প্রোটিনেজ কে: বৈশিষ্ট্য, এনজাইমেটিক ক্রিয়াকলাপ, অ্যাপ্লিকেশন - জীববিদ্যা - 2025

কে proteinase একটা এনজাইম serine proteases গোষ্ঠীর, অর্থাৎ একাত্মতার হয়, এটা তার মধ্যম একটি catalytically সক্রিয় অ্যামিনো অ্যাসিড serine মধ্যে এবং হাইড্রোলাইসিসের দ্বারা পেপটাইড বন্ড ভঙ্গ ফাংশন আছে। ঘুরেফিরে, এই এনজাইম সাবটিলিসিন প্রোটিন (পেপটাইডেজ এস 8) এর পরিবারের অন্তর্গত।

প্রোটিনেস কে এর আণবিক ওজন (এমডাব্লু) ২৮,৯০০ ডালটনের এবং প্রথমবারের মতো বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল ছত্রাক এনজিওডোনটিয়াম অ্যালবামের নির্যাসে, যা পূর্বে ট্রটিরাচিয়াম অ্যালবাম লিমবার নামে পরিচিত।

প্রোটিনেজ কে এর আণবিক কাঠামো উত্স: লাইকিনিডিস

এটির উচ্চ প্রোটোলাইটিক ক্ষমতা রয়েছে, যা চুলে উপস্থিত কেরাটিনকে হ্রাস করতে সক্ষম হয়ে প্রদর্শিত হয়। ইংরেজিতে কেরাটিন শব্দের বানান "কেরাতিন", তাই একে বলা হয় "প্রোটিনেস কে"।

নেটিভ প্রোটিনগুলি কাটানোর উচ্চ শক্তি থাকার কারণে এই এনজাইম বিভিন্ন আণবিক জীববিজ্ঞান কৌশলগুলিতে কার্যকর। এটি মূলত উচ্চ আণবিক ওজন (এমডাব্লু) নিউক্লিক এসিডগুলি বিচ্ছিন্ন এবং প্রস্তুত করতে ব্যবহৃত হয়।

প্রোটিনেজ কে পারমাণবিক ডিএনএ প্রকাশ করে কাজ করে, প্রোটিনগুলি ধ্বংস করে এবং আরএনএস এবং ডিএনসেসকে নিষ্ক্রিয় করে তোলে, এটি ডিএনএ এবং আরএনএ প্রস্তুতির নিউক্লিজকে নির্মূল করে।

অন্যদিকে, এটি দেখা গেছে যে প্রোটিনেজ কে কিছু অবনতিযুক্ত দেশীয় প্রোটিনকে হাইড্রোলাইজ করতে পারে যা প্রিয়া প্রোটিন (পিআরপিসি) এর গবেষণায় এর ব্যবহারের জন্য গবেষকদের আগ্রহ জাগিয়ে তুলেছে।

যাইহোক, তাদের উচ্চ প্রোটোলিটিক শক্তি সত্ত্বেও, এমন প্রোটিন রয়েছে যা প্রোটিনেস কে এর ক্রিয়া প্রতিরোধী them তাদের মধ্যে প্রিনস (প্রিপিএসসি) নামক কিছু অস্বাভাবিক প্রোটিন রয়েছে, সংক্রামক স্পঞ্জিফর্ম এনসেফালোপ্যাথিগুলির সাথে যুক্ত।

প্রোটিনেজ কে বৈশিষ্ট্য

প্রোটিনেজ কে এর তিনটি স্তর নিয়ে গঠিত একটি স্তরীয় কাঠামো রয়েছে, যেখানে সাতটি চেইন-শীট হেলিকেলের দুটি স্তরের মাঝে ফাঁকা থাকে। যেহেতু এটি পেপটাইডেসের এস 8 পরিবারের অন্তর্গত, এটির সক্রিয় সাইটে একটি অনুঘটক ট্রাইড থাকার বৈশিষ্ট্যযুক্ত, যার ক্রমিক ক্রমটি হ'ল (অ্যাস্প, তাঁর এবং সের), যা তাদের পেপটিডেসের অন্যান্য পরিবার থেকে পৃথক করে।

সিরিয়ান প্রোটেসের গ্রুপের এই এনজাইমটি অ্যালিফ্যাটিক এবং অ্যারোমেটিক অ্যামিনো অ্যাসিডের কার্বোঅক্সিলিক গোষ্ঠীর নিকটবর্তী পেপটাইড বন্ধনগুলিকে হাইড্রোলাইজিং দ্বারা চিহ্নিত করা হয়।

অন্যদিকে, এটি কিছু ক্ষয়কারী পদার্থের উপস্থিতিতে অভিনয় করতে সক্ষম, যেমন সোডিয়াম ডডিসিল সালফেট (এসডিএস), ট্রিস-এইচসিএল এবং ইডিটিএ, যা প্রোটিনের ক্ষয়ক্ষতিতে সহায়তা করার জন্য ব্যবহৃত হয়, যার ফলে তারা তাদের স্থানীয় কাঠামো হারাতে পারে।

ইলেক্ট্রোফোরসিস কৌশলটির জন্য প্রোটিন প্রস্তুত করার এটি প্রাথমিক পদক্ষেপ। প্রোটিনেস কে কাজ করে এমন পিএইচ পরিসীমা 7.5 থেকে 12.0 এর মধ্যে অনুকূল পিএইচ সহ বেশ প্রশস্ত (2.0 থেকে 12.0), এবং এর আইসোইলেকট্রিক পয়েন্ট 8.9 হয়। যেমন দেখা যায়, এটি খুব প্রশস্ত পিএইচ ব্যাপ্তির বিপরীতে সক্রিয়।

আরেকটি বৈশিষ্ট্য যা প্রোটিনেস কেতে দাঁড়িয়ে থাকে তা হ'ল উচ্চ তাপমাত্রার উপস্থিতি (50 - 60 ° C) এর স্থায়িত্ব।

এনজাইমের কার্যকলাপ

প্রোটিনেজ কে ক্যালসিয়াম আয়ন উপস্থিতি প্রয়োজন, যদিও এটি এর কার্যকলাপকে প্রভাবিত করে না, যদি এটির স্থায়িত্ব বজায় রাখা অপরিহার্য হয়।

প্রোটিনেস কে সাবস্ট্রেটকে পুরোপুরি হজম করার জন্য, প্রায় 5 মিনিট থেকে 2 ঘন্টা যোগাযোগের সময় প্রয়োজন।

যাইহোক, এই অর্থে, ডাজা এট আল প্রোটিনেজ কে এর সংস্পর্শের বিভিন্ন সময়ে প্রাপ্ত ডিএনএর বিশুদ্ধতার সাথে তুলনা করে এবং এই সিদ্ধান্তে পৌঁছে যে একটি দীর্ঘায়িত ইনকিউবেশন (24 ঘন্টা অবধি) ডিএনএর গুণমানকে উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নতি করে।

তবে বিভিন্ন প্রোটোকলে ব্যবহৃত প্রোটিনেস কে এনজাইমের ঘনত্বের সাথে সম্পর্কিত, এটি বলা যেতে পারে যে এটি খুব বৈচিত্র্যময়।

এটি খুব কম ঘনত্বের (5 /g / ml) থেকে 500 µg / ml এর ঘনত্ব পর্যন্ত ব্যবহার করা যেতে পারে। তবে সবচেয়ে সাধারণ কাজের ঘনত্ব 50-100g / মিলি থেকে শুরু করে, বিশেষত প্রোটিন হজম এবং নিউক্লিজ নিষ্ক্রিয়তার জন্য। টিস্যুগুলির চিকিত্সার জন্য যদিও 2 মিলিগ্রাম / মিলি ঘনত্বের প্রয়োজন হয়।

অ্যাপ্লিকেশন

এর অ্যাপ্লিকেশনগুলি খুব বিস্তৃত এবং নিম্নলিখিত হিসাবে সংক্ষিপ্ত করা যেতে পারে:

এটি বিভিন্ন পদ্ধতির যেমন প্রোটিন এবং ডিএনএ নিষ্কাশন হজমে ব্যবহৃত হয়: সল্টিং-আউট, পিকে-এসডিএস, সিটাইল-ট্রাইমেথাইল অ্যামোনিয়াম ব্রোমাইড (সিটিএবি), পরিবর্তিত পটাসিয়াম অ্যাসিটেট এবং সোডিয়াম আয়োডাইডের সাথে নিষ্কাশন।

নিউক্লিজিজ (আরএননেস এবং ডিনেসেস) এর অ্যাক্টিভেশন।

- অবাঞ্ছিত প্রোটিন নির্মূল করার পাশাপাশি নিউক্লিক অ্যাসিড নিঃসরণে সহায়তা করার জন্য সিটু হাইব্রিডাইজেশন কৌশল (এইচআইএস) -এ n

প্রোটিন সংশোধন

- গবেষণা পর্যায়ে, বিভিন্ন গবেষণায়।

প্রোটিনেজ কে এর সুবিধা

ডিএনএ নিষ্কাশন কৌশলগুলির মধ্যে যেগুলি প্রোটিনেজ কে ব্যবহার করে, অন্যরা এটি ব্যবহার করে না এবং এঞ্জাইম ব্যবহার করার সময় আরও বেশি সুবিধা রয়েছে বলে সিদ্ধান্ত নিয়েছে তার মধ্যে বেশ কয়েকটি তুলনামূলক গবেষণা করা হয়েছে। সুবিধার মধ্যে নিম্নলিখিত অন্তর্ভুক্ত:

উচ্চতর আণবিক ওজনের, উচ্চ মানের এবং বিশুদ্ধতার ডিএনএ প্রাপ্ত হয়।

- উত্তোলিত ডিএনএ 3 মাস পর্যন্ত স্থিতিশীল থাকে।

নিষ্ক্রিয় ডিএনএ নিম্নলিখিত কৌশলগুলিতে ব্যবহার করা যেতে পারে: দক্ষিণী ব্লট, পলিমারেজ চেইন রিঅ্যাকশন (পিসিআর), ইলেক্ট্রোফোরেসিস, অন্যদের মধ্যে।

প্রোটিনেজ কে প্রতিরোধী প্রোটিন

বিভিন্ন তদন্তে সিদ্ধান্ত নেওয়া হয়েছে যে প্রিনসেস (ক্রমনীয় অস্বাভাবিক বিষাক্ত পিপিএসসি প্রোটিন) প্রোটিনেস কে এর ক্রিয়া প্রতিরোধী হয়ে প্রিপিসি (দেশীয়) প্রোটিন থেকে পৃথক হয়, এবং প্রিপিসিগুলি এর ক্রিয়া সম্পর্কে সংবেদনশীল থাকে।

অন্যান্য লেখক বর্ণনা করেছেন যে পিপিএসসি-র কাঠামোতে সংবেদনশীল অংশ রয়েছে এবং অন্যরা প্রোটিনেজ কে প্রতিরোধী। তবে, উভয় অংশই সমানভাবে বিষাক্ত এবং সংক্রামক are

অন্যদিকে, বাস্তিয়ান এট আল 1987 সালে স্পিরোপ্লাজমা মিরুমের একটি প্রজাতি থেকে 28, 30, 66 এবং 76 কেডিএর 4 টি প্রোটিন বিচ্ছিন্ন করে। সকলেই প্রোটিনেস কে এর ক্রিয়া প্রতিরোধী বলে প্রমাণিত হয়েছিল এবং কিছু প্রিয়ানের সাথে ক্রস-প্রতিক্রিয়াও ছিল।

জানা যায় যে এই প্রজাতিটি ছানি এবং গুরুত্বপূর্ণ স্নায়বিক ক্ষতি করতে পারে এবং বাসটিয়ের বৈজ্ঞানিক অনুসন্ধানের কারণে অন্যান্য তদন্তের মধ্যেও এই অণুজীবকে সংশ্লেষযোগ্য স্পঞ্জিফর্ম এনসেফালোপ্যাথিগুলির সাথে সংযুক্ত করার চেষ্টা করা হয়েছে।

যাইহোক, এই ডিজেনারেটিভ নিউরোলজিকাল প্যাথলজির এটিওলজি আজও প্রিন্সকে দায়ী করা হচ্ছে।

এই অর্থে, বাটলার এট আল 1991 সালে মাইকোপ্লাজমা হাইওরহিনিসের দুটি স্ট্রেন থেকে 40 কেডির প্রোটিনেজ কে প্রতিরোধী এক শ্রেণীর প্রোটিন চিহ্নিত করে চিহ্নিত করেছিলেন। এই রোগজীবাণু তাদের টিস্যুগুলিকে সংক্রামিত করে শুকরকে প্রভাবিত করে, তবে এই ক্ষেত্রে পরীক্ষিত প্রিন্সগুলির সাথে কোনও ক্রস-প্রতিক্রিয়া দেখা যায়নি।

এক্ষেত্রে অনেক অজানা বর্ণনা করার জন্য আরও গবেষণা করা দরকার।

তথ্যসূত্র

1. বাসটিয়ান এফ, জেনিংস আর, এবং গার্ডনার ডব্লিউ। জে ক্লিন Microbiol। 25: 2430-2431।
2. ডাজা সি, গিলেন জে, রে জে, রুইজ ভি। অজ্ঞাত ক্যাডারগুলির ফর্মালডিহাইড-স্থির পেশী টিস্যু থেকে একটি ডিএনএ নিষ্কাশন এবং পরিশোধন পদ্ধতির মূল্যায়ন। মেড ম্যাগাজিন, 2014; 22 (1): 42-49,
3. বাটলার জি, কোটানি এইচ, কং এল, ফ্রিক এম, ইভানচো এস, স্ট্যানব্রিজ ই, এবং ম্যাকগারটিটি জি। সংক্রমণ এবং প্রতিরোধ ক্ষমতা, 1991, 59 (3): 1037-1042 42
4. ল্যাপেজ এম, রিভেরা এম, ভিয়েত্রি এম, ল্যারেস এম, মোরোকোইমা এ, হেরেরা এল, ইত্যাদি। অক্ষীয় মাধ্যমের জন্মে দুটি ট্রিপানোসোমা ক্রুজি ডিএনএ নিষ্কাশন প্রোটোকলের তুলনা। রেভ। পেরু মেডিকেট এক্সপ্রেস। জনস্বাস্থ্য 2014; 31 (2): 222-227। উপলভ্য: scielo.org
5. জিমনেজ জি, ভিল্লোবস এম, জিমনেজ ই এবং পালমা ডব্লিউ। আণবিক অধ্যয়নের জন্য প্যারাফিনাইজড উপাদান থেকে পাঁচটি ডিএনএ নিষ্কাশন প্রোটোকলের কার্যকারিতা নির্ধারণ। রেভ মাড ইউনিভ কোস্টা রিকা। 2007; 1 (1): 10-19।