নিউবাউর চেম্বার: ইতিহাস, বৈশিষ্ট্য, ব্যবহার - জীববিদ্যা - 2025

Neubauer চেম্বারের, hematometer বা hemocytometer, একটি পরীক্ষাগার একটি বিশেষ পুরু কাচ প্লেট নিয়ে গঠিত যন্ত্র। এই ক্যামেরাটি কিছু কোষের প্রকার যেমন রক্তের রক্তকণিকা, সাদা রক্তকণিকা এবং প্লেটলেটগুলি গণনা করতে ব্যবহৃত হয়, যদিও এটি বীজ, শুক্রাণু, পরজীবী ইত্যাদি গণনা করতে ব্যবহার করা যেতে পারে camera

এটি কয়েকটি খুব অদ্ভুত বৈশিষ্ট্য উপস্থাপন করে, কারণ এটি 3 অঞ্চল নিয়ে গঠিত, একটি গণনা করার জন্য একটি কেন্দ্রীয় অঞ্চল এবং দুটি সমর্থন অঞ্চল। প্রতিটি চেম্বারে দুটি গণনা অঞ্চল বা ক্রসহায়ার থাকে, একটি শীর্ষে এবং নীচে একটি।

নিউবাউর চেম্বার সূত্র: সান্তিবাদিয়া। সম্পাদিত চিত্র।

গ্রিড আকারে এগুলির একাধিক বিভাগ রয়েছে। গণনা ক্ষেত্রগুলি হ'ল উভয় গ্র্যাচিকুলির 4 কোণে, পাশাপাশি কেন্দ্রীয় বর্গক্ষেত্রের মাঝারি স্কোয়ার।

ক্যামেরার সমাবেশটি অবশ্যই খুব যত্ন সহকারে করা উচিত, যেহেতু কোনও বিবরণ ঘরের সংখ্যাকে প্রভাবিত করে। অনেকগুলি ভুল করা যেতে পারে, তবে সেগুলির মধ্যে যদি কোনওটি ঘটে তবে ক্যামেরাটি অবশ্যই বিচ্ছিন্ন, পরিষ্কার এবং পুনরায় সংযুক্ত করা উচিত। প্রধান ত্রুটিগুলির মধ্যে নিম্নলিখিতগুলি অন্তর্ভুক্ত রয়েছে:

চেম্বারে উপচে পড়া বা আন্ডারফিলিং, চেম্বারটিকে শুকিয়ে দেওয়া, গজ দিয়ে অতিরিক্ত তরল সরিয়ে ফেলার চেষ্টা করা, চেম্বারটি পরিবহনের সময় টিপিং করা, নোংরা বা ভেজা চেম্বারটি পূরণ করা, হ্রাস বা নমুনা ভালভাবে মিশ্রন না করা, অন্যদের মধ্যে। এই সমস্ত ত্রুটিগুলির ফলে অবাস্তব মান আসবে।

ইতিহাস

নিউবাউর চেম্বারটি একটি নির্ভুল সরঞ্জাম এবং উত্পাদন প্রক্রিয়াটি কঠোর মানের নিয়ন্ত্রণের মধ্য দিয়ে যায়। এটি কণা বা মিমি ³ প্রতি গঠিত উপাদানগুলির সঠিক গণনা, যেমন বিভিন্ন তরলগুলির কোষের জন্য তৈরি হয়েছিল। এর সূক্ষ্ম গ্রাফিকটি হীরা পেন্সিল দিয়ে খোদাই করা হয়েছে।

Neubauer চেম্বার বৈশিষ্ট্য

পুরো চেম্বারটি একটি সাধারণ স্লাইডের আকার যাতে এটি মাইক্রোস্কোপ পর্যায়ে স্থাপন করা যায়।

চেম্বারে তিনটি কেন্দ্রীয় আয়তক্ষেত্রাকার উপরিভাগ থাকে (ক, খ, সি)। জোনে “বি” আর্ট জোন বা কাউন্টিং জোন অবস্থিত, একে রেটিকুলামও বলা হয়। অঞ্চল "ডি" দ্বারা বিভক্ত ক্যামেরার প্রতিটি পাশের একটি।

নিউবাউর চেম্বারের গ্রাফিকাল ডায়াগ্রাম। সূত্র: হেমাটোলজির ব্যবহারিক গাইড। ভেনেজুয়েলার ক্যারাবোো বিশ্ববিদ্যালয়ের স্কুল বায়োয়ানালাইসিস।

প্রতিটি গ্রিকিকুল হ'ল একটি পালিশ অঞ্চল যা গণনা করার ক্ষেত্রটি খোদাই করে। এটি 9 মিমি ² এর পৃষ্ঠতল ক্ষেত্র সহ একটি বর্গক্ষেত্র নিয়ে গঠিত এবং অভ্যন্তরীণভাবে প্রতিটি 1 মিমি ² এর পৃষ্ঠতল ক্ষেত্র সহ 9 স্কোয়ারে বিভক্ত । চার কোণার স্কোয়ারগুলি 16 টি ছোট স্কোয়ারে (0.0625 মিমি ² অঞ্চল) বিভক্ত ।

এই গ্রিডগুলি একে অপরের সাথে ছেদ করে এমন এক মিলিমিটার লাইন তৈরি করে, যা নির্দিষ্ট করে দেওয়া পরিমাপের জন্য একেবারে গ্রাফড গ্রিড গঠন করে। এই লাইনগুলি হীরা ডগা দিয়ে খোদাই করা হয়েছে।

উন্নত নিউবাউর রেটিকুলাম উত্স: ভেনিজুয়েলার কারাবোবো বিশ্ববিদ্যালয়ের স্কুল অফ বায়ানালাইসিসের হেমাটোলজির ব্যবহারিক গাইড।

চারদিক গণনার ক্ষেত্রের সাথে সামঞ্জস্য। এটি এই দিক বা কোণে সর্বাধিক কোষগুলি (লাল রক্তকণিকা এবং লিউকোসাইটস) গণনা করা হয়, যখন প্লেটলেটগুলি কেন্দ্রীয় অঞ্চলে গণনা করা হয়।

কেন্দ্রীয় অঞ্চলে আরও বিভাগ রয়েছে, এটি 1 মিমি ² বর্গ নিয়ে 25 স্কোয়ারে বিভক্ত থাকে যার পৃষ্ঠতল অঞ্চলটি প্রতিটি 0.04 মিমি ² থাকে। এগুলি 0.0025 মিমি ^{2 এর} অঞ্চল সহ 16 টি গ্রিডে বিভক্ত হয় ।

উন্নত নুবাউর জালিকাটির বিবরণ। ক) কোণগুলির বর্গক্ষেত্র, খ) কেন্দ্রীয় বর্গক্ষেত্র, গ) কেন্দ্রীয় বর্গক্ষেত্রের মাঝারি বর্গ। উত্স: ভেনিজুয়েলার কারাবোবো বিশ্ববিদ্যালয়ের স্কুল অফ বায়ানালাইসিসের হেমাটোলজির ব্যবহারিক গাইড।

জোন "ক" এবং "সি" একটি বিশেষ কভার অবজেক্টকে হেমাটোমেট্রিক স্লাইড বা হিমেটাইমেটর কভার হিসাবে রাখার জন্য সমর্থন হিসাবে কাজ করে।

ফয়েল এবং গণনা পৃষ্ঠের মধ্যে উচ্চতা 0.1 মিমি। গণনা বাক্স পৃষ্ঠের পরিমাপ, পাশাপাশি চেম্বারের উচ্চতা এবং নমুনা হ্রাস, চূড়ান্ত গণনার জন্য প্রয়োজনীয় ডেটা।

অ্যাপ্লিকেশন

এটি সেল গণনার জন্য ব্যবহৃত হয়। এটি হেমাটোলজি ক্ষেত্রে বিশেষত সহায়ক, যেহেতু এটি 3 রক্ত ​​কোষের সিরিজ গণনা করতে দেয়; যেমন লোহিত রক্তকণিকা, সাদা রক্তকণিকা এবং প্লেটলেট।

তবে এটি অন্যান্য ক্ষেত্রগুলিতে ব্যবহার করা যেতে পারে, উদাহরণস্বরূপ শুক্রাণু, স্পোর, ব্যাকটিরিয়া বা নমুনার ধরণের উপর নির্ভর করে গুরুত্বপূর্ণ অন্যান্য আইটেমগুলি গণনা করা।

ব্যবহারবিধি?

নমুনা প্রস্তুতি

কক্ষ গণনা সম্পাদন করতে, এটি সাধারণত পূর্ববর্তী হ্রাস থেকে শুরু করা হয়। উদাহরণ: সাদা রক্তকণিকা গণনা করতে, তুর্কের তরল দিয়ে 1:20 মিশ্রণ প্রস্তুত করুন। পাইপেট লোড এবং নিউউবার চেম্বারে মাউন্ট করার আগে হ্রাসটি ভালভাবে মিশ্রিত হয়।

এমন সময় আছে যখন 1:20 পাতন গুনতে যথেষ্ট হয় না। উদাহরণস্বরূপ, কিছু ধরণের ক্রনিক লিউকিমিয়ায় আক্রান্ত রোগীদের মধ্যে। এই ক্ষেত্রে, উচ্চতর ডিলিউশনগুলি যেমন 1: 100 করা উচিত।

অন্যদিকে, গুরুতর লিউকোপেনিয়াসের মতো, যদি গণনাটি খুব কম হয়, তবে নমুনাকে কেন্দ্রীভূত করার জন্য ছোট ছোটগুলি তৈরি করা যেতে পারে। উদাহরণ: আপনি একটি 1:10 হ্রাস করতে পারেন।

যে পরিবর্তনগুলি করা হয়েছে তা গণনাগুলিকে প্রভাবিত করে।

নেউবাউর চেম্বার মাউন্টিং

নিউউবাউর চেম্বারটি কেন্দ্রীয় অঞ্চলে হেমাটোমেট্রিক স্লাইড স্থাপন করে একত্রিত হয়। উভয়ই খুব পরিষ্কার এবং শুকনো হতে হবে। লামেলা রাখার জন্য, এটি প্রান্তগুলি দ্বারা নেওয়া হয় এবং আলতো করে ক্যামেরায় ফেলে দেওয়া হয়।

লোডিং জোনের প্রান্তে একটি 35 ° কোণে থোমা স্বয়ংক্রিয় পাইপেট বা পাইপেটের টিপ রেখে এটি পূরণ করা হয়। তরলটি মসৃণভাবে স্রাব হয় এবং লোডিং অঞ্চল কৈশিকতার দ্বারা ভরা হয়। দুটি ক্রসহায়ার লোড করার জন্য এটি উভয় পক্ষ থেকে করা হয়।

রেটিকেলগুলি ওভারলোড হওয়া উচিত নয় এবং তরলকেও অস্বীকার করা উচিত নয়। বোঝা অবশ্যই সঠিক হতে হবে। এটি গুরুত্বপূর্ণ যে ভরাট একজাতভাবে সম্পন্ন করা হয়, এটি হ'ল কোনও বুদবুদ হওয়া উচিত না।

একবার চেম্বারটি একত্রিত হয়ে গেলে, এটি 2 মিনিটের জন্য বিশ্রামে রেখে দেওয়া হয় যাতে কোষগুলি নীচে পড়ে যায় এবং তাদের দৃশ্যায়ন এবং গণনা আরও সহজ হয়।

বিশ্রামের পরে, এটি পর্যবেক্ষণের জন্য হালকা মাইক্রোস্কোপের মঞ্চে স্থাপন করা হয়। প্রথমে এটি একটি 10 ​​এক্স উদ্দেশ্য নিয়ে ফোকাসযুক্ত এবং যদি প্রয়োজন হয় তবে এটি 40X এ যায়।

এর দৃশ্যায়ন উন্নত করতে, মাইক্রোস্কোপ থেকে আলোর প্যাসেজ হ্রাস করা হয়। এটি করার জন্য, কনডেনসারটি কম করা হয় এবং ডায়াফ্রামটি সামান্য বন্ধ থাকে।

কাউন্টিং

শ্বেত রক্ত ​​কণিকা বা লিউকোসাইটের গণনার জন্য, চারটি মাঝারি কোণার স্কোয়ারের পুরো পৃষ্ঠ এবং প্রতিটি রেটিকুলামের কেন্দ্রীয় বর্গক্ষেত্র গণনা করতে হবে।

উপরের বাম কোণে বর্গাকারে গণনা শুরু হয়। আপনি প্রথম সারির প্রথম বর্গক্ষেত্র থেকে শুরু করুন, বাম থেকে ডানদিকে আপনি বিপরীত প্রান্তে পৌঁছানো পর্যন্ত।

সেখানে আপনি নীচে যান এবং অন্য প্রান্তে না পৌঁছানো অবধি ডান থেকে বাম দিকে ফিরে তাকাবেন এবং এইভাবে, প্রতিটি গ্রিডের মধ্যে থাকা ঘরগুলি জিগজ্যাগ ফ্যাশনে গণনা করা হয়। প্রতিটি মিডিয়ান স্কোয়ারের 16 টি গ্রিড গণনা করা হয়।

কোনও কক্ষকে দু'বার গণনা এড়াতে, প্রতিটি গ্রিডের সীমানা রেখায় অবস্থিত এমন কক্ষগুলি সম্পর্কে নিয়ম রয়েছে। বাম এবং শীর্ষ লাইনের কক্ষগুলি গণনা করা হয় এবং ডান এবং নীচের লাইনের কক্ষগুলি উপেক্ষা করা হয়।

একটি ম্যানুয়াল সেল কাউন্টার অবশ্যই উপলব্ধ থাকতে হবে যাতে অপারেটরটি ডিভাইস কীটি যতবার না কক্ষগুলি পর্যবেক্ষণ করা যায় ততবার চাপতে পারে। কাউন্টারটির ব্যবহারের সাথে অপারেটরটি অণুবীক্ষণিক ক্ষেত্র থেকে সন্ধান না করেই গণনা করতে পারে। গণনা শেষে, আপনি গণিত কক্ষের মোট সংখ্যা দেখতে পাবেন।

গণনাগুলি

গণনার জন্য আপনি বিভিন্ন উপায়ে এগিয়ে যেতে পারেন। একটি একক গ্র্যাচিকুল গণনা করা যায় বা উভয়ই গণনা করা যায় এবং উভয়ই গড় হয়। এই দুটি পরিস্থিতিতে, গণনা করা ঘরগুলি অবশ্যই একটি ফ্যাক্টর দ্বারা গুণিত হতে হবে, যা এই ক্ষেত্রে 40 হবে And এবং এইভাবে মিমি ³ প্রতি মোট গণনা ^{পাওয়া যায়} ।

তবে যদি দুটি গ্রিড গণনা করা হয় এবং গড় না নেওয়া হয় তবে এটি অবশ্যই 20 এর দ্বারা একটি আলাদা ফ্যাক্টর দ্বারা গুন করতে হবে।

মাল্টিপ্লিকেশন ফ্যাক্টর

এখানে গুণক গুণকটি কীভাবে গণনা করা হয় তা এখানে।

পাতন টাইটার, চেম্বারের উচ্চতা এবং গণনা করা অঞ্চল সহ গণনাগুলির জন্য বিভিন্ন ডেটা বিবেচনা করা হয়।

ক্রম

লিউকোসাইট গণনার জন্য ব্যবহৃত স্ট্যান্ডার্ড হ্রাস 1:20।

চেম্বারের উচ্চতা

চেম্বার এবং রক্ত ​​কোষের শীটের মাঝে উচ্চতা 0.1 মিমি।

কাউন্টেড এরিয়া

যদি 1 মিমি ² ক্ষেত্রের 5 বর্গ গণনা করা হয় তবে এর অর্থ হ'ল মোট গণনা ক্ষেত্রটি 5 মিমি ² । মোট ভলিউম গণনা করতে এই ডেটাটি অবশ্যই চেম্বারের উচ্চতা দ্বারা গুণিত করতে হবে। অর্থাৎ 5 মিমি ² x 0.1 মিমি = 0.5 মিমি ³ ।

সূত্র এবং গণনা

আমাদের যে ডেটা রয়েছে তা দিয়ে বলা হয়:

যদি 0.5 মিমি ³ - এ থাকে --- গনিত কোষের সংখ্যা

1 মিমি ³ --- এ থাকবে - কোষগুলির এক্স এন °

কক্ষের এক্স নং = (x নম্বর গণিত কোষগুলির সংখ্যা) / 0.5 মিমি ³

তবে দুর্বলতাও আমলে নিতে হবে। সুতরাং সূত্রটি নিম্নরূপ:

(x 1 গণনা করা কক্ষের সংখ্যা) x 20 / 0.5 মিমি ³

পরিশেষে, সংক্ষিপ্তসার হিসাবে, গণনা করা ঘরের সংখ্যা 40 দ্বারা গুণ করা যায়। সুতরাং, মিমি ³ প্রতি লিউকোসাইটের মান ^{পাওয়া যায়} ।

যদি দুটি রেটিকেল গণনা করা হয়, তবে গণনা করা অঞ্চলের ডেটা পরিবর্তন করা হবে, যা এই ক্ষেত্রে 10 স্কোয়ার, অর্থাৎ 10 মিমি ^{2 হবে} । এবং মোট গণিত ভলিউম 1 মিমি 3। সূত্রটি হ'ল:

(x 1 গণনা করা কক্ষের সংখ্যা) x 20/1 মিমি ³

সুতরাং, এক্ষেত্রে গুণনের গুণক 20 হবে।

ভুল

-যদি ক্যামেরাটি লোড করার সময় তরল দিয়ে ছাড়িয়ে যায় বা ছাড়িয়ে যায়, ক্যামেরার উচ্চতা পৃথক হবে। এই ফলাফল গণনা আসল জিনিস থেকে উচ্চতর হয়। যদি আপনি গজ বা তুলো দিয়ে অতিরিক্ত সরিয়ে দেওয়ার চেষ্টা করেন তবে এটি একটি বিশাল ভুল is এই ক্রিয়াটি কোষকে ঘন করতে এবং গণনা বাড়িয়ে তুলবে।

-যদি এটি খারাপভাবে লোড হয়, তবে গণনাটি আসলটির চেয়ে কম হবে।

-যদি ক্যামেরাটি মাউন্ট করে শুকানোর অনুমতি দেওয়া হয় তবে এটি গণনা করা আর সম্ভব নয় কারণ এটি ভুল ফলাফল দেবে।

- যদি চেম্বারটি লোড করার আগে নমুনাটির হ্রাস ভালভাবে মিশ্রিত না হয় তবে পড়তে ত্রুটির ঝুঁকি রয়েছে, কারণ কোষগুলি একজাতীয়ভাবে বিতরণ করা হবে না। সুতরাং, কোষগুলির নিম্ন বা উচ্চতর ঘনত্ব থাকবে, তার উপর নির্ভর করে তরলটির পৃষ্ঠ থেকে নলটি যথাক্রমে নেওয়া হয়েছে কিনা বা টিউবের নীচে থেকে নেওয়া উচিত on

- বুদবুদগুলির উপস্থিতি কোষের সঠিক দৃশ্যায়ন এবং বিতরণে হস্তক্ষেপ করে জালিকার প্রবেশের জন্য তরল পরিমাণ হ্রাস করে। এই সবগুলি ফলাফলগুলিতে উল্লেখযোগ্যভাবে প্রভাবিত করে।

-কালীন গণনা, প্রতিটি বড় স্কোয়ারটি হারিয়ে যাওয়া এড়াতে সম্পূর্ণ না হওয়া পর্যন্ত মাইক্রোস্কোপ থেকে তাকাবেন না।

- ত্রুটির এক কারণ হ'ল মাউন্ট করার পরে ক্যামেরাটি ঝুঁকছে। এই কারণে, মাইক্রোস্কোপের পর্যায়টি অবশ্যই সাবধানে উত্থাপন করা উচিত।

সুপারিশ

যদি কোনও কারণে আপনি চেম্বারটি পূরণের ক্ষেত্রে অস্বাভাবিকতা সনাক্ত করেন তবে আপনাকে সেই প্রস্তুতিটি পৃথকীকরণ, চেম্বারটি পরিষ্কার এবং স্ক্র্যাচ থেকে পুনরায় সাজানো উচিত।

ক্রস হেয়ার স্ক্র্যাচ এড়াতে ক্যামেরা পরিষ্কার করার সময় খুব যত্ন নিন। অন্যদিকে, সচেতন থাকুন যে হেমাটোমেট্রিক স্লাইডটি নাজুক এবং ভঙ্গুর। অনুপযুক্ত হ্যান্ডলিং এটি ভেঙে দিতে পারে।

আপনি গণনা শুরু করার আগে, নিশ্চিত করুন যে কক্ষগুলি ভাল বিতরণ করা হয়েছে। কোষগুলির একটি অসম বিতরণ দুর্বল নমুনা মিশ্রণ বা হ্রাস থেকে ঘটে। যদি এটি ঘটে তবে অবশ্যই সমাবেশটি পুনরাবৃত্তি করতে হবে।

কোষগুলি ভাল বিতরণ করা হয়েছে কিনা তা জানার একটি উপায় প্রতিটি বৃহত বর্গক্ষেত্রের গণনা তুলনা করে প্রতিটি বর্গ দ্বারা গণিত কোষের সংখ্যা অতিরঞ্জিতভাবে আলাদা হওয়া উচিত নয়।

- যদি সাদা রক্তকণিকার গণনা 50,000 মিমি ^{3 এর} উপরে হয় তবে এটি গণনা পুনরাবৃত্তি করার পরামর্শ দেওয়া হয় ^{, এটি} আরও বেশি ক্ষয় করে দেয়।

-যদি আপনি দুর্বলতা পরিবর্তন করেন তবে আপনাকে অবশ্যই গুণন গুণকে পুনরায় গণনা করতে হবে, কারণ এটি সূত্রকে প্রভাবিত করে।

তথ্যসূত্র

1. কার্ডোনা-মায়া ডাব্লু, বারদুগো জে, ক্যাডাভিড এ। ম্যাকলারের চেম্বার এবং নিউউবারের চেম্বার ব্যবহার করে শুক্রাণু ঘনত্বের তুলনা। অ্যাক্টাস ইউরোল এসপি 2008; 32 (4): 443-445। উপলভ্য: সাইয়েলো।
2. নিউবাউর চেম্বার (2018, মার্চ 27) উইকিপিডিয়া, মুক্ত বিশ্বকোষ থেকে. পরামর্শের তারিখ: 04:50, জুন 23, 2019 এস.ইউইকিপিডিয়া.র.
3. মেনেসেস এ, রোজাস এল, সিফন্টেস এস ট্রাইকোমোনাস যোনিলিসের ঘনত্ব নির্ধারণের জন্য নিউবাউয়ার চেম্বারে একটি বিকল্প গণনা পদ্ধতির প্রয়োগ। রেভ। কিউব মেড ট্রপ 2001; 53 (3): 180-8। উপলভ্য: রিসার্চগেট.নেট
4. গেমেজ-পেরেজ রোল্ড ই। স্পার্মোগ্রামের বিশ্লেষণ। রেভ। ভেনিজ এন্ডোক্রিনল। Metab। 2007; 5 (2): 19-20। উপলব্ধ: ve.scielo
5. কারাবো বিশ্ববিদ্যালয়ের স্কুল অফ বায়ানালাইসিসের হেমাটোলজির ব্যবহারিক গাইড। ভেনিজুয়েলা। 1998