ল্যাকটেজড ব্রোথ: ভিত্তি, প্রস্তুতি এবং ব্যবহার - জীববিদ্যা - 2025

ল্যাকটোজ ঝোল অ একটি উপায় হল - নির্বাচনী তরল সংস্কৃতি মাধ্যম হিসেবে প্রাথমিকভাবে ব্যবহৃত একটি প্রক্রিয়াজাত খাদ্য, দুগ্ধজাত বা জল থেকে জীবাণু বিশ্লেষণের সালমোনেলা প্রজাতির একলা প্রাক সমৃদ্ধি। এটি খাদ্যদ্রব্যের জন্য মাইক্রোবায়োলজিকাল স্পেসিফিকেশন সম্পর্কিত আন্তর্জাতিক কমিশন দ্বারা প্রস্তাবিত (আইসিএমপিএফ)।

মিডিয়ামে জেলটিন, মাংসের নির্যাস এবং ল্যাকটোজের এনজাইমেটিক ডাইজেস্ট রয়েছে, ব্যাকটিরিয়া বৃদ্ধির জন্য প্রয়োজনীয় পদার্থ রয়েছে। তদুপরি, ল্যাকটোজ একটি উত্তেজক কার্বোহাইড্রেট, অতএব কিছু কলিফর্মগুলি গ্যাসের উত্পাদন দিয়ে এটি ভেঙে দিতে সক্ষম।

টারবিডিটি সহ ল্যাকটেড ব্রোথগুলি। সূত্র: লেখক এমএসসি তোলা ছবি। মেরিলসা গিল

এই কারণে, আমেরিকান পাবলিক হেলথ অ্যাসোসিয়েশন (এপিএইচএ) দ্বারা ল্যাকটোজ ব্রোথকে মোট এবং ফেচাল কোলিফর্ম ব্যাকটিরিয়াগুলির অনুমানমূলক গবেষণার জন্য সুপারিশ করা হয়, এটি মোস্ট প্রোব্যাবল সংখ্যার (এমপিএন) স্ট্যান্ডার্ড প্রযুক্তিতে বিকল্প লরিল সালফেট ট্রাইপটোজ ব্রোথের বিকল্প হিসাবে উপযুক্ত করে তোলে।), খাদ্য, দুধ এবং পৃষ্ঠের জলের, ভূগর্ভস্থ, বিনোদনমূলক, গার্হস্থ্য এবং শিল্প বর্জ্য নমুনার জীবাণুবিজ্ঞানের বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহৃত।

ভিত্তি

কিছু নমুনার মাইক্রোবায়োলজিক বিশ্লেষণের জন্য, প্রাক-সমৃদ্ধকরণের ধাপটি একটি নির্দিষ্ট অণুজীবকে পুনরুদ্ধার করতে সক্ষম হতে পারে যা খুব কম পরিমাণে বা প্রতিকূল পরিস্থিতিতে হতে পারে যা তার কার্যক্ষমতার লঙ্ঘন বা হ্রাস করে।

শুকনো এবং প্রক্রিয়াজাত খাবারগুলির ক্ষেত্রে এটি সম্ভবত সালমনেলাস এসপি দ্বারা দূষিত। এই ক্ষেত্রে, ব্যাকটিরিয়া উপস্থিত থাকলে, তারা পণ্য উত্পাদন প্রক্রিয়া চলাকালীন শারীরিক এবং রাসায়নিক নির্যাতনের শিকার হয়েছে।

এমনভাবে যে জীবাণুগুলি ডিহাইড্রেশন, ইনহিবিটরি বা বিষাক্ত পণ্যগুলির সংস্পর্শ এবং অন্যদের মধ্যে আরও বেশি পরিমাণে অন্যান্য ব্যাকটেরিয়ার উপস্থিতি দ্বারা উত্পন্ন ওভারল্যাপের মতো বিরূপ কারণগুলির সংস্পর্শে আসে।

এই অর্থে, ল্যাকটোজ ব্রোথের অণুজীবের ক্ষতিগ্রস্থ কাঠামোগুলি মেরামত করার প্রভাব রয়েছে যার ফলে এটি পুনরুত্পাদন এবং পুনরুত্পাদন ঘটায়, যাতে এটি সনাক্ত করা যায়।

তেমনি, ল্যাকটোজ ব্রোথের প্রতিরোধমূলক পদার্থগুলিকে পাতলা করার ক্ষমতা রয়েছে যা এর কার্যক্ষমতার উপর প্রভাব ফেলতে পারে, এর বিকাশের অনুমতি দেয়। তদ্ব্যতীত, ল্যাকটোজ ব্রোথের পুষ্টির সংমিশ্রণ অন্যান্য অণুজীবের তুলনায় সালমোনেলা এসপির বর্ধনের পক্ষে কৌশলগত।

চূড়ান্ত শনাক্তকরণের জন্য, এটি অবশ্যই অন্যান্য সংজ্ঞাবদ্ধ সংস্কৃতি মিডিয়ায় সাবক্ল্যাচার করা উচিত।

অন্যদিকে, মাঝারিটির সংমিশ্রণটি গ্যাস-উত্পাদনকারী ল্যাকটোজ ফেরেন্টিং মাইক্রো অর্গানিজমগুলি সনাক্ত করার অনুমতি দেয়।

প্রস্তুতি

ল্যাকটোজ ব্রোথের এক লিটার তৈরি করতে, ডিহাইড্রেটেড মিডিয়ামের 13 গ্রাম ওজন করতে হবে এবং 1000 মিলি পাত্রে জলে দ্রবীভূত করতে হবে।

জলে মাঝারি দ্রবীভূত করতে সাহায্যের জন্য দ্রবণটি কিছুটা গরম করা যায়, তবে খুব বেশি নয়।

সমজাতীয় একবার, সমাধানটি নিম্নরূপ প্রস্তুত করা হয়: যদি ব্রোথটি কলিফর্মগুলি অনুসন্ধান করতে ব্যবহৃত হয়, তবে পরীক্ষার টিউবগুলির একটি র্যাক প্রস্তুত করা হয়, যার কাছে একটি ডুরহাম গাঁজন নলটি উল্টোদিকে.োকানো হয়।

ডুরহাম টিউব একটি অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ বিশদ, কারণ এটি গ্যাস গঠনের সনাক্তকরণের অনুমতি দেবে, কলিফর্মগুলির সন্ধানে দুর্দান্ত মূল্যবোধের একটি ডেটা।

টিউবগুলি প্রস্তুত হয়ে গেলে, ল্যাকটোজ ব্রোথের 10 মিলি তাদের মধ্যে বিতরণ করা হয়, এমন একটি পরিমাণ যা পুরো ডুরহাম নলকে coverাকতে পর্যাপ্ত পরিমাণে আবশ্যক।

যদি ল্যাকটোজ ঝোলটি প্রাক-সমৃদ্ধ করার ঝোল হিসাবে ব্যবহার করা হয় তবে এটি ডরহাম গাঁজন নল রাখার প্রয়োজন নেই। এই ক্ষেত্রে, বৃহত পরিমাণের মাঝারি প্রয়োজন (225 মিলি), যা 500 মিলি বোতল, প্রশস্ত মুখ এবং একটি থার্মো-প্রতিরোধী স্ক্রু ক্যাপ দিয়ে পরিবেশন করা হবে।

এরপরে, টিউবগুলি বা ফ্লাস্কগুলি 15 মিনিটের জন্য 121 ডিগ্রি সেলসিয়াসে অটোক্ল্যাভ করা হয়।

মাধ্যমটি অবশ্যই 25 ডিগ্রি সেলসিয়াসে 6.9 ± 0.2 এর একটি চূড়ান্ত পিএইচতে থাকতে হবে

ব্রোথগুলি ব্যবহার না করা পর্যন্ত ফ্রিজে রাখা হয়।

ব্যবহারের আগে, ব্রোথগুলি অবশ্যই ঘরের তাপমাত্রায় আনতে হবে।

অন্যদিকে, ল্যাকটোজ ঝোলও ডাবল ঘনত্বের মধ্যে প্রস্তুত করা যেতে পারে।

কিছু পরীক্ষাগার ল্যাকটোজ ব্রোথকে পিএইচ সূচক হিসাবে ব্রোমোক্রেসোল বেগুনি যুক্ত করে, টিউবগুলি দেখানোর জন্য যেখানে রঙ পরিবর্তনের কারণে ল্যাকটোজের গাঁজন রয়েছে। এই ক্ষেত্রে, ঝোল একটি বেগুনি রঙ নেয় এবং যদি গাঁজন থাকে তবে তা হলুদ হয়ে যায়।

অ্যাপ্লিকেশন

মাইক্রোবায়োলজি পরীক্ষাগারে, ল্যাকটোজ ঝোল ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয় কারণ এটি তুলনামূলকভাবে সস্তা ব্যয়বহুল যা নির্ভরযোগ্য এবং দ্রুত ফলাফল দেয় (24-28 ঘন্টা)।

এটি খাদ্য এবং জলে মোট এবং মল কলিফর্মগুলির বিশ্লেষণের জন্য বা সালমোনেলার ​​প্রাক সমৃদ্ধ ব্রোথ হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে।

প্রি-সমৃদ্ধি

প্রাক-সমৃদ্ধকরণ নমুনা সমৃদ্ধ করার এক ধাপ আগে যা প্রক্রিয়াজাত খাবারগুলিতে সালমনেলা জেনাসের ব্যাকটেরিয়ার পুনরুদ্ধারে ব্যাপক উন্নতি করে।

এটি করার জন্য, শক্ত খাবারের নমুনা (25 গ্রাম) বা তরল (25 মিলি) ল্যাকটোজ ব্রোথের 225 মিলি পরিমাণে বীজযুক্ত হয়, 24 থেকে 48 ঘন্টা ধরে থাকে ub পরবর্তীকালে, এটি সমৃদ্ধ মাধ্যম যেমন সেলেনাইট সিস্টাইনাইন ব্রোথ বা টেট্র্যাথিয়নেট ব্রোথের উপ-সংস্কৃতিযুক্ত হবে। তারপরে এক্সএলডি এবং এসএস নির্বাচনী মিডিয়াতে যান।

মোট এবং মল কলিফর্ম বিশ্লেষণ

এটি মলদূষণের সূচক হিসাবে একটি দুর্দান্ত মাধ্যম।

এই কারণে, ল্যাকটোজ ব্রোথ সর্বাধিক সম্ভাব্য সংখ্যা পদ্ধতি দ্বারা কলিফোর্ম অধ্যয়নের অনুমানমূলক পর্যায়ে আদর্শ।

যে নমুনাগুলিতে বিপুল পরিমাণে কলিফর্মগুলি সন্দেহ করা হয়, তার একটি অল্প পরিমাণে ইনোকুলেটেড (1 মিলি) করা হবে, যখন নমুনাগুলিতে যেখানে কম পরিমাণে কলিফর্মগুলি সন্দেহ করা হয়, সেখানে নমুনার একটি বৃহত পরিমাণ (10 মিলি) ইনোকুলেট করা হবে।

বিশ্লেষণের জন্য, ব্যবহৃত প্রতিটি ঘনত্বের জন্য 3-5 টিউবগুলির একটি ব্যাটারি তৈরি করে, 10 ^-1, 10 ^-2, 10 ^{-3 টি} দ্রবণ তৈরি করা হয়।

প্রতিটি দুর্বলতা থেকে, একই ভলিউম ল্যাকটোজ ব্রোথগুলিতে সিড করা হয়।

টিউবগুলি 24 ঘন্টা ধরে থাকে। নেতিবাচক ব্রোথগুলি আরও 24 ঘন্টার জন্য আবদ্ধ থাকে।

ফলাফলগুলির ব্যাখ্যা দুটি বৈশিষ্ট্য পর্যবেক্ষণ করে করা হয়: প্রথমটি টার্বিডটির উপস্থিতি বা অনুপস্থিতি এবং এই মাধ্যমের কোনও পিএইচ সূচক না থাকায় কোনও রঙ পরিবর্তন হবে না।

দ্বিতীয়টি হ'ল গ্যাসের উত্পাদন বা না। ডুরহাম নলটিতে গ্যাস এর ভিতরে এক বা একাধিক বায়ু বুদবুদগুলির উপস্থিতি দ্বারা সহজেই প্রমাণিত হয়।

উভয় বৈশিষ্ট্য পর্যবেক্ষণ করা হয়, এটি গ্যাস উত্পাদনের সাথে টার্বিডিটি হিসাবে বিবেচনা করা হয় তবে এটি ইতিবাচক হিসাবে বিবেচিত হয়। ইতিবাচক টিউবগুলি নিশ্চিতকরণ মাধ্যমগুলিতে পুনরায় বীজযুক্ত হওয়া উচিত (2% উজ্জ্বল সবুজ পিত্ত্র ঝোল এবং ইসি ঝোল)।

মাধ্যমের মান নিয়ন্ত্রণ control

- মাধ্যমটি প্রস্তুত করার সময়, ডারহামস টিউবগুলি স্থাপন করতে ভুলে যাওয়া গুরুত্বপূর্ণ নয় যদি এর উদ্দেশ্য হ'ল কলিফর্মগুলি অধ্যয়ন করা হয়।

- নির্বীজন করার আগে মাঝারিটি অতিরিক্ত গরম করবেন না।

- জীবাণুমুক্ত করার আগে পরীক্ষার টিউবগুলিতে বিতরণ করুন, এর পরে কখনও নয়।

- মাঝারিটি 3 মাসের বেশি বয়সী ব্যবহার করবেন না।

- আপনি যদি মাধ্যমের স্বাভাবিক বৈশিষ্ট্যে কোনও পরিবর্তন লক্ষ্য করেন তবে ব্যবহার করবেন না।

- ল্যাকটোজ ব্রোথের একটি ব্যাচ প্রস্তুত করার সময়, ইসেরিচিয়া কোলি, এন্টারোব্যাক্টর এয়ারোজেনেস, সিট্রোব্যাক্টর ফ্রুন্দি এবং ক্লিবিসিলা নিউমোনিয়া হিসাবে পরিচিত স্ট্রেনগুলি বপন করে এর গুণমানটি পরীক্ষা করুন। তারা গ্যাস উত্পাদন (ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ) সহ খুব ভাল বৃদ্ধি পায় grow

- এটিতে সিডোমোনাস অ্যারুগিনোসা, সালমোনেলা টাইফিমিউরিয়াম বা এন্টারোকোকাস ফ্যাকালিসও অন্তর্ভুক্ত থাকতে পারে, যা ভাল বৃদ্ধি পায় তবে গ্যাস উত্পাদন ছাড়াই (নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ))

- এটি লক্ষ করা উচিত যে ডিহাইড্রেটেড মিডিয়ামের মূল রঙ বেইজ এবং প্রস্তুত মিডিয়ামের রঙটি খুব হালকা এবং স্বচ্ছ হলুদ। রঙ বা চেহারা পরিবর্তন যদি পর্যবেক্ষণ করা হয় তবে তা অবনতি হতে পারে।

তথ্যসূত্র

1. অ্যাসেভেদো আর, সেভেরিচ সি, কাস্টিলো এম। এনভায়রনমেন্টাল বায়োলজি এবং মাইক্রোবায়োলজি। (2013) 1 ম সংস্করণ। কলম্বিয়া এর কার্টেজেনাস বিশ্ববিদ্যালয়।
2. কামাচো এ, গাইলস এম, অর্টেগেন এ, পালাও এম, সেরানানো বি এবং ভেলাসকেজ ও। (২০০৯)। খাবারগুলির মাইক্রোবায়োলজিকাল বিশ্লেষণের কৌশলগুলি। দ্বিতীয় সংস্করণ। রসায়ন অনুষদ, ইউএনএএম। মক্সিকো।
3. কনডা প্রোনাডিস ল্যাবরেটরিজ। 2017. ল্যাকটোজ ঝোল ডাবল ঘনত্ব (ইউরোপীয় ফার্ম।)
4. ফার্নান্দেজ-রেনডেন সি, ব্যেরেরা-এসকরসিয়া জি। মেক্সিকো লেকের জোকিমিলকো পলল থেকে কলিফর্ম ব্যাকটেরিয়া উত্তোলনের জন্য প্রযুক্তির তুলনা। আর্জেন্ট microbiol। 2013; 45 (3): 180-184। উপলভ্য: scielo.org।
5. সটোমায়োর এফ, ভিলাগ্রা ভি, ক্রিস্টাল্ডো জি, সিলভা এল, ইবিয়েজ এল। সেন্ট্রাল, কর্ডিলেরা এবং রাজধানী পৌরসভা বিভাগের জেলাগুলিতে আর্টেসিয়ান কূপ জলের জীবাণুবিজ্ঞানের গুণমান নির্ধারণ। মেম। ইনস্টিটিউট তদন্ত। বিজ্ঞান. স্বাস্থ্য 2013; 11 (1): 5-14। থেকে উপলব্ধ: সাইলেও.আইমিক্স।