এটাও বিবেচনায় নেওয়া উচিত যে ভিব্রিয়াসের কিছু স্ট্রেন ইমিউনোপ্রেসড রোগীদের ক্ষেত্রে সেপটিসেমিয়া সৃষ্টি করতে পারে, তাই তাদের রক্ত সংস্কৃতি থেকে আলাদা করা যায়। তেমনি সমুদ্র থেকে জল এবং খাদ্যের নমুনাগুলি বিশ্লেষণ করা যেতে পারে যখন কলেরা রোগের মহামারী দেখা দেয়।
বোনা
অধ্যয়নের নমুনার ইনোকুলাম অবশ্যই বিশিষ্ট হতে হবে, বপনটি ক্লান্তি দ্বারা স্ট্রাইটিং পদ্ধতি দ্বারা বাহিত হয়। প্লেটগুলি এয়ারোবায়োসিসে 24 ঘন্টা ধরে 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে থাকে।
সুব্রোজ কলেরির অনুমানিক উপনিবেশগুলি মাঝারি আকারের, মসৃণ, অস্বচ্ছ, সুকরোজের আবদ্ধতার কারণে পাতলা সীমানা এবং হলুদ বর্ণ ধারণ করে।
ভি.এলজিনোলিটিকাস, ভি। ফ্লুভিয়ালিস, ভি। হারেই, ভি। সিনসিনাটিয়েনসিস, ভি। ফার্নেসি, ভি। মেটসনিকিকোভি এবং কিছু ভি। ভলনিফিকাসের প্রজাতিগুলি একইভাবে বৃদ্ধি পায়। অন্যান্য চিকিত্সার দিক থেকে গুরুত্বপূর্ণ ভিবিরিওস প্রজাতি যেমন ভি।
টিসিবিএস আগর প্লেট ভিবারিও প্যারাহেমোলিটিকাস সহ সিডেড। উত্স: isis325 ফ্লিকার
অন্যদিকে, এটি অবশ্যই মনে রাখতে হবে যে অ্যারোডিনাস এবং প্লিজিওমোনাসের কিছু স্ট্রেন যা অক্সিডেস (+) হয় এই মিডিয়ামে বৃদ্ধি পেতে পারে এবং হলুদ উপনিবেশগুলি বিকাশ করতে পারে যা ক্লিনিককে বিভ্রান্ত করতে পারে। সিউডোমোনাসের কিছু স্ট্রেনও ভি প্যারাহেমোলিটিকাসের মতো সবুজ উপনিবেশ হিসাবে অক্সিডেস (+) বৃদ্ধি পায়।
সীমাবদ্ধতা
Vibrio জেনাসের জন্য ইতিবাচক যে অক্সিডেস পরীক্ষা টিসিবিএস আগর থেকে প্রাপ্ত কলোনীগুলি থেকে কখনই করা উচিত নয়, কারণ প্রাপ্ত ফলাফলটি মিথ্যা নেতিবাচক হবে। মাঝখানে যৌগিক এই পরীক্ষায় দৃ strongly়ভাবে হস্তক্ষেপ করে। অতএব, এটি রক্তের আগর উপ-সংস্কৃতিগুলি থেকে তৈরি করা আবশ্যক।
QA তে
মাঝারিটি ভাল অবস্থায় রয়েছে তা প্রমাণ করার জন্য, এটি পরিচিত বা শংসাপত্রিত নিয়ন্ত্রণ স্ট্র্যান্ট রোপণ করার পরামর্শ দেওয়া হয়, এবং বৃদ্ধি প্রত্যাশিত বৈশিষ্ট্যগুলি পূরণ করে কিনা তা পর্যবেক্ষণ করুন।
এর জন্য আপনি স্ট্রেন ব্যবহার করতে পারেন:
-বিব্রিও কলেরা - সন্তোষজনক বৃদ্ধি (হলুদ উপনিবেশ, স্বচ্ছ সীমানা)।
-বিব্রিও প্যারাহেমোলিটিকাস - – সন্তোষজনক বৃদ্ধি (সবুজ কেন্দ্র এবং স্বচ্ছ সীমানা সহ উপনিবেশ)।
-বিব্রিও অ্যালজিনিলিটাস এটিসিসি 17749 - সন্তোষজনক বৃদ্ধি (কলোনির চারপাশে একই রঙের হলো দিয়ে হলুদ উপনিবেশ)।
-এন্টেরোককাস ফ্যাকালিস এটিসিসি 29212 - মোট বা আংশিক বাধা (ছোট হলুদ বা স্বচ্ছ উপনিবেশ)।
-সিউডোমোনাস অ্যারুগিনোসা এটিসিসিসি 27853-– আংশিক বা সম্পূর্ণ বাধা (নীল উপনিবেশ)।
-Escherichia কলি এটিটিসি 25922 - পুরোপুরি বাধা ছিল।
-প্রোটেস মিরাবিলিস এটিসিসি 43071 - মোট বা আংশিক বাধা। (ছোট উপনিবেশ সবুজ কেন্দ্রের অর্ধপরিচয় সীমানা)।
বিনা নিয়ন্ত্রিত মাধ্যমের জ্বালাময় অপরিবর্তিত হওয়া উচিত।
তথ্যসূত্র
- ডিফ্কো ফ্রান্সিসকো সোরিয়া মেলগিজো পরীক্ষাগার। টিসিবিএস আগর। 2009.এটি উপলভ্য: f-soria.es
- বিডি ল্যাবরেটরি। বিডি। টিসিবিএস আগর 2003. উপলভ্য: বিডি ডট কম
- ব্রিটানিয়া ল্যাবরেটরিজ। টিসিবিএস মিডিয়াম। 2015. উপলভ্য: ব্রিটিয়ানাল্যাব.কম
- আকিউমিয়া ল্যাবরেটরিজ। টিসিবিএস আগর। 2016. উপলভ্য এখানে: foodafety.neogen.com
- ফোর্বস বি, সাহম ডি, ওয়েসফেল্ড এ (২০০৯)। বেইলি এবং স্কট মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 12 এড। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
- কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 5 তম সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।