টেট্র্যাথিয়নেট ব্রোথ: যুক্তিযুক্ত, প্রস্তুতি এবং ব্যবহার - জীববিদ্যা - 2025

Tetrathionate ঝোল বা ঝোল টিটি সমৃদ্ধি এবং মহাজাতি সালমোনেলা প্রজাতির পুনরুদ্ধারের জন্য নির্বাচনী তরল সংস্কৃতি মাধ্যম। এটি মেলারার দ্বারা তৈরি করা হয়েছিল এবং পরে কাউফম্যান দ্বারা সংশোধন করেছিলেন, এ কারণেই সেখানে যারা এটি মেলার-কাউফম্যান ব্রোথ বলে থাকেন।

মূল মাধ্যমের মধ্যে রয়েছে প্রোটোজ পেপটোনস, ক্যালসিয়াম কার্বোনেট এবং সোডিয়াম থায়োসালফেট। কাউফম্যান এতে পিত্ত সল্ট যুক্ত করে এবং উজ্জ্বল সবুজ দিয়ে আরও একটি মড্যালিটি তৈরি করেছে। এই পদার্থগুলি কলিফর্মগুলির বৃদ্ধিকে বাধা দেয় এবং প্যাথোজেনিক ব্যাকটিরিয়ার বিকাশের জন্য মাঝারিটি মুক্ত রাখে, এই ক্ষেত্রে সালমনেলা el

টেট্র্যাথিয়নেট ব্রোথে আয়োডিন আয়োডিন দ্রবণ যুক্ত করা। সূত্র: ম্যানুয়েল আলমাগ্রো রিভাস

পরিবর্তনটি খুব সফল হয়েছিল কারণ এটি মাধ্যমের সংবেদনশীলতা উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করেছিল। এই কারণে এটি বর্তমানে যে কোনও ধরণের নমুনায় সালমনেলাসের সন্ধানের জন্য দরকারী তবে বিশেষত শক্ত বা তরল মল এবং খাবারের জন্য।

এর প্রস্তুতি দুটি পর্যায় নিয়ে গঠিত; বাণিজ্যিক মাধ্যমটি হ'ল টেট্র্যাথিয়নেট ব্রোথ প্রস্তুত করার জন্য বেস এবং তারপরে, যাতে টিট্রাথিয়নেট গঠিত হতে পারে, মাঝারিটি পূরণের জন্য একটি আয়োডিনযুক্ত আয়োডিন দ্রবণ যুক্ত করা হয়।

আমেরিকান পাবলিক হেলথ অ্যাসোসিয়েশন (এএফএএইচ) স্যালমনেল্লার নমুনা সমৃদ্ধ করার জন্য উজ্জ্বল সবুজ দিয়ে পরিপূরক টেট্র্যাথিয়নেট ব্রোথ ব্যবহারের পরামর্শ দেয়, কারণ এটি টেট্র্যাথিয়নেট ব্রথ এবং সেলেনাইট ব্রোথের চেয়ে বেশি নির্বাচিত।

সাধারণভাবে, সালটোনেলা জেনাসের ব্যাকটেরিয়ার উপস্থিতি স্বল্প পরিমাণে সন্দেহ করা হয় বা যখন বাধাজনিত পদার্থের সংস্পর্শে বা তাদের কার্যকারিতা হ্রাস করে এমন শিল্প প্রক্রিয়াগুলির দ্বারা নির্যাতন করা হয় তখন সাধারণভাবে, টিট্রাথিয়নেট ব্রোথ আদর্শ ideal

ভিত্তি

পেপটোনগুলি উপস্থিত প্যানট্রেটিক ডাইজেস্ট কেসিনের প্যানক্রিয়াটিক ডাইজেস্ট এবং পশুর টিস্যুর পেপটিক হজমের সাথে মিল রাখে। এগুলি ব্যাকটিরিয়া বৃদ্ধির জন্য কার্বন, নাইট্রোজেন এবং সাধারণ পুষ্টির উত্স সরবরাহ করে।

তার অংশের জন্য, সোডিয়াম থায়োসালফেট টিট্রাথিয়নেট গঠনের জন্য আয়োডিনযুক্ত দ্রবণটির সাথে প্রতিক্রিয়া জানায়। এটি কলিফর্মগুলির বিকাশকে বাধা দেয় এবং ব্যাকটিরিয়ার বিকাশের পক্ষে দেয় যা এনজাইম টেট্র্যাথিয়নেট রিডাক্টেস ধারণ করে, তাদের মধ্যে সালমোনেলা প্রজাতি, তবে প্রোটিয়াসও রয়েছে।

পিত্ত সল্ট বেশিরভাগ গ্রাম পজিটিভ এবং কিছু গ্রাম নেগেটিভ ব্যাকটেরিয়া (কলিফর্ম) এর জন্য বাধা পদার্থ হিসাবেও কাজ করে।

ক্যালসিয়াম কার্বনেট টিট্রাথিয়োনেটের পচনের ফলে উত্পন্ন বিষাক্ত পদার্থগুলি শোষণ করে, যা সালফিউরিক অ্যাসিড গঠন করে। এই অর্থে, ক্যালসিয়াম কার্বোনেট মাঝারিটির পিএইচ স্থিতিশীল রেখে অম্লতাটিকে নিরপেক্ষ করে।

উজ্জ্বল সবুজ রঙের পরিবর্তনের ক্ষেত্রে, এই পদার্থটি সালমোনেলা জেনাস ব্যতীত অন্য জীবাণুগুলিকে বাধা দিয়ে টেট্র্যাথিয়নেট ব্রোথের নির্বাচনী শক্তি বাড়ায়।

প্রস্তুতি

-টেট্র্যাথিয়নেট ব্রোথ

আয়োডিন আয়োডিন দ্রবণ

ওজন করতে:

• আয়োডিন 6 গ্রাম।
• পটাসিয়াম আয়োডাইড 5 গ্রাম।

পটাশিয়াম আয়োডাইড নির্বীজন নিঃসৃত পানিতে প্রায় 5 মিলি দ্রবীভূত হয়, তারপর মিশ্রণটি উত্তপ্ত হওয়ার সময় আয়োডিনটি অল্প অল্প করে যুক্ত হয়। এটি সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত হওয়ার পরে, 20 মিলিলিটারের চূড়ান্ত পরিমাণে পৌঁছানো পর্যন্ত জীবাণুমুক্ত পাত্রে জল দিয়ে চিহ্নটি তৈরি করুন।

টেট্র্যাথিয়নেট ব্রোথের জন্য বেস মিডিয়াম

ডিহাইড্রেটেড মাঝারি ওজনের 46 গ্রাম ওজন এবং 1 লিটার জীবাণুমুক্ত পাত্রে পানিতে স্থগিত করুন। সম্পূর্ণ দ্রবীভূত হওয়া পর্যন্ত মিশ্রণ এবং উত্তাপ, এটি কয়েক মিনিটের জন্য কেবল একটি ফোড়ন এনে দিতে পারে। অটোক্লেভ করবেন না। মাঝারি বেসটি প্রায় 45 ডিগ্রি সেলসিয়াসে ঠান্ডা হওয়ার অনুমতি দেওয়া হয় এবং সেই সময় 20 মিলি আয়োডিনযুক্ত দ্রবণ যোগ করা হয়।

মাঝারি মধ্যে আয়োডিনযুক্ত দ্রবণ যুক্ত করার পরে এটি অবিলম্বে ব্যবহার করা উচিত। আপনি যদি পুরো মিশ্রণটি ব্যবহার করতে না চান তবে নিম্নলিখিত হিসাবে এগিয়ে যান:

বেস মিডিয়ামের 10 মিলি টিউবগুলিতে বিতরণ করা হয় এবং কেবলমাত্র নমুনাগুলির সাথে ইনোকুলেট করাতে তাদের আয়োডিনযুক্ত দ্রবণের 0.2 মিলি যোগ করা হয়।

যেগুলি ব্যবহার করা হচ্ছে না তাদের এখনও ফ্রিজে সংরক্ষণ করা যেতে পারে, তবে মাঝারিটি নির্বীজন না হওয়ায় আদর্শটি প্রয়োজনীয় পরিমাণটি প্রস্তুত করা আদর্শ।

আয়োডিনযুক্ত আয়োডিন দ্রবণ যোগ করার আগে মাঝারি রঙটি একটি সাদা বৃষ্টিপাতের সাথে দুধযুক্ত সাদা এবং সংযোজন পরে এটি ঘন বৃষ্টিপাতের সাথে বাদামী হয়। পরিলক্ষিত বৃষ্টিপাত স্বাভাবিক এবং ক্যালসিয়াম কার্বোনেটের সাথে মিলিত হয় যা দ্রবীভূত হয় না। মাধ্যমের চূড়ান্ত পিএইচ 8.4 ± 0.2 হয়।

- উজ্জ্বল সবুজ সঙ্গে টেট্র্যাথিয়নেট ব্রোথ বৈকল্পিক

উজ্জ্বল সবুজ টেট্র্যাথিয়নেট ব্রোথ প্রস্তুত করার জন্য, উপরে বর্ণিত সমস্ত পদক্ষেপগুলি সম্পন্ন করা হয় তবে অতিরিক্তভাবে, 0.1% এ প্রস্তুত উজ্জ্বল সবুজ দ্রবণটির 10 মিলি মিশ্রণে যুক্ত করা হবে।

চকচকে সবুজ

এই সমাধানটি নিম্নরূপ প্রস্তুত করা হয়েছে:

উজ্জ্বল সবুজ রঙের 0.1 গ্রাম এবং ওজনিত পানির 100 মিলি স্থগিত করুন। মোট দ্রবীভূততা অর্জনের জন্য উত্তাপে উত্তাপ। অ্যাম্বার বোতল সংরক্ষণ করুন।

ব্যবহার

স্টলের নমুনাগুলির জন্য (মল সংস্কৃতি) নীচে প্রোটোকলটি রয়েছে:

ব্যবহারের জন্য ব্যবহৃত টেট্র্যাথিয়নেট ব্রোথের 10 মিলি দিয়ে একটি নলটিতে 1 গ্রাম কঠিন মল বা তরল স্টুলের 1 মিলি ইনোকুলেট করুন। প্রবলভাবে কাঁপুন এবং and-২৪ ঘন্টা 43 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেড এয়ারোবিকভাবে উত্সাহিত করুন।

এরপরে, সালমনেল্লার যেমন এসএস আগর, এক্সএলডি আগর, উজ্জ্বল সবুজ আগর, হেকটোয়েন এন্টারিক আগর ইত্যাদির জন্য বেছে বেছে একটি মাঝারি ক্ষেত্রে 10 থেকে 20 subl অ্যালকোট নিন।

সমান্তরালভাবে, সালমোনেলার ​​জন্য বাছাই করা মিডিয়াগুলি সমৃদ্ধ না করে সরাসরি নমুনা (মল) দিয়ে ইনোকুলেট করা উচিত। রেকটাল সোয়াব নমুনার জন্য, সংগৃহীত উপাদানটি নলটির মধ্যে স্রাব করুন এবং উপরে বর্ণিত হিসাবে এগিয়ে যান।

খাবারের নমুনাগুলির জন্য, 10 গ্রাম শক্ত খাবার বা 10 মিলি তরল খাবারের ওজন নিন এবং ব্যবহারের জন্য 100 মিলি প্রস্তুত টেট্র্যাথিয়নেট ব্রোথ সহ একটি বোতল inoculate করুন। উপরে বর্ণিত হিসাবে একইভাবে এগিয়ে চলুন তবে ৩° ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রা বাড়ান

যেমন দেখা যায়, নমুনা এবং ঝোলের মধ্যে সম্পর্ক সর্বদা 1:10 থাকবে।

QA তে

পরিচিত নিয়ন্ত্রণ স্ট্রেনগুলি সংস্কৃতি মাধ্যমটি পরীক্ষা করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। সর্বাধিক ব্যবহৃত এটিসিসির প্রত্যয়িত স্ট্রেন।

যে স্ট্রেনগুলি ব্যবহার করা হবে সেগুলি হ'ল সালমনেল্লা টাইফিমুরিয়াম এটিসিসি 14028, সালমোনেলা অ্যাবনি ডিএসএম 4224, সালমোনেলা এন্টারিটিডিস এটিসিসি 13066, ইসেরিচিয়া কোলি এটিসিসি 25922, এন্টারোকোকাস ফ্যাকালিস এটিসি 19433 এবং স্টাফিলোকক্কাস অ্যারিয়াস এটিসি 25923।

সালমোনেলা স্ট্রেনগুলির জন্য দুর্দান্ত বৃদ্ধি প্রত্যাশিত, যখন এসচেরিচিয়া কোলির দুর্বল বা নিয়মিত বৃদ্ধি হতে পারে এবং গ্রাম পজিটিভ স্ট্রেনগুলি (এন্টারোকোকাস এবং স্টাফিলোকোকাস) আংশিক বা সম্পূর্ণভাবে বাধা রয়েছে।

সুপারিশ

-যেমন এই মাধ্যমটি প্রোটিয়াসের বৃদ্ধিতে বাধা দেয় না, কিছু ল্যাবরেটরিগুলি এই মাইক্রোবায়াল স্ট্রেনের বিকাশ রোধ করতে 40 মিলিগ্রাম / নোভোবায়সিন এল ব্যবহার করে। আয়োডিন দ্রবণের আগে অ্যান্টিবায়োটিক যুক্ত করতে হবে।

-আয়োডিন আয়োডিন দ্রবণ সহ মিডিয়াম প্রস্তুত করার পরে, ইনোকুলেট করতে 2 ঘন্টার বেশি সময় লাগবে না।

- টিউবগুলিতে মাঝারিটি বিতরণ করার সময়, মিশ্রণটি তৈরি বৃষ্টিপাতকে পুনরুদ্ধার করতে অবিচ্ছিন্নভাবে সমজাতীয় হতে হবে।

কম দূষিত নমুনাগুলিতে, টিট্রাথিয়নেট ব্রোথটি 35-37 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় সঞ্চারিত হয় এবং 43 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে অত্যন্ত দূষিত নমুনাগুলিতে সঞ্চারিত হয়।

তথ্যসূত্র

1. কনডা প্রোনাডিস ল্যাবরেটরি। 2010. মেলার-কাফম্যানের মতে টেট্র্যাথিয়নেট ব্রোথ বেস। সহজলভ্য:
2. বিডি ল্যাবরেটরিজ। 2003. টেট্রেথিয়নেট ব্রোথ বেস। সহজলভ্য:
3. ব্রিটানিয়া ল্যাবরেটরিজ। 2015. টিটারনেট বেস ব্রোথ। সহজলভ্য:
4. বিবিএল মিডিয়া। 2005. সালমোনেলা প্রজাতির সংস্কৃতির জন্য টিউবগুলিতে প্রস্তুত।
5. ফোর্বস বি, সাহম ডি, ওয়েসফেল্ড এ (২০০৯)। বেইলি এবং স্কট মাইক্রোবায়োলজিকাল ডায়াগনোসিস। 12 এড। সম্পাদকীয় পানামেরিকানা এসএ আর্জেন্টিনা।
6. ফ্লোরস-আবাক্সাপকি জে, পুক-ফ্রাঙ্কো এম, হেরেদিয়া-নাভারেট এম, ভিভাস-রোজেল এম, ফ্রাঙ্কো-মনসারিয়াল জে। সোডিয়াম সেলেনাইট এবং সোডিয়াম টেট্র্যাথিয়নেটের সংস্কৃতি মিডিয়াগুলির মধ্যে তুলনা, উভয়ই 37 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেড এবং 42 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেড ক্যারিয়ারের মল থেকে সালমোনেলা এসপ্পির বিচ্ছিন্নতা। রেভ বায়োমেড 2003; 14 (4): 215-220