তিসি আগর: যুক্তিযুক্ত, প্রস্তুতি এবং ব্যবহার - জীববিদ্যা - 2025

TSI Agar বা ট্রিপল চিনি লোহা Agar একটি কঠিন মাঝারি যা হিসেবে কাজ করে একটি গ্রাম নেতিবাচক bacilli প্রাথমিক সনাক্তকরণ কৌশল বায়োকেমিক্যাল পরীক্ষা। এটি বর্তমানে উপস্থিত শর্করার গাঁজন এবং হাইড্রোজেন সালফাইড এবং গ্যাসের উত্পাদন দেখানোর উপর ভিত্তি করে।

এর সংমিশ্রণ এবং ভিত্তি ক্লিগার আয়রন পরীক্ষার সাথে খুব মিল, এই পার্থক্যের সাথে যে পরবর্তীটিতে কেবল গ্লুকোজ এবং ল্যাকটোজ রয়েছে। পরিবর্তে, এর নাম থেকেই বোঝা যায়, ট্রিপল সুগার আয়রন আগরটিতে তিনটি উত্তেজক শর্করা রয়েছে: গ্লুকোজ, ল্যাকটোজ এবং সুক্রোজ।

টিএসআই পরীক্ষার চিত্রগুলি বিভিন্ন অণুজীবের সাথে A. এচেরিচিয়া কোলি, বি শিগেলা ফ্লেক্সনারি, সি) সালমোনেলা টাইফিমিউরিয়াম, ডি সিউডোমোনাস অ্যারুগিনোসা। সূত্র: উইকমেড্রিড, উইকিমিডিয়া কমন্স থেকে

তদ্ব্যতীত, টিএসআই মাধ্যমের চারটি প্রোটিন ডেরাইভেটিভ রয়েছে যা এটিকে খুব পুষ্টিকর আগর হিসাবে তৈরি করে: খামিরের নির্যাস, মাংসের নির্যাস, পেপটোন এবং প্রোটোজ পেপটোন। এটিতে লৌহঘটিত অ্যামোনিয়াম সালফেট, সোডিয়াম থায়োসালফেট, সোডিয়াম ক্লোরাইড, ফেনল লাল এবং আগর রয়েছে।

মাঝারি উপস্থিত গ্লুকোজ খেতে কোনও অণুজীবের অক্ষমতা তাৎক্ষণিকভাবে এন্টারোব্যাকটেরিয়া পরিবার থেকে অন্তর্ভুক্ত করে। সুতরাং জেনাস এবং প্রজাতি নির্ধারণের জন্য কোন সনাক্তকরণের রুট গ্রহণ করা উচিত তা সিদ্ধান্ত নেওয়ার ক্ষেত্রে এই পরীক্ষাটি প্রয়োজনীয়।

প্রতিটি পরীক্ষাগার সিদ্ধান্ত নিয়েছে যে টিএসআই আগর বা ক্লিগ্লার লোহা আগরের সাথে কাজ করা উচিত।

ভিত্তি

প্রতিটি যৌগিক মাধ্যমের মধ্যে একটি ফাংশন পূর্ণ করে।

সোডিয়াম ক্লোরাইড এবং আগর

মাধ্যমের ওস্মোটিক ভারসাম্য বজায় রাখতে সোডিয়াম ক্লোরাইড প্রয়োজনীয় যদিও আগরটি দৃ cons় ধারাবাহিকতা দেয়।

পিএইচ সূচক (ফেনোল লাল)

প্রস্তুত মাধ্যমের পিএইচ 7.3 এ ভারসাম্যযুক্ত এবং পিএইচ সূচক (ফেনোল লাল) 6.8 এর নীচে হলুদ হয়ে যায়। এর অর্থ হ'ল শর্করার উত্তোলন দ্বারা উত্পাদিত অল্প পরিমাণে অ্যাসিডগুলি মাঝারিটি লাল-কমলা থেকে হলুদে পরিণত করবে।

যদি কোনও গাঁজন না ঘটে তবে পেপটোন ব্যবহারের মাধ্যমে মাঝারি ক্ষারীয় হবে, লাল-কমলা থেকে শক্ত লাল হয়ে যাবে।

প্রোটিন ডেরাইভেটিভস (খামিরের নির্যাস, মাংসের নির্যাস, পেপটোন এবং প্রোটোজ পেপটোন)

যখন ব্যাকটিরিয়া টিএসআই আগরে উপস্থিত প্রোটিনগুলিকে বিপাক করে তোলে, তখন অ্যামাইনগুলি উত্পাদিত হয় যা মাঝারিটিকে ক্ষুদ্রায়িত করে (মূলত বেভেল স্তরে), কারণ প্রতিক্রিয়াতে অক্সিজেনের প্রয়োজন হয়। আমিনগুলি বেজেলকে উজ্জ্বল লাল করে তোলে।

তবে এটি কার্বোহাইড্রেট গাঁজানোর ব্যাকটিরিয়া ক্ষমতার উপর নির্ভর করবে।

কার্বোহাইড্রেটগুলির গাঁজন (গ্লুকোজ, ল্যাকটোজ এবং সুক্রোজ)

শর্করার গাঁজন সম্পর্কে অধ্যয়ন বেশ কয়েকটি চিত্র দিতে পারে এবং প্রত্যেকটির আলাদা আলাদা ব্যাখ্যা করা হয়। পরীক্ষার ব্যাখ্যাটি অণুজীবকে 3 টি বিভাগে বিভক্ত করে: গ্লুকোজ নন-ফার্মেন্টার, ল্যাকটোজ নন-ফার্মেন্টার এবং ল্যাকটোজ / সুক্রোজ ফেরেন্টার্স।

এটি লক্ষ করা উচিত যে মাঝারিটিতে গ্লুকোজের পরিমাণ সীমিত, যখন ল্যাকটোজ এবং সুক্রোজ এর ঘনত্ব 10 গুণ বেশি।

এন্টারোব্যাকটেরিয়া পরিবার এবং অন্যান্য গ্লুকোজ-ফার্মেন্টিং জীবাণুগুলির ব্যাকটিরিয়া শক্তির পক্ষে সহজ কার্বোহাইড্রেট হওয়ায় এই চিনিটিকে উত্তেজিত করতে শুরু করবে।

অন্যদিকে, ল্যাকটোজ এবং সুক্রোজ জটিল কার্বোহাইড্রেট যা এম্বেডেন-মেয়ারহফ চক্রটিতে প্রবেশের জন্য তাদের অবশ্যই ভেঙে গ্লুকোজ রূপান্তর করতে হবে।

- মাইক্রো অর্গানিজমগুলি গ্লুকোজ খেতে দেয় না

যখন ইনোকুলেটেড মাইক্রো অর্গানিজম গ্লুকোজ খেতে সক্ষম হয় না, তখন এটি কম পরিমাণে অন্যান্য শর্করা খেতে সক্ষম হবে। সুতরাং, এখানে কোনও অ্যাসিড গঠিত হয় না, তবে পেপটোন ব্যবহার করে বেভালে অ্যামাইনস গঠন হয়।

এক্ষেত্রে বেজেল আরও শক্তিশালী লাল হয়ে যায় এবং নলের নীচে অপরিবর্তিত থাকতে পারে বা এটিও ক্ষারযুক্ত হতে পারে, পুরো টিউবকে লাল রেখে।

ব্যাখ্যা: কে / কে অর্থ ক্ষারীয় বেভেল / ক্ষার বা নিরপেক্ষ নীচের অংশ

নিবন্ধের শুরুতে চিত্রটিতে টিউব ডি এর চিত্রটি দেখুন

এই ফলাফলটি সূচিত করে যে অণুজীবগুলি এন্টারোব্যাকটেরিয়াসি পরিবারটির সাথে সম্পর্কিত নয়।

- মাইক্রো অর্গানিজমগুলি ল্যাকটোজ / সুক্রোজকে গাঁজন করে না

ব্যাকটিরিয়া যদি গ্লুকোজ খেতে সক্ষম হয় তবে ল্যাকটোজ বা সুক্রোজ না করে তবে নিম্নলিখিতটি ঘটবে:

ব্যাকটিরিয়া প্রায় 6 থেকে 8 ঘন্টা পরে উপস্থিত সমস্ত গ্লুকোজ গ্রাস করবে, বেভেল এবং ব্লক উভয়কেই এসিডেড করতে সক্ষম হবে; অর্থাৎ আগর পুরোপুরি হলুদ হয়ে যাবে। কিন্তু যখন গ্লুকোজ হ্রাস হয় এবং ল্যাকটোজ এবং সুক্রোজ ব্যবহার করা যায় না, তখন ব্যাকটিরিয়া প্রোটিনের বিপাক শুরু করবে।

এই প্রতিক্রিয়াটির জন্য অক্সিজেন প্রয়োজন, সুতরাং পেপটোনগুলির অবক্ষয় পৃষ্ঠের (বেভেল) উপর ঘটে। উত্পাদিত অ্যামাইনগুলি বেজেলকে হলুদ থেকে লাল রঙে পরিবর্তিত করে। এই প্রতিক্রিয়াটি 18 থেকে 24 ঘন্টা ইনকিউবেশন পরে প্রমাণিত হয়।

ব্যাখ্যা: কে / এ এর ​​অর্থ ক্ষারীয় বেভিল এবং অ্যাসিড ওয়াড।

নিবন্ধের শুরুতে চিত্রটিতে টিউব বিয়ের চিত্রটি দেখুন

-ল্যাকটোজ / সুক্রোজ ফেরেন্টিং অণুজীবগুলি

ল্যাকটোজ এবং সুক্রোজ ফিমেন্টিং করতে সক্ষম ক্ষুদ্রাকৃতিগুলি অবশ্যই গ্লুকোজ উত্তোলন করতে পারে। মাঝারিটিতে ন্যূনতম পরিমাণে গ্লুকোজ উপস্থিত হয়ে যাওয়ার পরে, তৈরি পিরাওয়েট বায়বীয় ক্রেবস চক্রের মাধ্যমে অ্যাসিড তৈরি করতে বিপাক করতে শুরু করে এবং 8 থেকে 12 ঘন্টা সময়কালে সমস্ত মাধ্যম হলুদ হয়ে যায়।

যদি ব্যাকটিরিয়াগুলি ল্যাকটোজ বা সুক্রোজ ভেঙে ফেলতে সক্ষম হয় তবে অ্যাসিডগুলি উত্পাদন হতে থাকবে, এবং 18 থেকে 24 ঘন্টা পরে পুরো নল - বেভেল এবং প্লাগ - হলুদ হতে থাকবে।

এটি লক্ষ করা উচিত যে গ্লুকোজ ব্যবহার দুটি উপায়ে পরিচালিত হয়: একটি বায়ুগতভাবে টিউবের বেভেল এ এবং অন্যটি টিউবের নীচে এনারোবিকভাবে।

ব্যাখ্যা: এ / এ অর্থ অ্যাসিড বেভেল / অ্যাসিড নীচে। এতে গ্যাস থাকতে পারে বা নাও থাকতে পারে।

নিবন্ধের শুরুতে চিত্রটিতে টিউব এ এর ​​চিত্রটি দেখুন A.

গ্যাস উত্পাদন

কিছু অণুজীবগুলি শর্করার উত্তোলনের সময় গ্যাস উত্পাদন করতে সক্ষম। আগরের মধ্যে যে চাপটি প্রয়োগ হয় তার দ্বারা নলটিতে গ্যাসটি প্রমাণিত হয়। চাপ বুদ্বুদ গঠনের বা আগরের স্থানচ্যূতকরণ ঘটায়। কখনও কখনও গ্যাস গঠন মাঝারি ভাঙতে পারে।

এটি গুরুত্বপূর্ণ যে টিএসআই মাধ্যম বপন করার সময়, আগুনের কেন্দ্রের মধ্য দিয়ে পঙ্কচারটি পরিষ্কারভাবে তৈরি করা হয় যতক্ষণ না এটি নীচে পৌঁছায়। যদি পঞ্চারটি টিউবের দেয়ালগুলির দিকে ঘুরিয়ে দেওয়া হয়, তবে এটি গ্যাস উত্পাদনে মিথ্যা ইতিবাচক কারণ তৈরি করতে পারে, যেহেতু এটি ভুলভাবে গঠিত চ্যানেলটি দিয়ে পালিয়ে যাবে।

গ্যাস উত্পাদন, সেই সাথে আগর বেভলে সংঘটিত প্রতিক্রিয়াগুলির জন্য অক্সিজেনের প্রয়োজন, তাই এটি টিউবকে তুলার প্লাগ দিয়ে coveredেকে রাখা উচিত এবং যদি বেকলাইট idাকনা ব্যবহার করা হয় তবে এটি সম্পূর্ণ কড়া না হওয়া উচিত।

গ্যাস উত্পাদন ধনাত্মক (+) বা নেতিবাচক (-) হিসাবে রিপোর্ট করা হয়।

গ্যাস গঠনের নিদর্শন। সূত্র: এমএসসি দ্বারা নির্মিত প্রকল্প মেরিলিসা গিল। চিত্রের উত্স: উইকিমিডিয়া কমন্সের মাধ্যমে VeeDunnFlickr.com/Y_tambe

সোডিয়াম থায়োসালফেট এবং লৌহঘটিত অ্যামোনিয়াম সালফেট

হাইড্রোজেন সালফাইড (বর্ণহীন গ্যাস) উত্পাদন করতে সক্ষম ব্যাকটিরিয়া মাধ্যমটিতে উপস্থিত সোডিয়াম থাইসালফেট থেকে সালফার গ্রহণ করে। এইচ ₂ এসটি তৈরি হয়ে গেলে, এটি লৌহঘটিত অ্যামোনিয়াম সালফেটের সাথে প্রতিক্রিয়া করে, আয়রন সালফাইড তৈরি করে (পরিষ্কারভাবে দৃশ্যমান কালো বৃষ্টিপাত)।

এইচ ₂ এস উত্পাদন ধনাত্মক (+) বা নেতিবাচক (-) হিসাবে রিপোর্ট করা হয়।

নিবন্ধের শুরুতে চিত্রটিতে নল সি এর চিত্রটি দেখুন

প্রস্তুতি

ডিহাইড্রেটেড ট্রিপল চিনি আয়রন আগর (টিএসআই) মাঝারি 62২.৫ গ্রাম ওজন এবং এক লিটার পাতিত পানিতে দ্রবীভূত করুন।

আগর সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত না হওয়া পর্যন্ত উত্তাপ। ঘন ঘন নাড়তে এক মিনিটের জন্য সেদ্ধ করুন। সুতির ক্যাপগুলি দিয়ে 13/100 টেস্ট টিউবে মাঝারি 4 মিলি বিতরণ করুন।

15 মিনিটের জন্য 121 ডিগ্রি সেলসিয়াসে একটি অটোক্লেভে জীবাণুমুক্ত করুন। অটোক্লেভ থেকে সরান এবং এটিকে একটি কোণে বিশ্রাম দিন। বেস এবং বেজেল উভয়েরই একই দূরত্ব থাকতে হবে তা যত্ন নিতে হবে।

একটি ফ্রিজে 2-8 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে স্টোর করুন ব্যাকটিরিয়া স্ট্রেন বপন করার আগে এটি গরম হতে দিন।

ডিহাইড্রেটেড মিডিয়ামের রঙ হালকা বেইজ এবং প্রস্তুত মিডিয়াম লাল-কমলা।

প্রস্তুত মাধ্যমের চূড়ান্ত পিএইচ 7.3 ± 0.2 হয়।

অ্যাপ্লিকেশন

টিএসআই পরীক্ষাটি ব্যাপকভাবে মাইক্রোবায়োলজি পরীক্ষাগার পর্যায়ে ব্যবহৃত হয়। এই পরীক্ষাটি জেনাস এবং প্রজাতিগুলি সনাক্ত করার জন্য যে ধরণের পরীক্ষার জন্য প্রয়োগ করা উচিত তা গাইড করার জন্য প্রয়োজনীয়। এটির কার্যকর সম্পাদন এবং ব্যাখ্যা উপাদান এবং শ্রমকে বাঁচাতে পারে।

ফলাফলটি যদি কোনও টিএসআই কে / কে হয় এবং সাইটোক্রোম অক্সিডেস পরীক্ষাটি ইতিবাচক হয় তবে জানা যায় যে অন্যান্য জেনারগুলির মধ্যে সিউডোমোনাস, অ্যালকালিজেনস, আক্রোমোব্যাক্টর, বুর্খোল্ডারিয়া জাতীয় নন-ফেরমেন্টিং গ্রাম নেতিবাচক রডগুলির সনাক্তকরণের জন্য পরীক্ষাগুলি ব্যবহার করা উচিত known যদি এটি অক্সিডেস নেতিবাচক হয় তবে এটি জিনেরা অ্যাকিনেটোব্যাক্টর, স্টেনোট্রোফোমোনাস ইত্যাদির দিকে দৃষ্টি নিবদ্ধ করে

অন্যদিকে, যদি কোনও টিএসআই এ / এ বা কে / এ প্রাপ্ত হয় এবং সাইটোক্রোম অক্সিডেস পরীক্ষা নেতিবাচক হয়, তত বেশি নাইট্রেট নাইট্রাইটে হ্রাস পায়, আমরা নিশ্চিত হতে পারি যে এটি এন্টারোব্যাক্টেরিয়াসি পরিবারের অন্তর্গত একটি অণুজীব gan এই ক্ষেত্রে, সনাক্তকরণের রুটটি এই গ্রুপের ব্যাকটিরিয়াগুলির জন্য নির্দিষ্ট পরীক্ষায় ফোকাস করবে।

অন্যদিকে, যদি কে / এ বা এ / এ চিত্র পাওয়া যায় এবং সাইটোক্রোম অক্সিডেস পরীক্ষাটি ইতিবাচক হয় তবে জড়িত অতিরিক্ত পরীক্ষাগুলি এন্টারোব্যাক্টেরিয়াসি পরিবারের অন্তর্গত নয় এমন ফেরেন্টিং স্ট্রেনগুলি সনাক্তকরণের উদ্দেশ্যে হবে যেমন: অ্যারোমোনাস, প্লিজিওমোনাস, ভিব্রিও এবং পাস্তুরেেলা।

হাইড্রোজেন সালফাইড, অক্সিডেস নেতিবাচক সহ একটি টিএসআই এন্টারোব্যাকটেরিয়া পরিবারটির নিম্নলিখিত জেনার সনাক্তকরণের জন্য গাইড করবে: প্রোটিয়াস, সিট্রোব্যাক্টর, এডওয়ার্ডসিয়েলা, লেমনোরেলা, প্রাগিয়া, ট্রাবুসিএলা বা সালমোনেলা।

ক্ষারীয় পটভূমির সাথে ক্ষারীয় বেভেলের মধ্যে সামান্য বা মাঝারি হাইড্রোজেন সালফাইডযুক্ত একটি টিএসআই হ'ল ₂ এস উত্পাদনকারী নন-ফার্মেন্টিং গ্রাম নেতিবাচক রডগুলির সনাক্তকরণের জন্য পরীক্ষার জন্য গাইড করবে যেমন শেভেনেলা পুত্রেফেসিয়েনস।

অবশেষে, গ্রাম পজিটিভ ব্যাসিলিতে হাইড্রোজেন সালফাইড উত্পাদন তদন্তের জন্য টিএসআই ব্যবহার করা যেতে পারে, বিশেষত যখন এরিসিপেলোথ্রিক্স রুশিওপ্যাথিয়ায় সন্দেহ হয়।

বোনা

টিএসআই মাধ্যম অবশ্যই প্রাথমিক বা নির্বাচনী সংস্কৃতিতে বিচ্ছিন্ন খাঁটি উপনিবেশের সাথে ইনোকুলেট করা উচিত। যদি উপনিবেশটি বেছে নেওয়া মিডিয়া থেকে নেওয়া হয় যা মিশ্র উদ্ভিদের সাথে নমুনাগুলি দ্বারা বীজিত হয়েছিল, তবে কেবলমাত্র পৃষ্ঠ থেকে নেওয়ার যত্ন নেওয়া উচিত, যেহেতু সেই মাধ্যমের প্রতিবন্ধী টেকসই স্ট্রেনগুলি কলোনির নীচের অংশে থাকতে পারে।

অতএব, লুপটি কখনই নির্বাচনী মাধ্যমের উপরে ঠাণ্ডা করা উচিত নয় এবং তারপরে কলোনীটি নেওয়া এবং টিএসআই মাধ্যমের সাহায্যে ইনোকুলেট করা উচিত।

সোজা লুপ বা সুই দিয়ে বপন করা হবে। একটি খোঁচা তৈরি করা হবে, যত্ন নেবেন যে এটি মাঝের মাঝামাঝি থেকে নীচে পৌঁছানো পর্যন্ত হবে এবং তারপরে একটি জিগজ্যাগ আকারে পৃষ্ঠকে ইনোকুলেশন করে বপন শেষ করা হবে। দুটি পাঞ্চচার করবেন না।

এয়ারোবায়োসিসে 18-24 ঘন্টা ধরে 37 ডিগ্রি সে। এই সময়ে ব্যাখ্যা করুন, আগে বা পরে কখনও নয়।

সীমাবদ্ধতা

টিএসআই পরীক্ষাটি ইনকিউবেশন হওয়ার 18 থেকে 24 ঘন্টাের মধ্যে পড়তে হবে। এই সময়ের আগে একটি পড়া এ / এ ফেরমেন্টেশনের জন্য মিথ্যা ধনাত্মক দিতে পারে। এদিকে, এই সময়ের পরে একটি পঠন মাঝারিটি ক্ষারীয় করে এমন পেপটোন সেবনের কারণে একটি নন-ফেরেন্টারের একটি মিথ্যা নেতিবাচক চিত্রের জন্ম দিতে পারে।

তথ্যসূত্র

1. ম্যাক ফাদ্দিন জে। (2003)। ক্লিনিকাল গুরুত্বের ব্যাকটেরিয়া সনাক্তকরণের জন্য জৈব রাসায়নিক পরীক্ষা। তৃতীয় সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা। বুয়েনস আইরেস আর্জেন্টিনা।
2. ফোর্বস বি, সাহম ডি, ওয়েসফেল্ড এ (২০০৯)। বেইলি এবং স্কট মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 12 এড। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
3. কোনেম্যান ই, অ্যালেন এস, জান্ডা ডাব্লু, শ্রেকেনবার্গার পি, উইন ডাব্লু। (2004)। মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 5 তম সংস্করণ। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
4. "টিএসআই আগর।" উইকিপিডিয়া, মুক্ত বিশ্বকোষ থেকে. 10 জুলাই 2018, 08:09 ইউটিসি। 10 ফেব্রুয়ারী 2019, 03:33 এ উপলব্ধ: es.wikedia.org
5. ব্রিটানিয়া ল্যাবরেটরিজ। টিএসআই আগর (ট্রিপল সুগার আয়রন আগর)। 2015. উপলভ্য: ব্রিটিয়ানাল্যাব.কম
6. বিডি ল্যাবরেটরিজ। ট্রিপল চিনির আয়রন আগর (টিএসআই আগর)। 2003. উপলভ্য: বিডি.কম